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单核细胞分离技术

(一)铁粉吸附法 1.材料及试剂 (1)铁粉或羰基铁粉(Atomergic chemetals)99%的纯度,颗粒小于60µm(Goodfellow Metals)。 (2)强磁铁(马蹄形)。 (3)一块小棒状磁铁(约1cm长)。 (4)毛细吸管等。 2.操作方法 (1)称取一定量的铁粉,一般为10g,用100ml生理盐水洗涤4次,去除任何可溶性有毒物质。在倒去盐水时,用强磁铁吸住铁粉。 (2)用50ml生理盐水混悬铁粉。摇匀后,分装于10个瓶中,包扎瓶口,121℃灭菌20min,拿出后立即轻轻摇匀,防止铁粉结块,储藏备用。 (3)临用前,倒去瓶中的生理盐水,加入适量的单个核细胞悬液(3ml~5ml,细胞总数为8×107个/瓶)。37℃温育45min,中间不时晃动,使铁粉悬浮起来。 (4)加入一块小磁铁棒于瓶中,让其吸住铁粉以及附着在铁粉上的细胞。 (5)倒出......阅读全文

免疫学检验——免疫细胞的分离及其表面标志检测技术

  第一节  免疫细胞的分离  一、外周血单个核细胞的分离  将2份6%聚蔗糖蒸馏水溶液与1份34%泛影葡胺生理盐水溶液混合,其比重为1.077±0.002,可作为常规的淋巴细胞分离液,即Ficoll分离液。  主要用于分离外周血中单个核细胞,是一种单次密度梯度离心分离法,其分布由上到下依次为:稀释

单细胞分离技术

单细胞测序日趋火爆的原因很大程度上得益于单细胞分离技术的不断完善。这一讲,我们将跟大家一起回顾传统的单细胞分离技术,并重点介绍单细胞分离技术的新宠微孔芯片技术及微流控技术。图1为目前常见单细胞分离设备。图1:目前常见单细胞分离设备传统单细胞分离技术相信许多实验人员,都见过下面我们要介绍的传统的单细胞

循环肿瘤细胞的检测方法

  近年来随着现代医学研究技术的进步和CTC临床应用价值凸显,许多研究机构和研发团队都在推出不同的CTC检测技术。由于血液中CTC的含量极低,目前主流的检测方法是先捕获(富集)后检测,少量方法是不捕获(富集)直接检测。CTC检测技术包括CTC的富集(分离)和CTC的分析鉴定(识别)。本篇文章将介绍C

肺泡上皮细胞的分离方法步骤

1、取得完全无血液残留的肺脏:实验前将大鼠全身血液放净,取得完全无血液残留的肺脏。2、消化肺组织:常用于细胞消化的酶有胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。胰蛋白酶是最早用于消化、分离上皮细胞的酶,现在一般用损伤性小的弹性蛋白酶来替代胰蛋白酶。但这种酶却有活性不稳定,有效作用时间短暂,容易自我降解等问题。D

肺泡上皮细胞的分离步骤

一、取得完全无血液残留的肺脏:实验前j将大鼠全身血液放净,取得完全无血液残留的肺脏二、消化肺组织:常用于细胞消化的酶有胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。胰蛋白酶是最早用于消化、分离上皮细胞的酶,现在一般用损伤性小的弹性蛋白酶来替代胰蛋白酶。但这种酶却有活性不稳定,有效作用时间短暂,容易自我降解等问题。D

技术强则药物强-单个B细胞抗体制备技术

  如今,单克隆抗体药物以其独特的作用机制及高效性,在肿瘤和自身免疫疾病的治疗中发挥了不可估量的作用,成为全球的研发热点,目前已有2400个单克隆抗体药物处于研发及商业化阶段。   1975年杂交瘤技术问世[1]。1986年鼠源单克隆抗体药物Muromonab的上市拉开了单克隆抗体发展的序幕。

化工分离设备技术特点

化工分离设备技术有以下特点: (1)化工分离技术的多样性 由于化工分离技术的应用领域十分广泛,决定了分离技术的多样性。按机理划分,大致可分成5类:①生成新相以进行分离(如蒸馏、结晶);②加入新相进行分离(如萃取、吸收);③用隔离物进行分离(如膜分离);④用固体试剂进行分离(如吸附、离子交换);⑤用外

基于粘附力的新型干细胞分离技术

  近日,美国佐治亚理工学院、ARUNA生物医学公司以及密歇根大学等机构的研究人员开发出了一种名为µSHEAR(micro stem cell high-efficiency adhesion-based recovery)的新型干细胞分离技术,这一技术依据的是细胞间容易区分的粘附力物理差异。相关研

中药分析样品前处理技术(二)

液相微萃取(LPME) LPME技术具有操作简便、快捷、成本低廉、易与色谱系统联用等优点。近年来,作为一种新型的样品前处理技术,已经引起药物分析领域研究人员的注意。 室温离子液体(Room Temperature Ionic Liquids),是指在室温或室温附近温度下呈液态的仅由

显微切割技术

  一、显微切割技术出现的背景   在分子病理学研究中,常常遇到两个比较棘手的问题:   一是选取的研究材料需要在某一方面具有相同的特征,即具有一定程度的同质性。我们人体的各种组织绝大多数是由多种不同细胞组成的异质性的细胞群,这种选取同质性的研究材料问题在对人体组织的深入研究中常常遇到却又不易解

