上海生科院构建细胞核内长非编码RNA的新型表达载体

11月5日,国际学术期刊Nucleic Acids Research在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所陈玲玲研究组关于研究细胞核内长非编码RNA的新型表达载体。该研究首次构建了一种可以将外源过表达的RNA滞留在细胞核内的载体(snoVector),而且过表达的RNA具有生物学功能。 长非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA),一般是指长度大于200个核苷酸,但是不具有编码功能蛋白质能力的长链RNA分子。已有很多研究表明,lncRNAs广泛参与一系列的基因表达调控和生物学过程。有意思的是,许多lncRNAs所介导的调控是发生在细胞核内的,因此需要新的工具来研究其在细胞核内的功能。 如同研究编码基因一样,lncRNA也需要通过质粒载体将其在细胞内进行过表达来研究。然而,目前已知的真核表达载体多数是用来表达编码基因的,载体上含有转录元件、翻译元件和一些促进核质运输(......阅读全文

痘苗载体转染细胞实验

实验方法原理 将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上,外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后,将重组质粒转染病毒感染的细胞,痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分发生同源重组。应用适当的筛选方案,经几轮噬斑纯化,从细胞裂解物中获得重组病毒。实验材料 pSCll/pRB21/pSC65/pLW

痘苗载体转染细胞实验

CaCl2 法 DOTAP 法             实验方法原理 将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上,外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后,将重组质

固定化细胞技术载体要求及常用载体介绍

①载体应是亲水的,疏水载体与有机溶剂相同的变性影响。②载体也是要求有一定的机械强度和稳定性。③常用的载体包括:1、天然高分子(纤维素、琼脂糖、淀粉、葡萄糖凝胶、胶原及其衍生物等)2、合成高聚物(尼龙。多聚氨基酸等)3、无机支持物(多孔玻璃、金属氧化物等)

细胞化学词汇[运]载体DNA

中文名称:[运]载体DNA英文名称:carrier DNA定  义:在通过转化或转染将外源DNA导入细胞时所用的起辅助作用的DNA。如鲑鱼精子DNA。运载DNA的存在可以增加转化或转染的效率。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

细胞化学词汇可复制型载体

中文名称:可复制型载体英文名称:replication-competent vector定  义:含有完整复制起始点序列的载体,能够在一定条件下自行启动复制。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

痘苗载体转染细胞实验——DOTAP-法

实验方法原理将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上,外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后,将重组质粒转染病毒感染的细胞,痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分发生同源重组。应用适当的筛选方案,经几轮噬斑纯化,从细胞裂解物中获得重组病毒。实验材料pSCll/pRB21/pSC65/pLW9

简介固定化细胞技术的载体

  ①载体应是亲水的,疏水载体与有机溶剂相同的变性影响。  ②载体也是要求有一定的机械强度和稳定性。  ③常用的载体包括:1、天然高分子(纤维素、琼脂糖、淀粉、葡萄糖凝胶、胶原及其衍生物等)2、合成高聚物(尼龙。多聚氨基酸等)3、无机支持物(多孔玻璃、金属氧化物等)

细胞化学词汇可复制型载体

中文名称:可复制型载体英文名称:replication-competent vector定  义:含有完整复制起始点序列的载体,能够在一定条件下自行启动复制。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

细胞化学词汇自主复制载体

中文名称:自主复制载体英文名称:autonomously replicating vector定  义:含有能够充当复制起始位点的DNA序列的质粒,可以在细胞中进行独立复制。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

细胞“垃圾桶”或是癌症扩散载体

一种称为中体残余物的小细胞气泡,曾被认为是细胞的“垃圾桶”,但实际上,中体残余泡也能装载有效遗传物质,具有改变其他细胞命运的能力,甚至包括将其变成癌细胞。据发表在最新一期《发育细胞》杂志上的研究,美法联合团队跟踪分析了细胞分裂后释放的中体残余泡的内容及其相互作用。结果表明,中体是癌症在全身扩散的载体

