基体固相扩散和GCMS测定动物组织中的甲状腺抑制剂

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动物组织块DNA的提取

【实验目的】(1)学习并掌握动物组织总DNA的提取方法及其原理。(2)从肝脏组织中提取到一定量的纯净的DNA样品。【实验原理】DNA是一切生物细胞的重要组成成分,主要存在于细胞核中。通过研磨和SDS作用破碎细胞;苯酚和氯仿可使蛋白质变性,用其混合液(酚:氯仿:异戊醇)重复抽提,使蛋白质变性,然后离心

动物组织块DNA的提取

实验目的 1. 学习并掌握动物组织总DNA的提取方法及其原理。 2. 从肝脏组织中提取到一定量的纯净的DNA样品。 实验原理 DNA是一切生物细胞的重要组成成分,主要存在于细胞核中。通过研磨和SDS作用破碎细胞;苯酚和氯仿可使蛋白质变性,用其混合液(酚:氯仿:异戊醇)重复抽提,使蛋白质变性,然后离

动物组织块DNA的提取

实验概要学习并掌握动物组织总DNA的提取方法及其原理。从肝脏组织中提取到一定量的纯净的DNA样品。实验原理DNA是一切生物细胞的重要组成成分,主要存在于细胞核中。通过研磨和SDS作用破碎细胞;苯酚和氯仿可使蛋白质变性,用其混合液(酚:氯仿:异戊醇)重复抽提,使蛋白质变性,然后离心除去变性蛋白质;RN

动物组织中DNA的制备

(一)原 理DNA是所有生物体的基本组成物质。真核生物DNA主要存在于细胞核中。制备DNA时应将细胞核膜打破方能释放出来。细胞中的DNA和RNA分别与蛋白质相结合,形成脱氧核糖核蛋白及核糖核蛋白。在细胞破碎后,这两种核蛋白将混杂在一起。因此,要制备DNA首先要将这两种核蛋白分开。已知这两种核蛋白在不

动物组织RNA提取及纯化

实验概要提取样品组织中的RNA并消除DNA污染实验原理Trizol裂解细胞使RNA释放beta巯基乙醇一直RNase活性酚-氯仿抽提分离RNARNase-Free DNase消除DNA污染主要试剂Trizol无水乙醇氯仿(三氯甲烷)异丙醇RQ1 RNase-Free DNase(Promega,M6

动物组织块DNA的提取

实验原理DNA是一切生物细胞的重要组成成分,主要存在于细胞核中。通过研磨和SDS作用破碎细胞;苯酚和氯仿可使蛋白质变性,用其混合液(酚:氯仿:异戊醇)重复抽提,使蛋白质变性,然后离心除去变性蛋白质;RNase降解RNA,从而得到纯净的DNA分子。实验试剂1.生理盐水2.十二烷基硫酸钠(SDS)3.三

动物组织样本的前处理

一、匀浆介质的制备:一般采用pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HCl, 1mmol/L EDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化钠溶液或直接用0.86%的生理盐水作为匀浆介质。二、组织匀浆的制备1、取组织块(0.1g~0.2g)zui少可到2~5mg在冰冷的生理盐水中漂洗

提取动物组织DNA的方法

【实验步骤】1.组织块解冻,用生理盐水洗去血污,剪取约0.5g组织,剪小放入2.0ml离心管中,用FM-200P研磨45秒;2.加入0.45ml TES混匀,再加入50ul SDS(10%),5.0ul蛋白酶K(20mg/ml),充分混匀后,于56°C保温4-6h,每2h摇1次。3.放置到室温,加入

动物组织样本的前处理

一、匀浆介质的制备:一般采用pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HCl, 1mmol/L EDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化钠溶液或直接用0.86%的生理盐水作为匀浆介质。二、组织匀浆的制备1、取组织块(0.1g~0.2g)zui少可到2~5mg在冰冷的生理盐水中漂洗

