Supelco推出全新生物分离ESC18HPLC柱
Sigma-Aldrich(R)旗下分析品牌之一,Supelco 近日宣布推出基于全新的160Å熔融核(Fused CoreTM)色谱填料技术的快速、高效Ascentis Express peptide ES-C18 HPLC多肽分析柱。该款色谱柱高效、稳定,并且反相填料的多孔结构和孔径均经最优化处理,专适用于多肽和多聚肽的分离。 Sigma-Aldrich HPLC-GC部门市场部经理Wayne K. Way博士说: “许多多肽被用作治疗性药物来治疗许多疾病,如癌症、糖尿病以及各种免疫紊乱疾病。正是因为目前多肽生产技术的不断提高,促进多肽在治疗性药物方面的应用。因为其在药理方面的优势和药物治疗带来的挑战,多肽已经成为热门研究领域。Ascentis Express Peptide ES-C18 HPLC 柱可加速研究者完成在多肽鉴定、纯度监测以及定量分析方面的任务,较传统HPLC柱更加快速,更优异的分辨率。” 除......阅读全文
蛋白质与多肽提取分离方法3
1.3.4胶束电动毛细管层析(Micellar Electrokinetic Electorphoresis Chromatography, MECC)MECC的原理是在电泳液中加入表面活性剂,如SDS,使一些中性分子带相同电荷分子得以分离。特别对一些小分子肽,阴离子、阳离子表面活性剂的应用都可使之
蛋白质与多肽提取分离方法2
1.1.7 灌注层析(Perfusion Chromatography,PC)PC是一种基于分子筛原理与高速流动的流动相的层析分离方法,固定相孔径大小及流动相速度直接影响分离效果。试验证明其在生产、制备过程中具有低投入、高产出的特性。目前市场上可供应的PC固定相种类较多,适合于不同分子量的多肽分离
反相高效液相色谱3
方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验实验材料大分子量非极性多肽或蛋白质仪器、耗材层析柱HPLC 系统冷冻干燥器微量离心机标准的或专用 HPLC 仪器氮气实验步骤一、用于 RP-HPLC 纯化的大分子非极性多肽或蛋白质样品的制备1.将多肽样品(如果蛋白质是通过固相化学合成法得到的,质量在 30~5
PH梯度萃取分离及柱色谱分离原理
pH梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段.其原理是由于溶剂系统 pH变化改变了它们的存在状态(游离型或解离型),从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数.如混合黄酮苷元,由于结构中酚羟基的数目和位置不同,...
hplc极性超大的物质选择什么色谱柱
硅胶柱,HILIC色谱柱(如果样品是水溶性的话)
HPLC柱平衡慢的常见原因有哪些?
柱平衡慢的常见原因有哪些? 柱平衡慢的常见原因是,组分在旧的或新的流动相中对柱吸附强,或者,在新的流动相中浓度小甚至为零:a.流动相含有胺改良剂; b.流动相含有离子对试剂;硅胶柱;流动相中有四氢呋喃。可考虑采用专用柱用于特殊的方法,不用时将柱折下来,注满适当的溶剂或流动相,密封保管,不再作
HPLC色谱柱的特点和发展方向
高效液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术,是现代分离测定的重要手段。问世以来,因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生物化学、药物及临床分析。高效液相色谱是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比
现代生物分离技术在多肽蛋白质分离纯化中的应用
摘要:蛋白质是生物体的重要组成部分,在现代生物制药领域有着重要的作用,本文介绍了现代生物分离技术反胶束萃取、双水相萃取和电泳在多肽蛋白质分离中的应用和现状。关键词:蛋白质 反胶束萃取 双水相萃取 电泳一、前言随着基因工程和细胞工程的发展,尽管传统的分离方法(如溶剂萃取技术)已在抗生素等物质的生
反相高效液相色谱概述
