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色谱法分离酿酒过程中被修饰的麦芽蛋白

酿造几乎是一个尽人皆知的简单过程,看过张艺谋《红高粱》的观众一定会对影片中所描绘的家庭式酿酒作坊中几十号人汗流浃背、忙碌穿梭的镜头记忆忧新。但家庭酿造与商业酿造有明显不同,前者中使用了麦精(malt extract)。工业生产中,酿酒师常常自己提取粮谷,以便能够对发芽(malting)过程进行控制。 发芽是酿酒的一个关键步骤。发芽过程中,谷粒被诱导发芽,释放淀粉转化为糖,蛋白转化为氨基酸所需要的酶。这些酶是酿造所必需的,待到谷粒开始抽芽时,酿酒师会将谷粒烘干,延长酶的活性。酿造开始时,酿酒师将发芽大麦浸没在热水中重新激活这些酶。于是淀粉开始转化为糖,准备被酵母转化为酒。 发芽过程中,谷粒中的蛋白也会受到影响,其中许多开始被出现的糖基糖化。某些富含脯氨酸残基的经过修饰的蛋白使啤酒变混浊,另一些蛋白在泡沫形成和安定(stabilisation,生物通编者译)中发挥重要作用。 大麦源性的脂质转运蛋白(lipid-transfer......阅读全文

蛋白质特性与分离纯化技术的选择

摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。关键词:蛋白质 分离纯化前言    蛋白

蛋白质特性与分离纯化技术的选择

摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。关键词:蛋白质 分离纯化前言    蛋白

蛋白质特性与分离纯化技术的比较和选择

蛋白质在组织或细胞中一般都是以复杂的混合物形式存在,每种类型的细胞都含有成千种不同的蛋白质。蛋白质的分离和提纯工作是一项艰巨而繁重的任务,到目前为止,还没有一个单独的或一套现成的方法能把任何一种蛋白质从复杂的混合物中提取出来,但对任何一种蛋白质都有可能选择一套适当的分离提纯程序来获取高纯度的制品。蛋

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验             实验步骤

【综述】重组蛋白糖基化表征的进展与展望

  内容  1. 前言:生物制品糖基化表征的重要性  2. 糖蛋白表征用分析方法  2.1 糖基化特性  2.1.1 多糖的直接分析  2.1.2 糖谱分析  2.1.3 N-糖的异质性分析  2.1.4 单糖的分析  2.2 多糖分析用技术  2.2.1 糖分离技术  2.2.2 多糖检测技术  

糖柱的选择

  天哪,我到底该怎么选!图片来源网络  糖柱,顾名思义就是分析分离糖类物质的色谱柱。糖类除了众所周知的供能这个作用之外,还能作为母体,在工业上尤其是生物制药领域也有着充分重要的作用。随着工业的发展,工业生产中对混合糖中各组分的比例、单一糖类的纯度要求越来越来高,为了满足食品饮料及制药行业中糖类物质

影响糖化血红蛋白测定的因素及实验室检测注意事项

糖化血红蛋白A1c(hemoglobin A1c,HbA1c)是评价糖尿病血糖控制水平的首选指标,并且与糖尿病慢性并发症的发生和发展密切相关。近年来,许多国家糖尿病学会和WHO推荐将其作为糖尿病的首选诊断标准,拓宽了HbA1c的应用范围。然而在某些特定的情况下,尤其是当病人有血红蛋白变异体存在时常

影响糖化血红蛋白测定的因素及实验室检测注意事项

糖化血红蛋白A1c(hemoglobin A1c,HbA1c)是评价糖尿病血糖控制水平的首选指标,并且与糖尿病慢性并发症的发生和发展密切相关。近年来,许多国家糖尿病学会和WHO推荐将其作为糖尿病的首选诊断标准,拓宽了HbA1c的应用范围。然而在某些特定的情况下,尤其是当病人有血红蛋白变异体存在时常导

影响糖化血红蛋白测定的因素及实验室检测注意事项

糖化血红蛋白A1c(hemoglobin A1c,HbA1c)是评价糖尿病血糖控制水平的首选指标,并且与糖尿病慢性并发症的发生和发展密切相关。近年来,许多国家糖尿病学会和WHO推荐将其作为糖尿病的首选诊断标准,拓宽了HbA1c的应用范围。然而在某些特定的情况下,尤其是当病人有血红蛋白变异体存在时常导

