用Trypsin酶解蛋白质时,碳酸氢氨的浓度应该是多少?

酶解时碳酸氢氨的浓度一般在 10 ~ 50 mM 之间。碳酸氢氨的作用主要是提供一个碱性的水解环境,因为 Typsin 的活力在 pH8 ~ 9 之间最高。最常用的碳酸氢氨浓度有 20 mM , 40 mM 。盐浓度过大时,后续的冻干过程中会有较多的盐析出;盐浓度过小时,则不能有效的提供碱性 pH 的水解环境(尤其是在样品的 pH 值低,而且体积大时)。......阅读全文

用-Trypsin-酶解蛋白质时,碳酸氢氨的浓度应该是多少?

酶解时碳酸氢氨的浓度一般在 10 ~ 50 mM 之间。碳酸氢氨的作用主要是提供一个碱性的水解环境,因为 Typsin 的活力在 pH8 ~ 9 之间最高。最常用的碳酸氢氨浓度有 20 mM , 40 mM 。盐浓度过大时,后续的冻干过程中会有较多的盐析出;盐浓度过小时,则不能有效的提供碱性

蛋白质组学入门问题集锦

  1 . HPLC 灵敏度不够的主要原因及解决办法   样品量不足:解决办法为增加样品量   样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子   样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器   检测器衰减太多:调整衰减即可。   检测器时间常数太大:解决

蛋白质组学入门问题FAQ

常见问题——— HPLC 篇 1 . HPLC 灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足:解决办法为增加样品量 样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子 样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器 检测器衰减太多:调整衰减即可。 检测器时间常数太大:解决办法为降低时间

ICP做标准曲线时,各标准的浓度应该是多少

首先,鉴于你测定的指标,在文献或者专业论著上找到测定的常规方法,一般这些方法有介绍标准溶液的浓度范围,而这个范围一般不是自己规定的,而是这些方法中规定的,因为这个标准浓度范围是前人的经验总结,你可以稍微的改动一下,但一般要在这个范围内改动,如果超出这个范围,可能相关性就不那么好了.待测样品溶液的浓度

Trypsin-储存液的作用

Trypsin 在 pH8 ~ 9 活力最高,所以为了防止酶的自水解, Trypsin 母液要处于一个酸性的环境里以便长期保存。 Trypsin 储存液的 pH 大约是 5.3 ,是用来稀释母液用的。如果所需的酶量较大,可以直接用碳酸氢氨溶液来稀释母液。如果酶解的样品少,可以用储存液来稀释,

胰蛋白酶(trypsin)纯化

[原理]胰蛋白酶与另外两种蛋白水解酶:糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶)和弹性蛋白酶同时存在于胰脏中。由于胰蛋白酶、糜蛋白酶和弹性蛋白酶的酶蛋白分子在结构上及其它很多性质上的相似之处,往往在一般的制备过程中很难将它们彼此彻底分开,传统的分离、纯化技术难以达到十分满意的结果,但采用亲和层析技术,大大提高了分离纯

细胞培养时,DMSO的浓度是多少

一般用DMSO和乙醇作为溶剂时,要求染毒时其浓度不超过0.1%。你可以配制成高浓度的母液,稀释时取少量到培养基中。冻存时DMSO的浓度为10%。

气相色谱的进样浓度应该是多少

是ppm级别的,也就是百万分之一的单位。其中不同的样品,不同的进样浓度。详见《中国药典》2015年版 二部 附录VIII P 残留溶剂测定法。上面应该规定了常见的残留溶剂的限度。最常见的,乙酸乙酯、乙醇、异丙醇之类的都是5000ppm,也就是0.5%。具体情况,你得具体去看。

做次磷酸钠的浓度空白应该是多少

建议你采用《hgt3253-2009工业次磷酸钠》中的检测方法,(5.4.3到5.4.4)药品为:硫酸碘化钾,溴酸钾溴化钾硫代硫酸钠淀粉指示剂。你可以留下邮箱,我帮你把完整的《hgt3253-2009工业次磷酸钠》发过去。请采纳。

附着性细胞继代时所使用之trypsinEDTA浓度?应如何处理?

