氧化损伤在遗传性朊病毒病发生中的作用机制

近日,中国科学院武汉病毒研究所在朊病毒导致神经变性疾病的机制研究中取得新进展,相关研究成果以Methionine oxidation accelerates the aggregation and enhances the neurotoxicity of the D178N variant of the human prion protein 为题在Biochimica et Biophysica Acta -Molecular Basis of Disease 刊印发表(BBA. 2014 Dec;1842(12 Pt A):2345-56. doi: 10.1016/j.bbadis),第一作者为博士生冯博雅,通讯作者为周拯副研究员和肖庚富研究员。 朊病 毒病(prion diseases)是由朊病毒蛋白构象的异常变化引起的神经系统变性疾病,人的库鲁病(Kuru)、吉斯综合症(GSS)、致......阅读全文

病毒转化细胞

实验概要病毒转化细胞实验步骤1.血液制备:柠檬酸(Citric Acide)或肝素抗凝取血1~2ml,分装入管中,每管0.5ml全血,置于4℃冰箱中30分钟。2.EBV病毒转化:从液氮中取出冻存的0.5ml全血,在37℃水中迅速解冻。3.将解冻细胞与10ml不含血清的RPMI 1640混合,2500

巨细胞病毒的病毒特征

  病毒性状  CMV具有典型的疱疹病毒形态,其DNA结构也与HSV相似,但比HSV大5%。本病毒对宿主或培养细胞有高度的种特异性,人巨细胞病毒(HCMV)只能感染人,及在人纤维细胞中增殖。病毒在细胞培养中增殖缓慢,复制周期长,初次分离培养需30~40天才出现细胞病变,其特点是细胞肿大变园,核变大,

如何选择病毒细胞培养的病毒?

  病毒会感染几乎每一种生物机体,无论是人、老鼠、跳蚤还是细菌,都逃脱不了病毒的攻击。但是这些寄生生物无法独立生活:它们需要进入宿主细胞内部,这也就是为什么病毒学家也需要培养细胞,不过要想掌握这种细胞培养技术,就必须对病毒和宿主细胞都有所了解。  因为这个过程并不是简单的把病毒和细胞都放到培养皿中就

Nature:武汉病毒所确认病毒进入细胞路径

  自18年前的SARS爆发以来,在其天然宿主蝙蝠中发现了许多严重的急性呼吸综合症相关冠状病毒(SARSr-CoV)。先前的研究表明,其中一些蝙蝠SARSr-CoV具有感染人类的潜力。  2020年2月3日,中国科学院武汉病毒所石正丽团队在Nature 在线发表题为“A pneumonia outb

巨细胞病毒防治

CMV在人群中感染非常广泛,中国成人感染率达95%以上,通常呈隐性感染,多数感染者无临床症状,但在一定条件下侵袭多个器官和系统可产生严重疾病。病毒可侵入肺、肝、肾、唾液腺、乳腺其他腺体,以及多核白细胞和淋巴细胞,可长期或间隙地自唾液、乳汗血液、尿液、精液、子宫分泌物多处排出病毒。通常口腔,生殖道,胎

免疫细胞抗病毒

  抗病毒免疫就是机体针对病毒的免疫,包括非特异性免疫和特异性免疫两种免疫模式。  非特异性免疫是控制病毒复制和扩散的关键,作为除皮肤外的第二道免疫防线,可阻断限制病毒的增殖和扩散。  特异性免疫包括细胞免疫和体液免疫,是人体免疫的第三道防线。T细胞主导的细胞免疫分泌各类细胞因子,介导识别、消灭被病

慢病毒转染细胞步骤

一、慢病毒  转染贴壁细胞实验方法 1、慢病毒转染前18-24小时,将贴壁细胞  以1×10^5/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×10^5/孔左右。 2、第二天,用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基  替换原培养基,加入适量病毒悬液。37℃孵育。

慢病毒转染细胞步骤

一、慢病毒转染 贴壁细胞实验方法1、慢病毒转染 前18-24小时,将贴壁细胞以1×10^5/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×10^5/孔左右。2、第二天,用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基,加入适量病毒悬液。37℃孵育。3、(对polybrene

巨细胞病毒介绍

  巨细胞病毒(Cytomegalovirus CMV)亦称细胞包涵体病毒,由于感染的细胞肿大,并具有巨大的核内包涵体,故名。  一、生物学性状  CMV具有典型的疱疹病毒形态,其DNA结构也与HSV相似,但比HSV大5%。本病毒对宿主或培养细胞有高度的种特异性,人巨细胞病毒(HCMV)只能感染人,

