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实验方法原理 经肝门静脉或肝门静脉分支插管，用无钙缓冲液灌洗肝 15 min，再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞，计数有活力的肝细胞。试剂、试剂盒 L-15 Leibovitz 培养液Ham F12 培养液胞培养液HMM SF无钙 HEPES 缓冲液胶原蛋白酶液5% 戊巴比妥钠肝素仪器、耗材 聚乙稀管一次性 20 G 头皮静脉输液针缝合线 l 注射器水浴箱蝠动泵实验步骤 一、材料1. 无菌 （1）L-15 Leibovitz 培养液 （2）Ham F12 培养液或 WilliamE 培养液：80～100 ml，含有 0.2% 牛白蛋白（V 级，Sigma) 和 1 ug/ml 牛胰岛素 （3）胞培养液（hepatocyte minimalmediu，HMM )：67.5% EMEM 和 22.5%199 培养液，或用 William E 培养液代替这两种培养液。添加 5ug/ml ......阅读全文
例2. 从人血中分离红细胞，单核（白）细胞，中性（白）细胞 i. 新鲜人血（3～5）ml 用抗凝剂处理。 ii. 15ml 离心管中先注入5ml 分离液Polymorphprep（Nycomed Pharma A/S 公司产品）， 然后铺上用抗血凝剂处理过的人全血5ml 。 iii. 台
强迫游泳、悬尾、旷场实验相关-抗郁丸对CUMS抑郁症大鼠行为学及机理的影响摘要：目的 研究抗郁丸对慢性温和不可预见性应激（CUMS）抑郁症大鼠行为学及血清中甲状腺激素、细胞因子的影响，探讨抗郁丸治疗抑郁症的作用机理。方法 采用慢性温和不可预见性应激结合孤养方法构建CUMS大鼠模型。60只雄性大鼠随机
一、免疫学研究中实验动物的选择 在免疫学研究中，常选用以下的几种实验动物： (一)大鼠:大鼠对绵羊红细胞和牛r球蛋白的免疫反应有品系差异。大鼠有抗体IgE,蠕虫感染常能诱发大量的IgE抗体，它们存在于血液循环中,常规的免疫法只能使大鼠产生少
（一）一般光学显微镜术应用一般光学显微镜（简称光镜）观察组织切片是组织学研究的最基本方法。取动物或人体的新鲜组织块，先用固定剂（fixative）固定（fixation），使组织中的蛋白质迅速凝固，防止细胞自溶和组织腐败。常用的固定剂如洒精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化锇等，一般常将几种固定剂配制成混
1.四氯化碳体外损伤肝细胞模型原代培养的正常大鼠肝细胞培养24h（贴壁良好）后，置培养皿于一密闭的塑料盒，内置四氯化碳0.4M容积，37度90min，造成肝细胞损伤的模型，后转入正常培养，进行下一步实验。(即熏蒸法)肝细胞培养12h后，吸弃上清，更换培养液并加入CCL4 8mM（事先用DMSO溶解，
【产品名称】通用名称：大鼠肝细胞生长因子(HGF)定量检测试剂盒（ELISA）英文名称：Rat hepatocyte growth factor(HGF)ELISA KIT【预期用途】仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中大鼠肝细胞生长因子(HGF)的浓度。【检验原理】本试剂
国家自然科学基金委员会公布了2012年度面上项目、重点项目、重大国际(地区)合作研究项目、青年科学基金项目、地区科学基金项目、海外及港澳学者合作研究基金项目、科学仪器基础研究专款项目等方面的评审结果。有关评审结果将通知相关依托单位，其科研管理人员可登录科学基金网络信息系统(https:
肿瘤动物模型的建立可应用于：（1）评价抗肿瘤免疫治疗的疗效；（2）作为抗肿瘤药物筛选模型；（3）为肿瘤转移研究提供更好的研究平台；（4）为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。实验方法原理诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。实验材料肿瘤细胞小鼠试剂、试剂盒无
一.实验目的用差速离心法分离动、植物细胞线粒体。二.实验原理 线粒体（mitochondria）是真核细胞特有的，司能量转换的重要细胞器。细胞中的能源物质——脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化，并通过藕联磷酸化生成ATP，供给细胞生理活动之需。对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行
不同强度运动对糖尿病造模大鼠的血清IL-6.β2-MG及肾脏TGF-β1蛋白表达的影响【摘要】目的探究不同强度运动干预在糖尿病造模过程对血清白细胞介素6( interleukin6,I-6)、β2微球蛋白(B2 microglobulin,2MG)和肾脏转化生长因子l( transforming
俞晓峰博士现任赛业模式生物副总裁、高级科学家，负责基因修饰模式动物的研发与技术服务等工作。 俞博士在遗传基因模式动物领域有超过20年研发与管理等方面的丰富经验，在干细胞相关领域及哺乳动物细胞系基因改造研究也取得了巨大成就，其研究成果多次发表在Nature Immunology、Hum Mo
第一节 概念及意义 一、概念 人类疾病的动物模型(animal model of human disease) 是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物。
3 生物芯片在毒理学研究中的应用 对药物进行毒性评价，是药物筛选过程中十分重要的一个环节。现在毒理学家多采用鼠为模型通过动物实验来确定药物的潜在毒性。这些方法需要使用大剂量的药物，花上几年时间，花费巨大。 DNA芯片技术可将药物毒性与基因表达特征联系起来，通过基因表达分析便可确定药物毒性，
