科学家确定一种新的与DNA复制相关的酶
美国和瑞典的科学家近日从酵母菌体内确定出一种新的酶，它有望在人类等高等生物的DNA复制过程中起着重要的作用。相关论文发表在7月6日的《科学》杂志上。 进行该项研究的是美国NIH国立环境卫生科学研究所（NIEHS）的Zachary Pursell、Thomas A. Kunkel以及瑞典Umeö大学的Erik Johansson等。NIEHS主任David A. Schwartz表示，新的研究进一步揭示了基因组不稳定性的起源，并加深了人们对一些环境疾病的深层机制的理解。 研究人员通过一种新的方法证实，这种名为DNA聚合酶ε （DNA polymerase epsilon）的酶在酵母菌的DNA先导链（leading strand）复制中起主要作用。同时，研究人员还发现，DNA聚合酶ε是影响基因组稳定性的决定因素，同时负责细胞对环境压力导致的DNA损伤的响应。 1953年，沃森和克里克等人就指出，DNA双......阅读全文
DNA片断的酶切技术
限制性内切酶是一类能识别双链DNA分子中特异核苷酸序列的DNA水解酶,这类酶的发现和应用促进了以DNA重组为基础的生物工程技术的迅猛发展。该类酶是体外剪切基因片段的重要工具，基因物理图谱的绘制、核苷酸序列的测定、基因片段的重组，重组子的筛选、探针的制备及各种杂交、测量基因的拷贝数,基因文库构建,分子
DNA聚合酶的概述
DNA聚合酶（DNA polymerase）是 细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板，从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具备模板、 引物、dNTP 等的情况下）及其相辅的活性。 真核细胞有5种DNA
DNA聚合酶的种类
原核生物大肠杆菌DNA聚合酶DNA聚合酶最早在E.coli中发现，到目前为止已确定有5种类型，分别为DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ、DNA聚合酶Ⅲ、DNA聚合酶Ⅳ和DNA聚合酶V，都与DNA链的延长有关。其中DNA聚合酶I、Ⅱ、Ⅲ研究得比较明确。 DNA聚合酶Ⅰ是1956年由Arthur Kombe
DNA重组技术：酶切、连接
实验原理: DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开，经分离纯化后，用链接酶将其连接，构成新的DNA分子。限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。如EcoRⅠ切割识别序列后产生两个互补的粘性末端。 5’…G↓A
DNA聚合酶及其应用
（一）大肠杆菌DNA聚合酶I是Kornberg A. 1956年首先从大肠杆菌E。Coli 细胞中分离出来的。它是一种多功能性的酶，包括 3种不同的酶活力：5′→ 3′聚合酶活性（模板， 带3′－OH游离基团的引物、4dNTPs、 Mg2+ ）。双链特异性的5'→3'核酸外切酶活性。
DNA聚合酶的缺点
缺点无3'→5'阅读校正功能，在PCR扩增过程可引起错配，30次循环错配率约0.25%。措施:选择高保真Taq酶，如Pfu。原因:Pfu具有3'→5'外切酶活性。注意:Pfu扩增产物为平末端。
DNA连接酶作用特点
1. 连接的两条链必须分别具有自由3’－OH和5’－P，而且这两个基团彼此相邻；2. 在羟基和磷酸基团间形成磷酸二酯键是一种耗能过程。E.coli DNA连接酶 －连接具互补碱基黏性末端(最初研究表明），现在研究可连接平末端；需NAD+辅助因子，活性低，不常用。T 4DNA连接酶－连接具互补碱基黏性
DNA片断的酶切实验
限制性内切酶是一类能识别双链DNA分子中特异核苷酸序列的DNA水解酶,这类酶的发现和应用可以用于以DNA重组为基础的生物工程技术。实验方法原理酶切指采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。实验材料DNA片段试剂、试剂盒TE缓冲液仪器、耗材离心机恒温水浴取液器电
DNA聚合酶的功能