手性色谱柱知识介绍

手性色谱柱(Chiral HPLC Columns)是由具有光学活性的单体,固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相(Chiral Stationary Phases)。通过引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异,从而达到光学异构体拆分的目的。要实现手性识

2013北京色谱年会大会报告(二)

  2013年12月12日,由北京色谱学会主办,北京理化分析测试技术学会承办的以“色谱在环境和药物分析中的应用”为主题的2013年北京色谱年会在京东宾馆隆重召开,来自北京周边地区的政府机关、高等院校、科研院所的500余人参加了本届色谱年会。大会当日下午,来自中国科学院生

2011年北京质谱年会隆重召开

  2012年3月30-31日,北京理化分析测试技术学会北京质谱学会举办的“2011年度北京质谱年会”在北京外研社国际会议中心隆重召开。来自科研院所、检测机构、仪器厂商等五百余位质谱界专家学者、实验室人员、技术工程师等参加了本次年会,共同探讨了质谱技

色谱法的作用特征及分析蛋白质的治疗药物

色谱法在蛋白质治疗药物的表征和分析中占有突出地位,如今它在生物技术实验室中发挥着关键作用。尽管反相色谱是用于此目的的最重要的色谱技术,但其他技术如离子交换,尺寸排阻,正相,亲水相互作用和疏水相互作用色谱在表征和分析蛋白质药物方面发挥着非常特殊的作用。 色谱法一直是蛋白质纯化的重要工具。几十

手性色谱柱知识(二)

环糊精型:环糊精是通过Bacillus Macerans 淀粉酶或环糊精糖基转移酶水解淀粉得到的环型低聚糖。通过控制环糊精转移酶的水解反应条件可得到不同尺寸的环糊精。市售的环糊精主要是α、β、γ三种类型,分别含6、7、8个吡喃葡萄糖单元。环糊精分子成锥筒型,构成一个洞穴,洞穴的孔径由构成环糊精的

蛋白质纯化(protein purification)实用技术-2

7.密度多数蛋白质的密度在1.3~1.4g/cm3之间,分级分离蛋白质时一般不常用此性质,不过对含有大量磷酸盐或脂质的蛋白质与一般蛋白质在密度上明显不同,可用密度梯度法离心与大部分蛋白质分离。8.基因工程构建的纯化标记通过改变cDNA在被表达的蛋白的氨基端或羧基端加入少许几个额外氨基酸,这个加入的标

2011年北京光谱年会隆重召开

清华大学分析中心 李海芳博士   清华大学分析中心的李海芳博士报告题目是《农产品中农药残留的色谱—质谱联用技术快速分析》。   在农作物种植过程中,常会喷洒农药抵制病虫害和提高产量。化学合成技术的不断进步使农药种类和数量迅速增加,同时也造成了农药的泛滥和过量使用。农药在农产品中的残留严重超标

用于蛋白质表达的标签实验

实验步骤 一、设计具有标签的蛋白质时需要考虑的因素 亲和力和可溶性的选择 在大肠埃布氏菌中生产外源蛋白时面临两个挑战: 一? 是所用蛋白质表达系统的表达水平很低; 二是所表达的蛋白质被错误折叠进不溶性的聚集体—包涵体中。弱启

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验2

二、用 于 鉴 定 P T M 的富 集 技 术2.1 磷酸化丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸残基的可逆磷酸化也许是研究最为深人的 PT M 。蛋白质磷酸化信号网络介导细胞对与不同的应激因子、生长因子、细胞因子以及细胞间相互作用作出响应。憐酸化还影响多种细胞进程,如增殖、凋亡 、迁移 、转录和蛋白质翻译(W

用于蛋白质表达的标签实验

实验步骤一、设计具有标签的蛋白质时需要考虑的因素亲和力和可溶性的选择在大肠埃布氏菌中生产外源蛋白时面临两个挑战: 一? 是所用蛋白质表达系统的表达水平很低; 二是所表达的蛋白质被错误折叠进不溶性的聚集体—包涵体中。弱启动子、低转录起始或稀有密码子的存在引起的表达问题都可以通过在装配过表达质粒时将矫正