结果与保留值之间的关系:利用RP-HPLC 分离多肽首先得确定不同结构的多肽在柱上的保留情况。为了获得一系列的保留系数,Wilce 等利用多线性回归方法对2106 种肽的保留性质与结构进行分析,得出了不同氨基酸组成对保留系数影响的关系,其中极性氨基酸残基在2~20 氨基酸组成的肽中,可减少在柱上
HPLC液相色谱柱中常用的专用色谱柱有哪些
从原料上分,分有机填料和无机填料,首先做成微米级的微球作为母粒,至于想要实现特殊的功能主要是在微球表面键合特殊的官能基团,专用柱这个应该不存在。
制备色谱技术的简答(二)
1 问: 我想购买waters600用于分析和制备,对于其配备有什么好的建议。答: 可以配一个PDA,另外加一个示差折光410,另外买几根制备柱就可以了。 waters600的流速最大为20mL/min,一般可以配20mm ID的制备柱,一次分离10-100mg的样品,如果样品量更大,可以通过
柱温如何影响分离度
对于液相色谱来说,柱温高可加快分离过程,但分辨率可能下降。柱温低,分辨率提高,但分离过程时间加长。柱温影响交换系数。 通俗的讲,色谱的过程是靠流动相中的样品和固定相的结合-分离差异达到分离物质的作用,温度可以影响结合-分离过程,从而影响色谱过程。
多肽药物分析结构概述与色谱柱选型(二)
末端的酰胺作为一个非常弱的酸/碱,在一般的分析条件下,可处理为中性,在分析过程中不用过多的考虑。当然这里的不用过多考虑仅仅指分析方法design的时候。在多肽药物的稳定性过程当中,如果肽链中存在此类氨基酸,需要特别关注水解的杂质。我们了解了形成多肽/蛋白质的基础单元——氨基酸。多个不同或者相同的氨基
多肽药物分析结构概述与色谱柱选型(一)
多肽类药物作为大分子药物和小分子药物之间的过渡态,也一直是制药领域关注的热点。多肽/蛋白质都是由氨基酸这个基础单元通过肽键(酰胺键-CO-NH-)及其他键键合而成的。目前,对于多肽并没有一个十分严格的划分规定,通常认为20个以下氨基酸组成的为短肽,也有认为5/10个氨基酸以下组成的为短肽;由20~5
色谱柱的分离柱效好坏由什么决定?
决定相邻组分分离好坏的主要因素有:*,两个组分的保留值之差,也就是色谱柱内迁移速率的差异;它取决于各组分与固定相、流动相的相互作用的差异。第二,组分的峰宽反映组分区带在移动过程中的扩张程度,很大程度上取决于色谱的分离条件。 在考虑液相色谱色谱柱的分离柱效时,需要特别注意以下几个问题。 *
专家共议驼血多肽分离制备关键技术
近日,由中科院兰州化物所和内蒙古东汇生物科技有限公司联合召开的“驼血资源高值化利用研讨会”在化物所召开。中科院兰州分院、兰州大学、甘肃省科学院自然能源研究所、内蒙古阿拉善盟科技局的相关领导和专家参加会议。 会议中,与会专家就“驼血多肽分离制备关键技术及产业化”系列问题进行了讨论。专家认为,该项
方案7-用-ESIMS-确定丝氨酸、苏氨酸的磷酸化位点实验
实验材料丙烯酰胺凝胶条中放射性标记的目标磷酸化蛋白试剂、试剂盒乙腈烷化剂甲酸β-巯基乙醇nano-RP-HPLC 缓冲液蛋白酶溶液还原剂三氟乙酸仪器、耗材超声仪HPLC 泵HPLC 系统质谱仪、带有纳喷离子源的ESI-MSnano-HPLC 柱预柱预柱分流器SEQUEST 软件试管实验步骤一、磷酸化
胰蛋白酶切磷酸化多肽作图_双向薄层电泳/层析分离多肽
实验材料多肽样品试剂、试剂盒电泳缓冲液仪器、耗材平板电泳仪实验步骤1. 将平板电泳仪(型号 FBE-3000, Phannacia) 放在通过循环仪连接到恒温水浴的冷却板上进行电泳。电泳前 30 分钟将水浴温度调至 10℃ 到 15℃ 之间。每个电极槽加 400 ml 缓冲液。切两张 Whatman
疏水作用色谱的相关介绍
HIC 是利用多肽中含有疏水基因,可与固定相之间产生疏水作用而达到分离分析的目的,其比RP-GPLC 具有较少使多肽变性的特点。利用GIC 分离生产激素(GH)产品的结构与活性比EP-GPLC 分离的要稳定,活性较稳定。Geng 等利用HIC 柱的低变性特点,将大肠杆菌表达出的经盐酸胍乙啶变性得
方案5-用-μLCESIMS/MS-对磷酸化多肽进行分析