[1] 聚合作用：在引物RNA'-OH末端，以dNTP为底物，按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸 加上去，就是DNApolⅠ的聚合作用。 酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有 催化作用。dNTP进入结合位点后，可能使酶的 构象发生变化，促进3&
DNA连接酶的性质
大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75Ku的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子数
DNA聚合酶及其应用
（一）大肠杆菌DNA聚合酶I是Kornberg A. 1956年首先从大肠杆菌E。Coli 细胞中分离出来的。它是一种多功能性的酶，包括 3种不同的酶活力：5′→ 3′聚合酶活性（模板， 带3′－OH游离基团的引物、4dNTPs、 Mg2+ ）。双链特异性的5'→3'核酸外切酶活性。
质粒DNA的双酶切
实验概要掌握质粒DNA双酶切的原理和操作方法。实验原理分子生物学实验中，基因的重组与分离涉及到一系列的酶促反应。许多种酶在基因克隆实验中有着广泛的用途。限制性内切酶是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的DNA水解酶。多种细菌能合成限制性核酸酶，这是它们保护自己，降解外来DNA分子的重要手段。每一
什么是DNA连接酶？
DNA 连接酶是生物体内重要的酶，其所催化的反应在DNA的复制和修复过程中起着重要的作用。DNA连接酶分为两大类:一类是利用ATP 的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖ATP的DNA 连接酶，另一类是利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+) 的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖N
DNA聚合酶的定义
真核细胞有5种DNA聚合酶，分别为DNA聚合酶α（定位于胞核，参与复制引发，不具有5'－3'外切酶活性及3'－5'外切酶活性，有5'－3'聚合酶活性），β（定位于核内，参与高保真度复制，不具有5'－3'外切酶活性，其中疑似存在5&#
DNA聚合酶的特性
原核生物大肠杆菌DNA聚合酶DNA聚合酶最早在E.coli中发现，到目前为止已确定有5种类型，分别为DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ、DNA聚合酶Ⅲ、DNA聚合酶Ⅳ和DNA聚合酶V，都与DNA链的延长有关。 其中DNA聚合酶I、Ⅱ、Ⅲ研究得比较明确。DNA聚合酶Ⅰ是1956年由Arthur Kombe
DNA－连接酶的性质
大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75Ku的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子数
DNA聚合酶的用途
聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)。Taq酶扩增的PCR产物，3'末端总是带有1个非模板依赖型的突出碱基，而这个碱基几乎总是A，因为Taq酶对dATP具有优先聚合活性，故可用T载体克隆。
DNA连接酶及其应用
（一）DNA连接酶的发现环形DNA分子的发现使科学家相信一定有一种能连接这种切口的酶存在。首个DNA连接酶(ligase)——大肠杆菌DNA连接酶，是1967年发现的，是大肠杆菌基因编码。1970年，发现了T4DNA连接酶，由大肠杆菌T4噬菌体基因编码的。（二） DNA连接酶作用特点1. 连接的两条
NatMethods：替代基因治疗的新技术
