顺铂作用HeLa细胞的蛋白质组学研究

【摘要】　目的:用双向电泳———质谱法分析顺铂作用于人宫颈癌HeLa 细胞后蛋白质组的变化。方法:体外培养HeLa 细胞,用MTT 法观察不同时间、不同浓度顺铂对细胞的增殖抑制作用。加入10μg/ mL顺铂作用于细胞24 h ,提取总蛋白,进行双向电泳测定,凝胶考染显色,用ImageMaster 2D Platium 510软件对获得的蛋白图谱加以分析,寻找差异表达的蛋白质。切取差异点,胶内酶切后进行MALDI2TO2F2MS 分析和数据库搜索,实现对蛋白点的定性鉴定。结果:顺铂可显著抑制HeLa 细胞的生长,且具有一定的时效和量效关系。经双向电泳和质谱后,成功鉴定了7 个蛋白质,包括原肌球蛋白、肌动蛋白、磷酸丙糖异构酶,磷酸甘油酸激酶和亲环蛋白A 等。结论:顺铂可显著抑制HeLa 细胞的生长, 并引起HeLa 细胞蛋白质组的改变,可能与顺铂的抗肿瘤作用有关。