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医学高科技:靶向荧光探针

靶向荧光探针能够在术中实时点亮癌细胞,帮助医生判断肿瘤边界和发现转移灶,这一概念也被称为荧光引导手术(fluorescence-guided surgery,FGS)。 在过去几十年中,分子影像技术的发展大大提高了肿瘤诊治的能力,传统医学影像技术一般基于生物体本身的物理特性或解剖学特征,缺乏特异性。而分子影像技术则借助分子水平的改变进行成像,能够特异性反映肿瘤细胞的功能属性。目前,分子成像技术主要包括核素成像(如PET和SPECT)、核磁共振和光学成像等。我们主要关注光学成像,即荧光分子探针。 术中导航 手术是实体瘤治疗的基础,但在过去的几十年中,手术技术并未发生根本改变,外科医生主要依赖术中的主观评估(如组织结构、颜色和触感等)来区分肿瘤组织和周围正常组织,不可避免地会导致肿瘤残留或对正常组织的过度切除。 手术残留和预后不良以及癌症复发息息相关,而过度切除则可能伤害周围正常组织。因此判断肿瘤边界十分重要。靶向荧光探......阅读全文

共聚焦激光扫描显微镜的应用及荧光探针

一、LSCM常用的检测内容及其荧光探针 LSCM检测内容和应用范围非常广泛,以下仅简单介绍LSCM常用的检测内容及其荧光探针。 1.细胞内游离钙 共聚焦激光扫描显微镜常用的有Fluo-3、Rhod-1、Indo-1、Fura-2等,前两者为单波长激光探针,利用其单波长激发特点可直接测量细胞内Ca

实时荧光Taqman 探针设计的几个要点

实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量

谭蔚泓院士课题组发文:小分子荧光探针应用于癌症成像

据世卫组织估计,到2035年全世界每年将有2400万新癌症病例和1450万癌症相关死亡案例。在与癌症相关的死亡中,如果可以早期诊断出癌症,约30%的人会有获救的希望。因此对癌症早期准确的诊断对于增加治愈癌症和提高癌症存活率的几率是非常重要的。癌症相关生物标志物的临床检测在癌症诊断和治疗方面具有重要意

线粒体定位型高选择性ATP荧光探针的构建

  ATP(三磷酸腺苷)是生物体内不可缺少的生物大分子,在细胞呼吸、酶催化、能量和信号传递过程中起到关键的作用。线粒体是产生ATP的主要场所,ATP的含量变化必然会对线粒体的功能产生不可逆的影响。科学研究表明,线粒体的功能紊乱与心血管疾病、恶性肿瘤以及帕金森氏症等疾病密切相关。因此,发展一种可靠并能

实时荧光PCR检测技术

实时荧光PCR检测技术众所周知,PCR(聚合酶链反应)技术自从1985年问世以来,经过十几年的发展,已成为实验室的常规技术。它是现代分子生物学研究中不可缺少的手段,是一种极为敏感的放大系统。相比于传统的临床诊断方法,核酸诊断是分子水平上的诊断技术,可以弥补传统临床诊断方法的某些缺陷,比如,核酸诊断能

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用(一)

多聚集链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术发明至今已近20年了,在这期间技术得到了不断的发展,近年来出现的实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用(一)

 (张蓓,沈立松  上海第二医科大学附属新华医院上海儿童医学中心实验诊断中心)摘要:多聚酶链反应飞速的发展使其成为了分子生物学实验室重要的工具,实时荧光定量PCR(real-timequantitative PCR)技术以其敏感性高、重复性好、速度快和污染少使PCR技术又

实时定量PCR探针概述

实时定量PCR (qPCR)的优势•实时检测PCR反应过程•精确计算出每个循环的PCR产物量•扩增和检测同时进行•消除后续PCR的干扰在实时定量PCR反应中,杂交探针与插入染料如SYBR Green相比是更好的选择。荧光标记探针可以提高实时定量PCR结果的效率、灵敏度和特异性。而且定量PC

实时荧光PCR检测技术及其优势

众所周知,PCR(聚合酶链反应)技术自从1985年问世以来,经过十几年的发展,已成为实验室的常规技术。它是现代分子生物学研究中不可缺少的手段,是一种极为敏感的放大系统。相比于传统的临床诊断方法,核酸诊断是分子水平上的诊断技术,可以弥补传统临床诊断方法的某些缺陷,比如,核酸诊断能直接揭示病原体的存在,

