应用激光捕获显微切割和蛋白质组学技术筛选鼻咽癌的差异表达蛋白质

[摘要] 　目的: 筛选鼻咽癌( nasopharyngeal carcinoma , NPC ) 的差异表达蛋白质, 为寻找NPC 的分子标志物提供科学依据。方法: 采用激光捕获显微切割技术( laser cap ture microdissection , LCM ) 分别从NPC组织和正常鼻咽上皮组织( normal nasopharyngeal ep ithelial tissue , NNET) 中纯化NPC 细胞和正常鼻咽上皮细胞( normal nasopharyngeal ep ithelial cells, NNEC) ,应用二维凝胶电泳( 2 2DE ) 分离LCM 纯化细胞的蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALD I2TOF 2MS) 和电喷雾电离串联质谱( ESI2Q 2TOF 2MS)鉴定差异蛋白质点,Western 印迹和组织芯片( tissue microarray, TMA ) 免疫组织化学验证差异蛋白鳞状细胞癌抗原1 ( SCCA1 ) 在两种组织中的表达水平。结果: 建立了LCM 纯化的NPC细胞和NNEC的2 2DE图谱,质谱鉴定了36 个差异蛋白质, 其中20 个蛋白只在NPC 表达或表达上调, 1 6 个蛋白在NPC中表达下调或缺失。Western 印迹和组织芯片免疫组织化学结果显示: SCCA1在NPC中的表达水平较NNET明显下调,与比较蛋白质组学结果一致。结论: 3 6 个差异蛋白可能与NPC的发病有关,为筛选NPC分子标志物奠定了基础。