来自斯克里普斯研究所的科学家们发现了一种惊人简单及安全的破坏细胞内特异基因的新方法。科学家们证实其可作为实验性基因治疗一种更安全的替代用于对抗 HIV感染，由此显示了这一新技术的医疗潜力。相关论文发表在7月1日的《自然方法》(Nature Methods)杂志上。 “我们证实我们可以修
NIH排华调查新举动？华人学者李晓江实验室突遭美国关闭
日前，中国科学研遗传与发育生物学研究所研究员、埃默里大学终身教授李晓江的实验室突遭关闭，实验室所有成员上交了门卡，工作邮箱也被关闭，该校网页上有关李晓江的页面已经全部无法浏览，在埃默里大学医学院担任教授的李晓江教授的妻子李世华的也已无法打开，李教授名下还有三项美国国家卫生研究院（NIH）资助的在
NIH资助生物防御药物研发
美国国立卫生研究院（NIH）日前宣布，将给予华盛顿大学、得克萨斯大学和西雅图的Kineta公司810万美元的经费，以研发新的针对埃博拉、鼠疫、马尔堡出血热、黄热病以及其他疾病的药物。 这一资助将帮助Kineta公司将两种候选的小分子药物向临床试验迈出了一步。解决方案是开发RIG-I先
美NIH披露脑计划细节
针对BRAIN项目的NIH拨款申请将于2014年3月到期 在近一年的会议商讨和公开辩论后，美国国立卫生研究院（NIH）日前宣布了分配《使用先进革新型神经技术的人脑研究（BRAIN）倡议》资金的方案，这笔1.1亿美元的拨款旨在启动新技术的研发，绘制出人脑庞大而复杂的神经回路。简而言之，BRAIN计划
新主管掌舵NIH转化中心
Christopher Austin图片来源：NHGRI 今年9月，Christopher Austin接手了一个十分棘手的职位：美国国立卫生研究院（NIH）新设中心的领导。这个新的中心主要致力于将NIH的科研成果转化为产业应用。 2011年12月，美国国会批准投入5.75亿
限制性内切酶消化DNA实验——单酶单DNA样品消化
实验方法原理限制性内切酶种类虽然很多 , 但反应条件都十分相似 。一般需要较纯的底物DNA、Mg2+、Tris-HCl 缓冲液, 通常在37℃保温以酶解DNA 。实验材料限制性内切酶DNA片段试剂、试剂盒TE酶切缓冲液EDTA仪器、耗材恒温水浴锅实验步骤1. 混合下列溶液于一个无菌的微量离心管中（
瑞典科学家在数字彩色X射线技术方面取得突破
在不久的将来，医生将可以使用更小的X射线剂量来更有效的进行早期肿瘤检测。最近，Mid Sweden大学科学家发明的彩色X射线技术为医学诊断带来了一种新的方法。 数字彩色X射线技术的机理和核物理学家用来探测新的基本粒子的先进技术是一致的。而建造一台彩色X射线相机的最大挑战在于：如何
Sci－Trans－med：瑞典科学家发现男性不育新机制
近日，来自瑞典卡罗琳斯卡学院的研究人员发现男性不育与前列腺的自身免疫性炎症有关，相关研究结果发表在国际学术期刊 science translational medicine。 现在不孕不育情况的发生越来越多，其中有一半案例是由于男性不育造成的，虽然男性不育有很多可能的原因，但这种情况仍未得到完
瑞典科学家发现植物色素叶黄素可抑制炎症
瑞典林雪平大学（linkoping）研究人员最近进行的一项研究表明，富含色素的水果和蔬菜中的叶黄素可以抑制炎症。 据合众国际社报道，先前的研究已表明，饮食可影响身体的炎症过程。炎症被认为是引发许多类型的冠状动脉疾病，包括心绞痛和心肌梗死，的关键因素。 该大学医学和健康科学咨询心脏科教授
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张弥曼院士当选瑞典皇家科学院外籍院士
中国科学院院士、中国科学院古脊椎动物与古人类研究所研究员张弥曼，新近当选为瑞典皇家科学院外籍院士。张弥曼院士系浙江嵊县（今嵊州）人，我国著名的古生物学家和系统动物学家。她于1960年毕业于前苏联莫斯科大学地质系，并先后于1965年至1966年及1980年至1982年在瑞典国家自然历
美国富豪爱玩科学
微软公司缔造者， 59 岁的艾伦从2003年到现在，已经在艾伦脑科学研究所投入了5 亿美元，可以说是非常成功的，也因此深受许多科学家的尊重。11年后，艾伦再次给科学家一次惊喜，模仿大脑研究中的成功经验，建立艾伦细胞科学研究所。中国的马云等富豪从财富上并不亚于美国富豪，什么时候也能建立休斯医学研究