微载体细胞培养法介绍

(1)微载体选择:先用利用三种小量微载体做培养实验,观察细胞在一定时间内细胞的吸着率和计算细胞数,以得到最大量细胞为佳。(2)水化:称一定量的微载体放入容器中,按每克微载体加50~100ml的比例,加入无Ca2+和Mg2+的磷酸缓冲液(PBS),室温下放置应不少于3小时,并不时轻微搅动,然后再用新鲜

把红细胞转变为药物载体

   红细胞穿越血管把氧气输送到几乎身体的各个角落和缝隙。但并不是所有的红细胞能够携运氧气的。一个研究人员团队,通过工程红细胞表面上具有的“粘性”蛋白,赋予红细胞携运无论从治疗免疫性疾病或癌症的药物到用于血管成像的放射性分子的能力。  没有参与这项新研究的宾夕法尼亚大学生化学家弗拉迪米尔·米兹坎德夫

细胞治疗与基因治疗载体纯化

  细胞治疗是将细胞转移到一个病人身上,其目的是改善或治疗疾病。细胞治疗策略包括分离和转移特定的干细胞群,执行效应细胞,诱导成熟细胞成为多能性细胞,以及成熟细胞的重新编程。  基因治疗是一种新的治疗手段,是指将外源正常基因导入靶细胞,以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,以达到治疗目的。即将外源基

特殊细胞培养实验_微载体细胞培养法

实验方法原理微载体细胞培养开始于60年代末期,最早使用离子交换凝胶作为载体,轻微搅动即可悬液在培养基中,因而可增加细胞附着的面积,达到大量培养细胞的目的。后来,根据细胞附着生长的特点,对微载体进行了改良,使其带有电荷或其它介质,更利于细胞附着和生长。这一方法亦可用于常规量的培养,也可用于大规模的培养

3D细胞培养:干细胞微载体的应用

       干细胞培养方法        当前干细胞最主要的培养方法仍是2D培养,2D培养仅在一个平面上支持干细胞生长,无法再现生物体内细胞真实的3D立体微环境。2D培养环境在生物活性、培养基结构、营养物质的释放等很多方面均远不及3D培养,使干细胞逐渐丧失其原有的性状、形态、结构和功能,导致其

真核细胞表达系统的类型与常用真核细胞表达载体

原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统,由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷,人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。自上世纪70年代基因工程 技术诞生以来,基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行,在技术方法上得到了很大发展,时至今

PNAS:红细胞可作为全身给药载体

  当红细胞穿越血管时,它们将氧气传递到你身体几乎每一个角落和空隙。但是氧气并不是它们能 携带的唯一东西。目前,麻省理工学院一个研究小组通过设计红血细胞,使其表面具有“粘性”蛋白质,赋予这些细胞携带任何东西的能力,从治疗免疫系统疾病或 癌症的药物,到用于血管成像的放射性分子。相关研究结果发表在6月3

细胞替代治疗和基因治疗的载体

  胚胎干细胞最诱人的前景和用途是生产组织和细胞,用于“细胞疗法”,为细胞移植提供无免疫原性的材料。任何涉及丧失正常细胞的疾病,都可以通过移植由胚胎干细胞分化而来的特异组织细胞来治疗。如用神经细胞治疗神经退行性疾病(帕金森病、亨廷顿舞蹈症、阿尔茨海默病等),用胰岛细胞治疗糖尿病,用心肌细胞修复坏死的

什么是动物细胞的微载体培养

微载体培养:微载体以细小的颗粒作为细胞载体,通过搅拌悬浮在培养液内,使细胞在载体表面繁殖成单层的一种细胞培养技术。可以充分利用培养液,保持了贴壁细胞的生长特性,还可以进行高密度培养。