病毒感染细胞实验

病毒感染细胞实验可以用于:(1)将目的基因整合到大多数真核细胞。(2)将目的基因包装成病毒来感染细胞,从而得到表达满足实验需求。实验方法原理病毒包装的原理质粒DNA为能转录出慢病毒遗传物质(RNA),但不能翻译出慢病毒的外壳及蛋白成分的载体质粒,其同时连有目的基因和报告基因,psPAX2为能表达慢病

病毒感染细胞实验

病毒感染细胞实验             实验方法原理 病毒包装的原理质粒DNA为能转录出慢病毒遗传物质(RNA),但不能翻译出慢病毒的外壳及蛋白成分的载体质粒,其同时连有目的基因和

T细胞变身异型细胞大战EB病毒

  为早日将其他B细胞体内病毒逼出体外,参谋T细胞想出一个办法:每个细胞的内力就像一条溪流,或许溪流之力难以将病毒逼出体外,可是聚溪成海,将这些点滴内力聚在一起则威力惊人,将之在每个细胞的体内循环,病毒必受不了压力,而逼出体外,外面先锋可乘机将其斩首。可是既然病毒受不了这个压力,那B淋巴细胞可以忍受

肾小管细胞氧化性损伤模型

材料:DMEM培养基(Gibco BRL Co生产), 无糖DMEM培养基(Gibco BRL Co生产),NRKSIE 鼠。肾小管细胞株(购于华西医科大学内科实验室),乳 酸钠(国产分析纯试剂)。 方法 肾小管细胞培养 NRKSIE鼠肾小管细胞 用0.25% 胰蛋白酶消化,将小管细胞分离成单个细胞

巨细胞病毒的类型

  1.根据其感染的次序可分为:⑴原发感染(primaryinfection):指宿主初次感染CMV,而在感染前缺乏对CMV的任何特异性抗体(6个月以前的婴儿可有从母体被动获得的IgG抗体);⑵再发感染(recurrentinfection),是由于潜伏在宿主体内的病毒被重新激活(reactivat

病毒感染细胞实验(一)

实验方法原理 一、病毒的种类病毒有很多种,常见的有慢病毒和腺病毒1.1慢病毒1.1.1原理慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体,与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通 siRNA 载体相比,一方面可以扩增替代瞬时表达载体使

巨细胞病毒的防治

CMV在人群中感染非常广泛,中国成人感染率达95%以上,通常呈隐性感染,多数感染者无临床症状,但在一定条件下侵袭多个器官和系统可产生严重疾病。病毒可侵入肺、肝、肾、唾液腺、乳腺其他腺体,以及多核白细胞和淋巴细胞,可长期或间隙地自唾液、乳汗血液、尿液、精液、子宫分泌物多处排出病毒。通常口腔,生殖道,胎

巨细胞病毒的特征

  病毒性状  CMV具有典型的疱疹病毒形态,其DNA结构也与HSV相似,但比HSV大5%。本病毒对宿主或培养细胞有高度的种特异性,人巨细胞病毒(HCMV)只能感染人,及在人纤维细胞中增殖。病毒在细胞培养中增殖缓慢,复制周期长,初次分离培养需30~40天才出现细胞病变,其特点是细胞肿大变园,核变大,

怎么预防巨细胞病毒

观点——新生儿感染率高    巨细胞病毒一旦侵入人体,将长期存在于体内。血清学检验证实,成人中50%以上的人有巨细胞病毒感染,育龄妇女的感染率达60%,且大多数免疫正常的人常无症状表现,处于亚临床状态,在此状态下孕妇仍可以传染给胎儿(孕妇感染后传染给胎儿的可能性为30%-40%),对胎儿的生长发育造

病毒感染细胞实验(二)

三、质粒DNA在大肠杆菌里转化连接上目的基因的质粒转化大肠杆菌是为了让目的基因在大肠杆菌里扩增,然后提取质粒,以下是质粒DNA在大肠杆菌里转化的三步骤。3.1大肠杆菌感受态细胞的制备1)从大肠杆菌平板上挑取一个单菌落于3mlLB培养基的试管中,37℃振荡培养过夜。2)取0.4ml菌液转接到40mlL

慢病毒转染肝细胞方法

Lentivirus Transduction of Hematopoietic CellsMing-Jie Li and John J. RossiDivision of Molecular Biology, Beckman Research Institute of the City of Ho