世界动物卫生组织通报两国动物疫情

   马耳他发生牛结核病疫情   2017年11月10日,马耳他向OIE通报称,2017年7月24日,马耳他Maghtab地区发生一起牛结核病疫情。   实验室、尸检发现,在本次疫情当中有137头牛疑似感染,其中4只发病,无牛死亡,宰杀21头。目前本次疫情仍在继续,马耳他将每周公布最新状况。   希

高通量组织研磨仪对动物器官组织的研磨

1.加钢珠1颗,设置研磨仪参数:12单位振频,1min,每种样品基本充分匀浆2. 将上述匀浆液每0.2体积 TRIzol 试剂用量的匀浆液中加入0.04体积,盖紧管盖,手动剧烈震摇15 秒钟,然后室温静置2~3 分钟。3. 4℃ 10,000g 离心10 分钟。4. 小心吸取上层水相(无色)加入到新

提取动物关节软骨组织总RNA

实验目的       研磨破碎软骨组织(大鼠膝关节软骨),提取其总RNA。 实验原理       充分磨碎软骨样品(大鼠膝关节软骨),再用相关试剂提取其总RNA。 实验材料和器具样品:大鼠膝关节软骨仪器:多样品组织研磨仪(上海净信,Tissuelyser-24)耗材:研磨罐(上海净信,***ml),

哺乳动物组织的匀浆实验

基本方案 附加方案:从组织匀浆液中去除黏蛋白             实验方法原理 对于细胞内蛋白的纯化和特性分析,重要的是选择一种有效的方法来破碎细胞或组织,使蛋白迅速地

实验动物组织标本的制备实验

实验材料 家兔豚鼠白鼠试剂、试剂盒 营养液仪器、耗材 注射器线浴槽实验步骤 通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2

细胞组织动物方面的应用

  快速繁殖品种  借腹怀胎提高种畜的利用率。20世纪30年代胚胎移植在绵羊和山羊中取得成功;1982年美国学者获得世界上第一胎试管牛。通过体外受精、细胞核移植技术、胚胎分割、胚胎融合等技术达到快速繁殖的目的,也有可能创造出高产奶牛、瘦肉型猪等新品种。通过胚胎工程、克隆技术等进行大熊猫、东北虎等珍稀

哺乳动物组织的匀浆实验

实验方法原理 对于细胞内蛋白的纯化和特性分析,重要的是选择一种有效的方法来破碎细胞或组织,使蛋白迅速地从胞内相对隔离的空间中释放到缓冲液中,而该缓冲液应对所研究的蛋白的生物活性没有影响。广泛使用的破碎软组织的方法之一是匀浆。蛋白酶从其他的细胞区隔中释放出来的风险很小。可以通过在匀浆缓冲液中加人蛋白酶

GCMS的原理

GCMS又叫气相色谱质谱联用仪。原理:GC通过将气化的样品进入到色谱柱内进行分离,分离之后的化合物进入MS内进行检测。通过集成NIST谱图检索功能,可以方便、准确检索目标分析物。GCMS是稳定高效EI源设计,实现了离子的高效传输,同时使离子源的温度更加均匀,发射电子流自动控制系统提供连续可调的50-

GCMS的原理

1、气相色谱原理:GC主要是利用物质的沸点、极性及吸附性质的差异来实现混合物的分离。待分析样品在汽化室汽化后被惰性气体(即载气,也叫流动相)带入色谱柱,柱内含有液体或固体固定相,由于样品中各组分的沸点、极性或吸附性能不同,每种组分都倾向于在流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。但由于载气是流动的,这

GCMS的原理

GCMS又叫气相色谱质谱联用仪。原理:GC通过将气化的样品进入到色谱柱内进行分离,分离之后的化合物进入MS内进行检测。通过集成NIST谱图检索功能,可以方便、准确检索目标分析物。GCMS是稳定高效EI源设计,实现了离子的高效传输,同时使离子源的温度更加均匀,发射电子流自动控制系统提供连续可调的50-