CAR-T（T细胞嵌合抗原受体）作为一种免疫细胞治疗方案，在全球范围内吸引了包括学者、医生、患者、投资人的大量关注。然而CAR-T具体是什么，它的背后有什么样的故事、目前的研究状况如何，未来又将走向何方呢？ CAR-T带来的新曙光 自古以来，人们不断地与癌症进行斗争。科学家们考古发现的木乃伊
原代细胞的培养与建系 细胞的来源多样，培养方法也各不相同，凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离
【摘要】 膜片钳技术是研究离子通道的“金标准”，应用该技术可以证实细胞膜上离子通道的存在，并能对其电生理特性、分子结构、药物作用机制等进行深入的研究。 【关键词】 膜片钳技术 离子通道 进展 1976年由德国马普生物物理化学研究所
Ⅰ相代谢稳定性研究原理及实验方法1 概述1.1 药物代谢研究简介药物代谢研究是创新药物研发的重要内容，它不仅决定了创新药物制剂研发的成败，而且与创新药物研发的速度和质量有密切关系。因而，药物代谢研究在新药研发工程中具有不可或缺的重要作用，研究药物代谢对于了解药物在体内的变化过程至关重要。药
实验方法细胞培养技术 实验方法原理选用Wistar大鼠经消化酶灌注肝脏后,用分离液分离HSC，通过观察其自发荧光及其显著特征性结构的脂肪染色、细胞免疫化学染色等方法鉴定。 实验材料雄性 SD 大鼠 试剂、试剂盒戊巴比妥钠 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HB
来自国家自然科学基金委员会的消息，国家自然科学基金委员会公布了2012年度面上项目、重点项目、重大国际(地区)合作研究项目、青年科学基金项目、地区科学基金项目、海外及港澳学者合作研究基金项目、科学仪器基础研究专款项目等方面的评审结果。有关评审结果将通知相关依托单位，其科研管理人员可登录
时间总是过得很快，2016年马上就要过去了，迎接我们的将是崭新的2017年，2016年，我国有很多优秀科研机构的科学家们都做出了意义重大、影响深远的研究成果，发表在国际顶级期刊上。本文中小编盘点了2016年我国科学家发表的一些重磅级研究，以饕读者。 --结构生物学 -- 1.清华大学 施一
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，zui简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟，若悬液量大，可适当延长离心时间，但速度不能太高，延时也不能太长，以避免挤压或机械损伤细胞，离心沉淀用无钙、镁PBS洗两次，用培养基洗一次后，调整适当细胞浓度后再分瓶培养，若选用悬液中某些细胞，
三、呼吸系统疾病动物模型的复制 急性呼吸窘迫综合征（RDS） 关于该模型复制方法，除国内外多数采用的油酸法外，尚有静脉注射致死量大肠杆菌内毒素、出血性休克、高浓度氧吸入等等。但目前认为用油酸法制备RDS 模型比较理想，因为这种模
一）简介：用简易的差分离心结合各种型式的密度梯度离心可以分离和纯化各种亚细胞器。研究者也可以根据自己的设备情况对实验参数做一定的改动，也可以更多地利用速率-区带密度梯度离心或等密度离心来简化实验过程和提高分离纯度。二）实验：ⅰ）匀浆制备： 鼠肝12克加入0.25M蔗糖与5mM Tris-H
体内组织细胞在体外培养时，所需培养环境基本相似，但由于物种、个体遗传背景及所处发育阶段等的不同，各自要求条件有一定差别，所采取的培养技术措施亦不尽相同，现介绍个别组织细胞培养的要点如下:一、上皮细胞培养上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分，又由于癌起源于上皮组织，故上皮细胞培养特别
RT-PCR实验有三步：抽提RNA，RT，PCR。 要求：1.做RT前必需测RNA浓度，逆转录体系对RNA量还是有一些要求，常用500ng或1ug。2. RT按要求做，一般不会出太大问题。 3. PCR，按常规。但如需扩长片段，则对前两步要求较高，需要有完整的cDNA存在，不是单
消化系统药理实验中的选择与应用 （一）消化系统分泌实验 1．胃液分泌实验 胃液收集常选用狗和大白鼠。由狗右侧嘴角插入胃管收集胃液，大白鼠则需剖腹，从幽门端向胃内插入一直径约3mm的塑料管，在紧靠幽门处结扎固定，以收集胃液，可进行胃酸的测定和胃蛋白酶的测定。 2．胰液分泌实验 胰液收集可选用狗、
◇水解乳蛋白 水解乳蛋白为淡黄色粉末，虽易潮解结块，但不影响使用。 不同批号和牌号质量有差异。水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解后的产物，含有丰富的氨基酸。开始时它是专为猴肾细胞培养设计的，而实际上它对许多细胞系(株)，如Hela细胞和原代细胞都是一种优良培养基。使用时用Hanks液配制成0
5、鼻咽癌（1）二甲基胆蒽（MC）诱发大鼠鼻咽癌① 取直径2～3 mm的硬质塑米管，在酒精灯上小火拉成锥形，每段长约3.5 cm，管内填以结晶体MC。② 小管一端用火封闭，以防药物外溢，尖端用针刺数孔，使MC能从小妃溢出。③ 取体重120 g左右的大白鼠，雌雄均可，乙醚麻醉后，由前鼻孔将上述含MC的
一、肿瘤动物模型的建立将对数生长的肿瘤细胞收集 ， 用无血清基质 10.0ml， 于 1500 转/ 分， 离心3min， 连续洗 3 次， 最后用无血清基质混匀， 用血
诱导性多能干细胞（iPS细胞）最初是日本科学家山中伸弥（Shinya Yamanaka）团队在2006年利用病毒载体将四个转录因子（Oct4, Sox2, Klf4 和c-Myc）的组合转入到小鼠胚胎或皮肤纤维母细胞中，使其重编程而得到的类似胚胎干细胞的一种细胞类型。这些ips细胞在形态、基因和