植物蛋白质组学和糖基化实验

实验材料链霉亲和素-过氧化物酶                                       &

2011国家质检总局“科技兴检奖”获奖项目公示

  2011年度国家质量监督检验检疫总局“科技兴检奖”评审工作已经结束,共评审出拟获奖项目248项,现予以公示。自公示之日起一个月内为公示期。任何单位和个人对本公告公示的项目有异议,均可在公示期内,以书面形式向国家质量监督检验检疫总局科技司提出。   2011年度国家质量监督检验检疫总局“科技兴检

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验(五)

六、CID、ECD和 ETD的对比基于质谱的蛋白质组学分析依赖于气相中肽段在低碰撞能量下断裂, 在质量谱图中形成峰。进而通过峰图确定肽段序列,再推断出相关蛋白质。完成肽段断裂最主要的方法就是碰撞诱导解离(collision induced dissociation,C I D ) ( S w

控制融合蛋白生产中的糖基化生成有潜力的biobetter

  制药公司的管线充满了生物药物。许多是创新的治疗蛋白质,但越来越多的代表生物仿制药和biobetters(图1)(1)。biobetters通常被定义为“基于创新生物制品,但具有改进的性质”(2)。 他们的发展受益于已知的治疗方法和作用机制,从而导致低风险,快速通向临床,从而降低成本。优势是通过延

用于蛋白质表达的标签实验(一)

一、设计具有标签的蛋白质时需要考虑的因素亲和力和可溶性的选择在大肠埃布氏菌中生产外源蛋白时面临两个挑战: 一? 是所用蛋白质表达系统的表达水平很低; 二是所表达的蛋白质被错误折叠进不溶性的聚集体—包涵体中。弱启动子、低转录起始或稀有密码子的存在引起的表达问题都可以通过在装配过表达质粒时将矫正

植物蛋白质组学和糖基化(一)

 1. 前言与其他真核细胞一样,植物细胞中,糖基化通常发生在分泌蛋白质上,虽然在细胞质蛋白和核蛋白上也发现一些糖基化反应。根据寡糖部分和蛋白质骨架之间的连接方式,可将糖基化分为两种类型:N -糖基化和 O-糖基化。植物中 N-糖基化研究最多。1.1 N-糖基化与其他真核细胞一样,在植物细胞

东曹参展CPHI China 2014 推TSKgel系列色谱柱分析应用

  2014年6月26日,第十四届世界制药原料展、第九届世界制药机械、包装设备与材料中国展、第二届世界医药合同定制服务中国展在上海新国际博览中心盛大开幕,吸引了汇集20多个国家和地区的2500家参展企业和近45000名海内外专业观众。东曹(上海)生物科技有限公司携TSKgel色谱柱、IC-

N-糖基化治疗性抗体结构 表征方法和治疗潜力的研究

  自20世纪80年代以来,单克隆抗体作为治疗性药物得到快速的发展。与小分子药物相比,单克隆抗体的优势在于具有较高的靶向特异性、毒副作用小和半衰期长的优势。而不足之处包含复杂的生产、纯化过程,以及翻译后修饰(PTM)导致单克隆抗体结构和功能的异质性。  在这些翻译后修饰的情况中,Fc区域的糖基化是导

N-糖基化治疗性抗体—结构、表征方法和治疗潜力的研究

  自20世纪80年代以来,单克隆抗体作为治疗性药物得到快速的发展。与小分子药物相比,单克隆抗体的优势在于具有较高的靶向特异性、毒副作用小和半衰期长的优势。而不足之处包含复杂的生产、纯化过程,以及翻译后修饰(PTM)导致单克隆抗体结构和功能的异质性。  在这些翻译后修饰的情况中,Fc区域的糖基化是导

植物蛋白质组学和糖基化实验2

3. 糖基释放后的蛋白质分析1 ) 糖基释放的化学处理方法还原性氨化反可应选择性的解离糖蛋白上的 O-糖苷(见注释 10) 。去糖基化的蛋白用 1D SDS-PAGE 分析,将其迁移情况与其糖基化形式的蛋白进行比较,电泳迁移率的增加是 O-连糖苷出现在蛋白上的证据(见注释 11)。( 1 ) 将 1

第二届质谱论坛:质谱在生物医药中的应用

清华大学 邓海腾教授   来自清华大学生命学院的邓海腾教授做了题为《Application of mass spectrometry beyond Proteomics》的报告,主要内容是关于质谱在代谢组学方面的应用。   回顾质谱百年发展历史,从