实验材料IMAC 柱子上洗脱下来的多肽试剂、试剂盒乙酸七氯丁酸乙腈仪器、耗材HPLC 系统质谱仪micro-ESI 接口micro-LC 柱实验步骤1.根据制造商的建议,制备、清洗、平衡 uLC 柱。柱子的流速决定于柱子本身,一般 50um (内径)的柱子为 200nl/min 左右,100um (
HPLC柱在多功能毒品分析中的应用
在欧美许多国家,毒品肆虐,并日益侵蚀青少年群体。值得忧虑的是,世界上有许多人至今对毒品的危害还缺乏足够的认识。现代分析技术应用于毒品检验,为毒品案件的查缉和制贩毒人员的定罪、量刑提供了重要的刑事科学依据。毒品检验方法有免疫分析法、气相色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、联用分析技术等等。其中高效液
HPLC柱在多功能毒品分析中的应用
在欧美许多国家,毒品肆虐,并日益侵蚀青少年群体。值得忧虑的是,世界上有许多人至今对毒品的危害还缺乏足够的认识。 现代分析技术应用于毒品检验,为毒品案件的查缉和制贩毒人员的定罪、量刑提供了重要的刑事科学依据。毒品检验方法有免疫分析法、气相色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、联用分析技术等等。其中
HPLC柱后衍生法测定黄曲霉毒素
黄曲霉毒素主要污染粮食和油料作物。黄曲霉毒素的急性毒性极强,可引起急性肝炎。它还有明显的慢性毒性与致癌性,持续摄入可引起肝肿大,并发生肝硬化和癌变。世界卫生组织已明确认定黄曲霉毒素为致癌物,许多科学家甚至认为,黄曲霉毒素是目前已知的致癌性zui强的生物代谢产物。 黄曲霉毒素主要有4种:即B1、B2、
HPLC和UHPLC-色谱柱的十大误区
误区10 空气会彻底毁灭一根HPLC色谱柱 当色谱柱不与色谱仪连接的时候,用户需确保色谱柱被紧紧地密封。事实上,实际的应用中是,即使柱的端部进入了少量的空气也不要紧。因为当你将色谱柱连接到色谱仪上使用时,在系统初始加压阶段,在很短的时间内空气就会被溶剂冲刷掉。所以,不要因为色谱柱进入了空气而认
从HPLC色谱柱上去除样品残余物
因为样品中经常会含有能够吸附在色谱柱固定相上的杂质化合物,所以应该经常对色谱柱进行清洗或冲洗。当色谱柱在多次进样后显示出柱效降低时,有必要采用适当的流动相对色谱柱进行处理,冲洗除去吸附在固定相上的污染物和样品残余物。方法如下:●将色谱柱从系统上取下,反向连接到输液泵上。色谱柱出口不要连接到检测器上,
从HPLC色谱柱上去除样品残余物
因为样品中经常会含有能够吸附在色谱柱固定相上的杂质化合物,所以应该经常对色谱柱进行清洗或冲洗。当色谱柱在多次进样后显示出柱效降低时,有必要采用适当的流动相对色谱柱进行处理,冲洗除去吸附在固定相上的污染物和样品残余物。 方法如下: ●将色谱柱从系统上取下,反向连接到输液泵上。色谱柱出口不要连接到检
实验分析方法HPLC分离固定相基质的特征
由于HPLC分离过程涉及物理化学作用、流体动力カ学、热力学过程等,因而对固定相基质材料的物理化学性质有比较严格的要求。液相色谱固定相基质可分为无机氧化物、有机聚合物和无机有机杂化材料三种类型。杂化基质作为一类新型液相色谱固定相基质,近两年发展较快,但大多尚处于研究阶段。无机和有机两类基质的主要特征比
实验分析方法HPLC分离固定相基质的形态
目前HPLC分析中常用的几种形态的固定相如图1所示,主要包括全多孔微球、薄売型微球、灌流色谱固定相和整体材料,其中由于全多孔微球固定相具有能够很好地兼顾柱效、样品容量、使用寿命等众多理想的性质,应用最为普遍。图1 HPLC的微粒类型(a)全多孔微球;(b)薄壳型微球;(c)灌流色谱固定相;(d)整体
AKTA快速蛋白分离系统和HPLC-的优劣比较
HPLC 优点:高压 速度快 分析精度高 所需样本量少,主要用于分析 纯化多肽类缺点:柱子较贵 有些需要用乙氰甲醇等有毒有害试剂 不能或只能纯化 很小量的蛋白AKTA 系统 优点: 中低压 容易放大 可大规模纯化蛋白类 常规只用无机盐类试剂 可配备各种介质纯化不同蛋白 可自己灌胶 费用较少缺点:分析
HPLC中,分离度(R)计算公式是什么
R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)tR2:相邻两峰中后一峰的保留时间;tR1:相邻两峰中前一峰的保留时间;W1、W2:此相邻两峰的峰宽