Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(一)

鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验,Salmonella Typhimurium / Reverse Mutation Assay)于 1975年建立并不断发展完善,目前已被世界各国广为采用,已经成为毒理学实验室必需开展的重要实验项目。Ames实验用于检测待分析物质的致突变作用,该验灵敏、高效、检测范围广。Ames 试验原理Ames 试验利用鼠伤寒沙门氏组氨酸营养缺陷型菌株,该缺陷型菌株不能合成组氨酸,故在缺乏组氨酸的培养基上,仅少数自发回复突变的细菌生长;假如有致突变物存在,则营养缺陷型的细菌诱导回复突变成原养型,因而能生长形成菌落,据此判断受试物是否为致突变物。某些致突变物需要代谢活化后才能引起回复突变, 故需加入经诱导剂诱导的大鼠肝制备的 S9混合液。北京汇智泰康医药技术有限公司针对Ames试验开发Ames试剂盒, 本试剂盒省去了培养基成分准备、诱导 S9 制备、菌株 鉴定、菌株培养等时......阅读全文

Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(一)

鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验,Salmonella Typhimurium / Reverse Mutation Assay)于 1975年建立并不断发展完善,目前已被世界各国广为采用,已经成为毒理学实验室必需开展的重要实验项目。Ames实验用于检测待分析物质的致突变作用,该验灵敏、

Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(四)

试验设计及受试物的特殊处理1) 剂量设计 决定受试物最高剂量的原则是受试物对试验菌株的毒性和受试物的溶解度。对于纯的化学物质,一般最低剂量为每平皿0.2 μg,最高剂量为 5 mg,或溶解度允许,或饱和浓度,或对细菌产生最小毒性浓度。对于毒性很低、摄入量很大的定型产品,可根据其溶解度和对细菌

Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(二)

6.10  菌株鉴定用和特殊用途试剂 6.10.1  组氨酸—生物素平板成分:琼脂粉 15g蒸馏水 944mL(V-B)培养基E 20mL20%葡萄糖 20mL灭菌盐酸组氨酸水溶液(0.5g/100mL) 10mL灭菌0.5mmol/L生物素溶液 6mL配制:高压灭菌琼脂和水后,将灭菌20%葡萄糖,

Ames试验(沙门氏菌回复突变试验)方法及导则(三)

12  数据处理和结果判断记录受试物各剂量组、空白对照(自发回变)、溶剂对照以及阳性诱变剂对照的每皿回变菌落数,并求平均值和标准差。如果受试物的回变菌落数是溶剂对照回变菌落数的两倍或两倍以上,并呈剂量-反应关系者,则该受试物判定为致突变阳性。受试物经上述四个试验菌株测定后,只要有一个试验菌株,无论在

鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验简介

  又称Ames试验,检测受试物诱发鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型突变株(his-)回复突变成野生型(his+)的能力。试验菌株都有组氨酸突变(his-),不能自行合成组氨酸,在不含组氨酸的最低营养平皿上不能生长,回复突变成野生型后能自行合成组氨酸,可在最低营养平皿上生长成可见菌落。计数最低营养平皿

Ames试验的类型

  Ames试验是由由美国加利福利亚大学伯克利分校生化系B.N.Ames教授实验室在1975年建立的鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验,从建立到后来的不断完善,现在Ames试验被广泛应用于化合物的致突变性和潜在致癌性的初筛检验。为了对Ames试验有更多的了解,特收集整理了网上的资料,对Ames试验的类型进行

Ames检测法的原理及试验方法

  原理  化学物质引起的诱变往往不是直接的,它要经过生物的消化吸收,特别是高等生物的肝脏中的有关酶的作用再起作用。而且,诱变剂仅仅改变突变频率,而不直接影响突变方向,所以同样的诱变剂也能导致回复突变。  实验方法  首先对一组雄性大鼠进行腹腔注射芳香族化合物,能大大增强鼠肝脏酶系的活性,4天后杀鼠

Ames检测法的试验方法

  首先对一组雄性大鼠进行腹腔注射芳香族化合物,能大大增强鼠肝脏酶系的活性,4天后杀鼠取肝组织,捣碎后离心制备肝酶(S9)悬液,然后将待测产物和S9一级沙门氏菌的组氨酸突变株混合后倒平板,若能产生回复突变的待测产物则可判定为诱变物。