显微切割技术

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亚细胞结构的分离与鉴定-1

细胞由各种亚细胞结构组成。其重要的研究手段之一是分离纯化亚细胞组分,观察它们的结构或进行生化分析。离心技术是实现这一目标的基本手段。一般认为,转速为10~25Kr/min的离心机称为高速离心机;转速超过25Kr/min,离心力大于89Kg者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100Kr/mi

打破疫苗研制的“天花板”——可辨别细胞特征的先进工具

  每次我们达到一个新的“天花板”,便会在几年内打破它。   疫苗是科学对抗感染的胜利。它们击败了世界卫生组织在1980年宣布已被彻底根除的天花,并且大幅减少了很多其他传染疾病的死亡人数。   但这并非全部。美国国立卫生研究院疫苗研究中心免疫学家Mario Roederer表示,寻找对抗诸

磁分离技术在水处理工程中的应用工艺及发展趋势

一、引言  磁分离技术是借助磁场力的作用,对磁性不同的物质进行分离的一种物理分离方法。  磁分离技术可以说是一门比较古老、较成熟的技术,zui早应用于选矿和瓷土工业。1845年,美国发表了工业磁选机的。磁分离技术作为有磁性差异的两种及多种物质的选别手段,在矿石的精选、煤的脱硫、玻璃及水泥等,除铁、高

通过技术创新 驱动CAR-T制造优化

随着CAR-T疗法获批上市,优化CAR-T细胞生产工艺成为迫切需求,市场急需更高效、成本更低的细胞生产工艺。2017年全封闭自动化CAR-TXpress™系统正式进入CAR-T市场,为全球带来新一代CAR-T生产工艺,可实现CAR-T细胞高效率、低成本生产,备受瞩目。近日,《CELL

低速离心机在分离细胞的应用

离心机是一种结构复杂的高速旋转机械,它是利用离心力,不同物质在离心场中沉淀速度的差异,对混合溶液进行快速分离的专门设备,是一种将装有样品溶液的离心管、瓶或袋通过离心机转子置于离心轴上,利用转头绕轴高速旋转所产生的强大离心力,使样品中不同性质颗粒相互分离的特殊装置。可以实现样品的分析、分离。从转速看,

多项仪器研发项目列入863计划和2014备选项目

  一、前沿生物技术主题  1.蛋白质测序新技术新装备及配套试剂国产化  (1)阵列毛细管柱蛋白质分离-阵列点样装置  研制二维阵列毛细管分离新装置,第一维分离柱可分离48个馏分,第二维维阵列毛细管分离柱可同时分离48个流份;开发阵列紫外检测器; 研制多柱点样头并行点样器和流份收集器;开发

流式细胞仪的原理及应用举例

简介免疫细胞是一组不均一的细胞群体。各种特定的细胞群其细胞表面表达有各自特异的表面标志分子,利用这些特异的表面标志,可以鉴定、分离和纯化相应的细胞群。随着单克隆抗体技术的诞生和免疫标记技术(特别是荧光标记技术)的发展,以及计算机科学的应用,使利用仪器的方法检测特异的细胞膜表面分子成为可能。本章介绍的

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循环肿瘤细胞的检测方法(二)

1.2 物理特性富集法物理特性富集法根据物理性质来分离CTC,包括大小、密度、力学和介电性质。从大小上来看,CTC的直径约为10-20μm,而血细胞大小为7-12μm,通过过滤可留下体积较大的CTC。从密度上来看,CTC的密度较白细胞和红细胞密度小,通过密度梯度离心可实现CTC分离。除了大小和密度的

加速崛起的黄金赛道?一文深度了解

  一、细胞与基因治疗逐渐成熟,已步入快速发展通道  (一)细胞与基因治疗直接作用于遗传物质,临床应用前景广阔  细胞与基因治疗是指将外源遗传物质导入靶细胞,以修饰或操纵基因的表达,改变 细胞的生物学特性以达到治疗效果的一种新兴治疗方式。其作用机制主要包括以下 三个方面:  (1)替换:用正常的基因

微生物发酵工程中发酵液过滤技术综述

发酵已经从过去简单的生产酒精类饮料、生产醋酸和发酵面包发展到今天成为生物工程的一个极其重要的分支,成为一个包括了微生物学、化学工程、基因工程、细胞工程、机械工程和计算机软硬件工程的一个多学科工程.从广义上讲,发酵工程由三部分组成:上游工程,发酵工程和下游工程.其中,下游工程指从发酵液中分离和纯化产品

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小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

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血细胞五分类技术及其应用进展

血细胞五分类测定常用技术及五分类技术原理:血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一,是指对一定体积内血细胞数量及异质性进行分析的仪器。20世纪9o年代以来,随着电子技术、流式细胞技术、激光技术、电子计算机技术和新荧光化学物质等各种高新技术在血细胞分析仪中的应用.使血细胞分析仪的检测原理不断完

周斌组合作发现心肌细胞的增殖活性具有区域性特点

  10月1日, 国际学术期刊 Nature Communications 在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)周斌组与上海交通大学胸科医院何奔组合作的研究成果“Cell proliferation fate mapping reveals regional c

高分子磁性微球在生物分离中的应用

高分子磁性微球技术属于磁性分离技术,是将分离技术的高选择性、高回收率的特点与磁性材料的磁可导性相结合的一种新的分离技术,特点是操作简便、快速,分离效果好,在细胞分离、分类,蛋白质提纯,核酸分离等领域有着广泛的应用。一. 细胞分离高分子磁性微球作为不溶性载体,可在其表面接枝具有生物活性的吸附