荧光定量PCR仪技术及其在医学中的应用

刘向国 谢国明 (重庆医科大 重庆市 400016)摘 要 荧光定量PCR仪技术是一种新的核酸定量技术,该技木在PCR仪反应系统中引人了荧光标记探针,具有可实时监测,高灵敏性,高特异性和高精确性的特点,极大地克服了原有PCR仪技术的不足,扩大了PCR仪的应用范围。关键词 定量pcr;荧光;基因Flu

荧光定量PCR仪技术及其在医学中的应用(一)

 1 概述        荧光定量多聚酶链式反应是一种新的核酸定量技术。该技术将荧光能量传递技术(fluorescence resonance energy transfer,FRET)应用于常规多聚酶链式反应(poly

详述共聚焦显微镜荧光探针的选择步骤及方法

  在用共聚焦显微镜进行的试验中,一些实验指标可以利用样品自身或外源性物质的自发性荧光进行检测,但大多数待测物质不具备可测荧光,需要采用荧光探针标记的方法使其具有可测定的荧光信号。那么,怎样选择共聚焦显微镜荧光探针呢?   1、根据实验目的确定需要检测的指标   一旦检测指标确定,则荧光探针的选

real-time PCR 常用仪器和探针

SYBR Green I:一种DNA结合染料,能非特异性地与双链DNA结合,结合后发出荧光,价格便宜,但因无特异性,易受到非特异性扩增和引物二聚体地的影响,是定量结果不可靠。可用融解曲线分析区分特异性和非特异性扩增,引物的设计和反应条件的优化对消除非特异性荧光有很大帮助。 2.Taqman探针:

荧光定量PCR检测试剂盒简述荧光探针法的应用

荧光定量PCR检测试剂盒简述荧光探针法的应用荧光定量PCR检测试剂盒的原理在于PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;P

定 量 P C R

定量PCR 定义 以参照物为标准对PCR终产物进行分析或对PCR过程的进行监测,来评估样本中靶基因的拷贝数,称为定量PCR相对定量→绝对定量, 手工操作→自动化检测, 灵敏度与特异性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR扩增的指数期进行的。 特定的待扩增基因片段 起始含量越大,则指

钙离子荧光探针类型大盘点

钙离子在许多生理过程中起着复杂的作用。例如,细胞内钙离子在促进神经元从神经元中释放神经递质的信号转导途径中必不可少,并参与所有肌肉细胞收缩所需的机制。细胞离子浓度受被动和主动离子通道和泵的调节。离子通道和泵的故障可能导致离子浓度调节不当,从而产生不利于正常细胞功能的不利条件。钙离子浓度研究领域中常使

荧光显微成像在生物分析中的应用

论文摘自山东师范大学化学化工与材料科学学院,济南 250014摘 要 荧光显微镜与荧光光谱仪耦合系统可获取显微荧光成像及微区荧光光谱、荧光寿命的测定信息,广泛应用于细胞、组织中蛋白质的结构功能分析,核酸的识别检测,金属离子、自由基的定量测定,以及纳米生物探针的研制等生物分析研究的热点领域。1 引 言

real-time PCR 常用仪器和探针

 1.SYBR Green I:一种DNA结合染料,能非特异性地与双链DNA结合,结合后发出荧光,价格便宜,但因无特异性,易受到非特异性扩增和引物二聚体地的影响,是定量结果不可靠。可用融解曲线分析区分特异性和非特异性扩增,引物的设计和反应条件的优化对消除非特异性荧光有很大帮助。2.Taqm

荧光标记基团的选择及其在荧光定量PCR中的应用

PCR实验室产品选择指南 荧光  基团是吸收一定波长的光子后发射特定波长的光波,可以作为抗体等分子的标记物,实时荧光定量PCR中的Taqman探针常用荧光基团FAM标记荧光基团和TAMRA标记。 荧光基团 吸收特定波长的光子后荧光染料(通常称为“荧光基团”或简称为“荧光