一般使用之trypsin-EDTA浓度为0.05%trypsin-0.53mMEDTA.4Na。第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于–20°C,避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低,并可减少污染之机会。

融合蛋白酶解实验_-用-Xa-因子

使用基因融合表达系统在大肠杆菌中表达外源基因已越来越受欢迎。其原因在很大程度上归因于融合系统能够产生大量的可溶性的融合蛋白。谷胱甘肽转移酶以及硫氧还蛋白均被证实能非常成功地生产正确折叠、有生物活性的蛋白质。其中每一种都备有方便的纯化方法,可将融合蛋白与细胞污染物分开。所产生的蛋白质适用于进行其生物学

原子吸收光谱测定镁时所用硝酸的浓度是多少

原子吸收光谱测定镁时所用硝酸的浓度是多少 原子吸收一般不用盐酸溶液,特别是石墨炉法测定时,盐酸对石墨管的损伤很大的,可以使用体积比为0.5%-1%的硝酸溶液作为介质,在测定时尽可能用低浓度的酸介质,可以提高仪器的稳定性和使用寿命。

氨水的浓度是多少

氨水的浓度是:25%。氨水是无色或带有淡黄色(与所含杂质有关)有强烈的刺鼻臭味的液体。氨水呈碱性反应。氨水中氨的浓度按重量计可达30-40%,一般农用氨水含氮量为12-16%,也有10%以下的。氨水具有易挥发和腐蚀性强两大特点。氨水的用途氨水主要用作农业肥料。化学工业中用于制造各种铵盐,有机合成的胺

用HPLC测定某种药物浓度时怎么来定进样的浓度

实际上进样浓度值得是进样量,也就是浓度乘以多少微升!1.每单位剂量药物中含有多少?尽可能使用0.5-2个单位剂量的主成分含量来进行供试品的配制,也就决定了通常情况下的上限(2单位不稀释)和下限(0.5个单位稀释5000倍);2.一般选取进样量10微升或20微升为宜,通过上述确定的范围稀释几个对照品,

蛋白质浓度很低,应该用什么方法来浓缩?

蛋白质的浓缩有很多方法。大致有超滤法,沉淀法和透析法。超滤比较温和,对蛋白质不会有修饰和改变,蛋白的种类一般不会有丢失。它的缺点是总样品的量可能会减少(被膜所吸附)。另外超滤对样品的要求比较高。甘油,去垢剂都会堵塞滤膜,影响超滤的效果。沉淀法比较快速,容易操作,对盐,甘油,去垢剂的耐受性好。缺点是可

餐后2小时血糖的正常值应该是多少?

血糖(GLU): 临床上所说的血糖是指血液中的葡萄糖。空腹血糖(FPG)的正常值为3.9~6.1mmol/L;空腹血糖≥7.0mmol/L 或餐后2小时血糖(P2hPG)≥11.1mmol/L为糖尿病;6.1~7mmol/L为空腹血糖异常(IFG),餐后2小时 血糖在7.8~11.1mmol/L为糖

PH计灵敏度降低时,电极活化的盐酸浓度是多少

1)对无机物污染,可将电极浸入0.1mol/L 稀盐酸中30分钟,用纯水清洗,再浸入3.5MOL/L氯化钾溶液中浸泡6小时后使用。2)4%氟化氢溶液中浸3~5 s,取出用蒸馏水冲洗,然后在0.1mol/L的盐酸溶液中浸泡数小时,用蒸馏水冲洗干净,标定3)对有机油污和油膜污染,可用洗涤剂清洗铂或金表面

液相进样时一般样品的浓度范围是多少

没有确切的浓度,由多种因素共同决定。最低进样浓度一般是以最小检测限或定量限而定的,目的为检测含量的方法需要测定定量限,目的为杂质检查的项目需要测定检测限,这个限度浓度即为有效的最小进样浓度。最高浓度一般是以测定限度浓度的120%~200%来验证,比如含量测定时样品浓度确定为1mg/ml,则最高浓度可

甘油的浓度是多少?保存的温度是多少?