痘苗载体转染细胞实验——CaCl2-法

实验方法原理将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上,外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后,将重组质粒转染病毒感染的细胞,痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分发生同源重组。应用适当的筛选方案,经几轮噬斑纯化,从细胞裂解物中获得重组病毒。实验材料pSCll/pRB21/pSC65/pLW9

细胞生物学术语离子载体

中文名离子载体外文名ionophore性    质提高膜对某些离子通透性的载体类    型通道形成和离子运载

干货|细胞治疗与基因治疗载体纯化

  细胞治疗是将细胞转移到一个病人身上,其目的是改善或治疗疾病。细胞治疗策略包括分离和转移特定的干细胞群,执行效应细胞,诱导成熟细胞成为多能性细胞,以及成熟细胞的重新编程。图片来源于网络  基因治疗是一种新的治疗手段,是指将外源正常基因导入靶细胞,以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,以达到治疗目

强荧光载体在肿瘤细胞、神经细胞、干细胞等细胞中的应...

强荧光载体在肿瘤细胞、神经细胞、干细胞等细胞中的应用实例我们在细胞、动物实验操作时,常常都需要依赖荧光标记。如果能让这荧光亮一点,再亮一点,会带来什么样的改变呢~有图有真相!这画面太美我不敢看哦~大家找到自己的细胞了吗?A549 人肺癌细胞RKO 人结肠癌细胞Hela 人宫颈癌细胞MDA-MB-23

强荧光载体在肿瘤细胞神经细胞干细胞等细胞中应用实例

  我们在细胞、动物实验操作时,常常都需要依赖荧光标记。如果能让这荧光亮一点,再亮一点,会带来什么样的改变呢~   有图有真相!这画面太美我不敢看哦~大家找到自己的细胞了吗?   A549 人肺癌细胞   RKO 人结肠癌细胞   Hela 人宫颈癌细胞   MDA-MB-231 人乳腺癌

3D细胞培养:干细胞微载体的应用(二)

     3D干细胞培养材料需要具备的特点:       (1) 三维多孔结构  适宜的空间结构和孔隙率,有利于干细胞的黏附、生长增殖。       (2) 较好的生物相容性  材料对干细胞无毒性作用,可以和干细胞稳定结合,且干细胞在生物体内不会诱发排斥或炎症反应等。       (3) 具备生物可

质粒载体的载体大小的介绍

  大的质粒(大于15kb)不会很好转化而且DNA产量通常很低。在设计实验时要考虑到加入插入片段的最终载体大小,尽量用更小的载体。  兼容性  当多于一个质粒载体必须同时存在于同一个细菌细胞中,这两个质粒的复制子必须是兼容的。当他们不能稳定地共存时,则认为这两个质粒是不兼容的。  选择/检测插入片段

微载体细胞培养技术及应用原理

  微载体细胞培养技术是细胞培养过程中常见的一种细胞培养技术。关于微载体细胞培养技术,以动物细胞为例,具体介绍如下:   一、微载体培养技术的应用   微载体培养技术于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展,该技术目前已渐日趋完善和成熟,并广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。

LITMUS39载体载体载体的基本信息和质粒图谱

LITMUS39载体载体基本信息载体名称LITMUS39载体抗性Ampicillin载体长度2817 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Evans PD, Cook SN, Riggs PD, Noren CJ.拷贝数High copy number5'引物M13

微载体

            实验方法原理 以高浓度接种细胞和微珠,然后按照要求进行稀释、搅拌和取样。 实验材料 起始培养物

微载体

实验方法原理以高浓度接种细胞和微珠,然后按照要求进行稀释、搅拌和取样。实验材料起始培养物仪器、耗材生长培养基微载体搅拌培养瓶磁力搅拌器实验步骤1. 按照所需最终培养液量的 1/3,以 2~3 g/L 混悬微珠。2. 用胰蛋白酶消化和计数细胞,以正常接种浓度的 3~5 倍将细胞接种到微珠悬液中。3.