Ames试验的步骤和方法介绍

  Ames试验的常规方法有斑点试验和平板掺入试验。  1.菌株鉴定 用于测试的菌株,需经基因型和生物学性状鉴定,符合要求才能投入使用。  目前推荐使用的一套菌株是TA97、TA98、TA100和TA102。鉴定前先进行增菌培养。为鉴定结果可靠,需同时培养野生型TV菌株,作为测试菌基因型之对照。增菌

关于埃姆斯实验的基本简介

  Ames试验又称鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体(Salmonellatyphimurium/microsomeassay)试验。本方法是利用鼠伤寒沙门菌(Salmonellatyphimurium)的组氨酸营养缺陷型菌株发生回复突变的性能来检测被检物质是否具有致突变性。

Ames试验的基本介绍

  污染物对人体的潜在危害,引起人们的普遍关注。世界上已发展了百余种短期快速测试法,检测污染物的遗传毒性效应。B.N.Ames等经十余年努力,于1975年建立并不断发展完善的沙门氏菌回复突变试验(亦称Ames试验)已被世界各国广为采用。该法比较快速、简便、敏感、经济,且适用于测试混合物,反映多种污染

Ames试验的目的和原理

  鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)的组氨酸营养缺陷型(his-)菌株,在含微量组氨酸的培养基中,除极少数自发回复突变的细胞外,一般只能分裂几次,形成在显微镜下才能见到的微菌落。受诱变剂作用后,大量细胞发生回复突变,自行合成组氨酸,发育成肉眼可见的菌落。某些化学物质需经

沙门氏菌回复突变实验

目的 :学习利用细菌检测基因突变  的方法 Ames试验 即鼠伤寒沙门氏菌营养缺陷型回复突变  试验,是目前检测基因突变最常用方法之一。 原理 :利用鼠伤寒沙门氏菌突变株,即组氨酸缺陷型,其原始菌株菌体内的组氨酸是通过自身一系列酶催化反应合成的,这种能自身合成所需营养成份的菌株叫做野生型菌株

沙门氏菌回复突变实验

目的 :学习利用细菌检测基因突变  的方法 Ames试验 即鼠伤寒沙门氏菌营养缺陷型回复突变  试验,是目前检测基因突变最常用方法之一。 原理 :利用鼠伤寒沙门氏菌突变株,即组氨酸缺陷型,其原始菌株菌体内的组氨酸是通过自身一系列酶催化反应合成的,这种能自身合成所需营养成份的菌株叫做野生型菌株

新版土壤导则解读

  为了保护土壤环境,生态环境部印发了《环境影响评价技术导则土壤环境(试行)》(HJ 964-2018)(以下简称《土壤导则》)于2019年7月1日正式实施。  《土壤导则》首次发布,应该重点关注哪些内容?  1  哪些行业需要做土壤环境影响评价?  根据《环境影响评价技术导则土壤环境(试行)》(H

关于克林霉素磷酸酯注射液的毒理研究介绍

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简述苯并芘的致突变性的危害

  所谓的致突变性是环境中某些外界因素在一定条件下引起机体的遗传物质发生突然的根本的变异性能。这种突变造成遗传物质复制错乱,有时可引起形态和结构及功能的改变,导致遗传缺陷和疾病。常用的化学物致突变方法有细菌回复突变试验、鼠伤寒沙门菌回变试验 (Ames 试验)、微核试验、染色体畸变试验和程序外DNA

关于硫酸双肼屈嗪片的用药禁忌

  1、孕妇及哺乳期妇女用药   双肼屈嗪广泛适用于妊娠期高血压,但妊娠早期则须慎用,因其可与DNA结合导致Ames试验(鼠伤寒、沙门营养缺陷回复突变试验--一种致突变试验)阳性。本品是否排入乳汁尚不清楚,故不推荐用于乳母。  2、儿童用药   未见儿童应用的安全性试验。  3、老年用药   老年人

土壤环评技术导则(意见稿)首次发布-规定内容及方法

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农药理化性质测定试验导则等97项农业行业标准公布

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关于克林霉素的药理毒理介绍

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弯曲试验机操作注意10则

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变异在检查致癌物质中的作用

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