常用的是终浓度10-30%的甘油。 由于纯甘油十分粘稠,很难定量,一般配成终浓度50%的水溶液,高压灭菌后室温保存即可。使用时按50%甘油:菌液=1:1混合均匀,然后迅速冻结。 A.先把甘油稀释成50%,然后灭菌 这样20%的终浓度用400微的菌体加600微的50%甘油混合不就可以啦 纯的甘油太粘稠

甘油的浓度是多少?保存的温度是多少?

常用的是终浓度10-30%的甘油。 由于纯甘油十分粘稠,很难定量,一般配成终浓度50%的水溶液,高压灭菌后室温保存即可。使用时按50%甘油:菌液=1:1混合均匀,然后迅速冻结。 A.先把甘油稀释成50%,然后灭菌 这样20%的终浓度用400微的菌体加600微的50%甘油混合不就可以啦 纯的甘油太粘稠

蛋白质在酶解过PH值下降的原因及原理

肽键酶解分解成:-COOH和-NH2。-COOH在溶液中电离出H+。故PH值下降

用紫外测吸收度时,样品浓度有什么要求

用紫外可见分光光度计测定吸收光谱时,所配的配合物溶液的浓度并不需要配的十分准确。因为这里的生色剂的量一定是过量的。既然是过量,过多一点,过少一点不影响测定的准确性。只要误差在允许范围之内就不要紧。但是,是不是生色剂的量就完全不重要了呢?也不是。对于定量分析而言,被测物质的浓度是关键。虽然生色剂的浓度

鱼胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒操作步骤

我司ELISA试剂盒品质保证,质量优,价格实惠,是您生物实验的首选,如有需要可与我司销售人员联系。本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定鱼小肠内胰蛋白酶 (trypsin)的活性。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼胰蛋白酶 (trypsin)水平。用纯化的鱼胰蛋白酶 (trypsin)

融合蛋白的酶解实验

实验材料 融合蛋白试剂、试剂盒 SDS仪器、耗材 水浴锅培养箱离心机实验步骤 1.  准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间: (1)反应1:20 μl 含有1 μl 200 μg/ml Xa因子的1 mg/ml 融合蛋白,室温下反应(2)反应2:5 μl 不含因子Xa的1 mg/ml 融合蛋白(

融合蛋白的酶解实验

基本方案 辅助方案 备选方案1 辅助方案 备选方案2 备选方案3             实验材料 融合蛋白

清洁玻璃,氢氟酸浓度是多少

45%的氢氟酸5%,90%以上的硫酸15%,其余是水你把玻璃放在溶液里泡10分钟都没问题,拿出来后比新玻璃还亮

方案13-胶内蛋白质的酶解和肽段提取实验

实验材料在二维凝胶电泳中分离的蛋白质试剂、试剂盒胶内胰酶消化缓冲液三氟乙酸(TFA)仪器、耗材冷冻干燥离心机小离心管水浴锅实验步骤1.切下凝胶上的蛋白质点,放人小离心管中。2.以 0.lmol/L NH4HCO3、50% 乙腈(用于胰酶)或 0.05mol/L Tris-HCl(PH9.3)、50%

酶解方法有哪些

试剂配制,银染酶解方法,银染酶解方法

鱼胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒使用说明

本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定鱼小肠内胰蛋白酶 (trypsin)的活性。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼胰蛋白酶 (trypsin)水平。用纯化的鱼胰蛋白酶 (trypsin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰蛋白酶 (trypsin),再与HRP标

用6孔板养细胞最初放下去的细胞浓度最好是多少

用6孔板养细胞最初放下去的细胞浓度最好是每空7-10万,不能太少了。一般每空加2ML培养液。成纤维细胞接种8万每孔的话一般3-4天可以长满。