GCMS的原理

GCMS又叫气相色谱质谱联用仪。原理:GC通过将气化的样品进入到色谱柱内进行分离,分离之后的化合物进入MS内进行检测。通过集成NIST谱图检索功能,可以方便、准确检索目标分析物。GCMS是稳定高效EI源设计,实现了离子的高效传输,同时使离子源的温度更加均匀,发射电子流自动控制系统提供连续可调的50-

GCMS的原理

GCMS又叫气相色谱质谱联用仪。原理:GC通过将气化的样品进入到色谱柱内进行分离,分离之后的化合物进入MS内进行检测。通过集成NIST谱图检索功能,可以方便、准确检索目标分析物。GCMS是稳定高效EI源设计,实现了离子的高效传输,同时使离子源的温度更加均匀,发射电子流自动控制系统提供连续可调的50-

GCMS的原理

1、气相色谱原理:GC主要是利用物质的沸点、极性及吸附性质的差异来实现混合物的分离。待分析样品在汽化室汽化后被惰性气体(即载气,也叫流动相)带入色谱柱,柱内含有液体或固体固定相,由于样品中各组分的沸点、极性或吸附性能不同,每种组分都倾向于在流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。但由于载气是流动的,这

动物组织培养的问题有哪些?

  由于影响因素过多,细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决,因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。   1.培养试剂的保存:   血清:-5oC --20oC 保存,避免反复冻融。   培养基: 2oC – 8oC避

如何从动物组织中裂解得到蛋白

你好,提取总蛋白需要蛋白酶抑制剂和裂解液。一般是1:1进行配制。用的裂解液我们是RIPA。将组织用液氮研磨碎了,然后按量加入裂解液,细胞量在10七次方左右是100微升。冰浴裂解20分钟(间断摇动)。然后4摄氏度离心12000rpm,15分钟。吸取上清定量。根据测定量的结果将各样品总蛋白量调匀,然后等

如何从动物组织中裂解得到蛋白

提取总蛋白需要蛋白酶抑制剂和裂解液。一般是1:1进行配制。用的裂解液我们是RIPA。将组织用液氮研磨碎了,然后按量加入裂解液,细胞量在10七次方左右是100微升。冰浴裂解20分钟(间断摇动)。然后4摄氏度离心12000rpm,15分钟。吸取上清定量。根据测定量的结果将各样品总蛋白量调匀,然后等体积加

动物组织研磨样品典型实验方法

TL系列动物组织研磨仪具有对称的一对高速大振幅的摇臂,通过研磨珠在样品管内来回不规则撞击及摩擦,在几秒到几分钟内轻松实现样品的研磨、粉碎、混合及细胞破壁。精细的研磨,最细可以达到5微米。对于不同的的样品,TL系列动物组织研磨仪需要用不同的条件来处理,这里面主要涉及研磨速度、研磨时间、研磨温度和研磨珠

从动物组织提取基因组DNA

实验概要本实验以哺乳动物新鲜组织为材料,学习基因组DNA提取的一般方法。实验原理基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。利用基因组DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀

世界动物卫生组织通报加拿大等三国动物疫情

   食品伙伴网讯 据世界动物卫生组织(OIE)消息,近日OIE发布消息,通报加拿大、格鲁吉亚与波兰发生的动物疫情。   9月底美国农业部发布消息称,在美国屠宰的来自加拿大阿伯达的奶牛中发现1例牛结核病例。对此,加拿大食品检验局与省农业健康局对阿伯达东南部和萨斯喀彻温西南部开展检疫调查。感染源尚不清

什么是GCMS法

GCMS是GC与MS一体化的装置,检测化合物是什么(定性)和多少(定量)的精密分析仪器。GC通过将气化的样品进入到色谱柱内进行分离,分离之后的化合物进入MS内进行检测

哺乳动物组织样品RNA的抽提

哺乳动物组织样品RNA的抽提最基本的要素是防止RNA在抽提过程中降解,以及尽可能得到最高的RNA抽提效率。以下介绍我们实验室认为最符合以上两个要素的抽提方法。一、实验材料:Trizol试剂(Invitrogen公司)研钵,匀浆器,镊子,铝箔都高温灭菌即可;二、具体过程:1、样品在离体后应迅速冷冻在液