巨细胞病毒的概述

  巨细胞病毒(Cytomegalovirus)是一种疱疹病毒组DNA病毒。亦称细胞包涵体病毒,由于感染的细胞肿大,并具有巨大的核内包涵体。[1]  巨细胞病毒分布广泛,其他动物皆可遭受感染,引起以生殖泌尿系统,中枢神经系统和肝脏疾患为主的各系统感染,从轻微无症状感染直到严重缺陷或死亡。

细胞化学词汇病毒癌基因

中文名称:病毒癌基因外文名称:viral oncogene类    型:癌基因位    置:存在于病毒(基因组属    于:RNA病毒定    义:病毒癌基因(viral oncogene):是存在于致癌DNA病毒和一部分逆转录病毒基因组中能使靶细胞发生恶性转化的基因。它不编码病毒结构成分,对病毒无

巨细胞病毒类型介绍

1.根据其感染的次序可分为:⑴原发感染(primaryinfection):指宿主初次感染CMV,而在感染前缺乏对CMV的任何特异性抗体(6个月以前的婴儿可有从母体被动获得的IgG抗体);⑵再发感染(recurrentinfection),是由于潜伏在宿主体内的病毒被重新激活(reactivatio

病毒的血清学实验——病毒红细胞凝集试验

实验方法原理有些病毒(如流感病毒等)表面有血凝素(为糖蛋白)在一定条件下,能与鸡,豚鼠的红细胞表面的糖蛋白受体结合而发生凝集现象。利用病毒血凝试验可以检测某些病毒的存在,滴定病毒的血凝效价,便可大致估计病毒颗粒的数量(1 个血凝单位=106病毒颗粒)。若血清中出现特异性抗体与相应病毒结合后,使病毒失

过氧化氢酶病毒感染、氧化损伤与CAT的作用

  病毒感染与氧化损伤密切相关:一方面,病毒感染引起ROS释放,ROS引起细胞膜磷脂层的脂质过氧化,这一过程生成的产物可以跨越细胞膜并引起膜转运和线粒体呼吸链的功能紊乱。另一方面,感染使吞噬细胞活化并释放前氧化性细胞因子,如TNF和IL-1。因此,ROS通常被视为病毒性疾病病理进程中引起细胞损伤的元

细胞色素氧化酶实验

 一、试剂    1%盐酸二甲基对苯二胺溶液.    1%α-萘酚-乙醇溶液. 二、试验方法    取37℃(或低于37℃)培养20h的斜面培养物一支,将两种试剂各2~3滴,从斜面上端滴下,并将斜面略加倾斜,使试剂混合液流经斜面上的培养物.如系平板培养物,则可用试剂混合液滴在菌落上. 三、结果   

细胞色素氧化酶试验

试剂  1%盐酸二甲基对苯二胺溶液。  1%α-萘酚-乙醇溶液。 试验方法  取37℃(或低于37℃)培养20h的斜面培养物一支,将两种试剂各2~3滴,从斜面上端滴下,并将斜面略加倾斜,使试剂混合液流经斜面上的培养物。如系平板培养物,则可用试剂混合液滴在菌落上。 结果  于2min内呈现蓝色者为阳性

细胞色素氧化酶实验

一、试剂1%盐酸二甲基对苯二胺溶液.1%α-萘酚-乙醇溶液. 二、试验方法取37℃(或低于37℃)培养20h的斜面培养物一支,将两种试剂各2~3滴,从斜面上端滴下,并将斜面略加倾斜,使试剂混合液流经斜面上的培养物.如系平板培养物,则可用试剂混合液滴在菌落上.三、结果于2min内呈现蓝色者为阳性.阳性

细胞色素C氧化酶染色

【临床意义】  现代生物化学等学科中,所用细胞色素这一名称系指细胞内含铁元素蛋白质。但是血红蛋白、肌红蛋白、过氧化物酶和过氧化氢酶等除外,功能已经明确的细胞色素或是一种酶,或是氧化还原的载体。  应用二甲基萘二胺和α-萘酚做染料显示细胞色素C氧化酶存在于骨髓细胞的胞浆内,相当于线粒体聚集的部位出现由

癌细胞能教唆正常细胞释放“类”病毒RNA

  乳腺癌为什么比其他肿瘤更具侵袭性?7月13日《Cell》报道了一项研究发现,癌细胞能迫使正常细胞像病毒一样生长,从而使肿瘤长大、抵抗治疗和扩散。科学家在患者(尤其是三阴性乳腺癌侵袭性病例)血液中发现了一种病毒类似物。宾夕法尼亚医学院的研究人员说,破解癌细胞的这一工作原理,将有望开辟针对性治疗方法