实时荧光定量PCR简介

荧光定量PCR检测技术从诞生到现在已经有 8 年了,但是其应用在近四年才迅猛增长。在 Medline 数据庫中,用“ Taqman” 或 ”real time PCR” 作为关键词检索,在1996 年仅有 19 篇,在 1997 年仅有 28 篇,在 98 、 99 、2000 年分别达到了

如何做好荧光定量PCR实验

荧光定量PCR实验指南一、基本步骤:1、目的基因(DNA和mRNA)的查找和比对;2、引物、探针的设计;3、引物探针的合成;4、反应体系的配制;5、反应条件的设定;6、反应体系和条件的优化;7、荧光曲线和数据分析;8、标准品的制备;二、技术关键:1、 目的基因(DNA和mRNA)的查找和比

实时荧光定量PCR

Real Time PCR实时荧光定量PCR   其定量的基本原理是在 PCR 反应体系中加入非特异性的荧光染料(如: SYBR GREEN I )或特异性的荧光探针(如: Taqman 探针),实时检测荧光量的变化,获得不同样品达到一定的荧光信号(阈值)时所

盘点:分子诊断常用技术50年的沿革与进步

  一、基于分子杂交的分子诊断技术  上世纪60年代至80年代是分子杂交技术发展最为迅猛的20年,由于当时尚无法对样本中靶基因进行人为扩增,人们只能通过已知基因序列的探针对靶序列进行捕获检测。其中液相和固相杂交基础理论、探针固定包被技术与cDNA探针人工合成的出现,为基于分子杂交的体外诊断方法进行了

实时定量PCR应用中的优化方案

 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)自诞生之日起就决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法,而且也是一个能对核酸分子进行精确定量的有力工具[1]。随着分子生物学技术研究的不断进展,定量PCR技术取得了突飞猛进的发展,不仅建立了一系

量子点作为荧光离子探针应用的研究进展

1. 引言量子点是一种准零维纳米晶粒,因其三个维度均受到量子限域,从而表现出一些独特的光学性能,如激发波长范围宽、发射波长范围窄且对称、量子产率高、荧光寿命长、光学性能稳定等优点。量子点作为荧光离子探针在离子以及小分子检测领域引起了许多研究人员的关注并且取得了不错的进展。离子和无机小分子与量子点之间

如何选择合适的共聚焦显微镜荧光探针?

  2019-12-03作者:浏览次数:34 来源:北京欧普特科技有限公司   荧光探针的作用是标记待测物质,使之能够利用荧光测定的方法得到检测,并获得正确的实验结果。那么如何选择合适的共聚焦显微镜荧光探针呢?   根据实验目的确定需要检测的指标选择探针一旦检测指标确定,则荧光探针的选择范围也随

生物芯片技术荧光探针

目前用荧光探针作为检测信号的仪器,主要是考虑荧光标记所要检测的DNA的效率,以及荧光探针本身的发光效率和光谱特性。PCR过程中的DNA标记1.末端标记:在引物上标记有荧光探针,在DNA扩增过程时,使新形成的DNA链末端带有荧光探针。2 .随机插入:选择四种缄机基,使其中一种或几种挂有荧光探针,在PC

就这样做 轻松搞定实时 PCR 探针设计

除了为克隆基因、预测编码蛋白而需要研究基因的构成外,当前在基因组学上的努力也包括对基因组构成的研究,以分析具有结构和调控因子插入的基因。近源物种分析成为比较基因组学的主要内容,被认为是研究进化、基因功能和人类疾病的重要方法。 利用该方法分析微生物,特别是细菌的基因组,早在 1996 年就已开始

我国在近红外光学活性材料及生物应用方面取得系列进展

  在最新一期出版的美国化学会旗下的期刊ACS Nano(影响因子IF 13.942)上,刊载了中国科学院大学化学科学学院田志远教授课题组博士研究生吕岩霖的研究论文Cancer Cell Membrane-Biomimetic Nanoprobes with Two-Photon Excitatio

激光扫描共焦显微镜技术及应用(二)

五、激光扫描共焦显微镜技术的应用定位、定量三维重组动态测量¨ 活细胞或组织内游离Ca2+浓度的测量¨ 活细胞内H+浓度( pH值)的测量¨ 自由基的检测¨ 药物进入细胞的动态过程、定位分布及定量 应用:细胞膜电位的测量      荧光漂白恢复(FRA