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显微成像小课堂丨宽场荧光显微镜

在活体细胞成像应用中,宽场荧光显微镜有助于观察放置于显微镜载物台上特定的环境室中生长的粘附细胞的动力学特性。在最基本的配置中,配备有EPI荧光照明的标准倒置组织培养显微镜与区域阵列检测器系统(通常是CCD摄像机)、合适的荧光滤色片和光闸系统耦合,以限制细胞过度暴露于有害的激发光。基本荧光显微镜依靠精心匹配的干涉滤色片来选择特定的带宽用于照明和检测发射光。光源包括汞、氙气和金属卤化物弧光灯、光束扩展激光系统和发光二极管(LED),所有这些都需要不同的滤色片规格。用于荧光显微镜的合成荧光团具有覆盖近紫外、可见和近红外区域的发射光谱。基因编码荧光蛋白的应用极大地扩展了荧光显微镜在活细胞成像中的能力,使研究人员能够精确地瞄准感兴趣的亚细胞区域。 锘海自主研发的一款新型光片照明显微镜Nuohai LS 18,专为透明化大组织样品高分辨3D成像而设计,致力于探索脑,脾,小肠,肾,肺,心脏,肿瘤等多种完整器官的3D精准结构。 ......阅读全文

显微成像小课堂丨宽场荧光显微镜

  在活体细胞成像应用中,宽场荧光显微镜有助于观察放置于显微镜载物台上特定的环境室中生长的粘附细胞的动力学特性。在最基本的配置中,配备有EPI荧光照明的标准倒置组织培养显微镜与区域阵列检测器系统(通常是CCD摄像机)、合适的荧光滤色片和光闸系统耦合,以限制细胞过度暴露于有害的激发光。基本荧光显微镜依

显微成像小课堂丨告别非焦平面信息干扰

  虽然我们常说的分辨率指的焦平面上的分辨率(即XY方向),决定分辨率高下的决定因素是物镜的数值孔径,但是其实在宽场荧光显微镜中,样本中整个被照亮的区域都会发射出荧光,这些非焦平面上的荧光其实对于焦平面上发射出的荧光,也就是我们真正关注的信息来说就是一种干扰,这也可以理解为在Z方向上,也是有分辨率的

宽场荧光显微镜的优势

1、高分辨率16bit。由于是激光和荧光的共聚焦成像以及Pinhole的应用阻止了焦点以外的干扰衍射光和散射光,共聚焦显微镜的分辨率远非普通荧光显微镜所能及,这也是国际上共聚焦显微镜大为流行的原因之一。2、断层扫描共聚焦采取电动马达自动控制步距,使得Z轴上的最小移动步距可精确到40nm。这使得在Z轴

徕卡荧光显微镜明场和暗场的成像方法

徕卡荧光显微镜根据衬度形成的机制,对散射吸收像可以有两种成像方式: (一)明场成像法(BFI),即只让近轴区的透射电子柬通过物镜光阑,形成亮背景上的暗图形像。物镜光阑的孔越小,明场像的衬度越大;(二)暗场成像法(DFI),即只让部分大角度的散射束或晶体的某衍射束通过物镜光阑,而将透射束挡掉。这样形成

BLT小课堂丨植物蛋白互作技术(一)

植物蛋白互作技术我们的世界物种多种多样,而与我们人类生存关系最密切的就是植物。随着时间的推移与科技的进步,人类在逐步揭示自身基因真相的同时,也在不断探寻植物基因的种种功能。其中,蛋白质是植物生命活动的主要承担者。因此,在植物学相关研究中,蛋白质之间的相互作用是研究的重要基础和手段。目前,研究蛋白质-

BLT小课堂丨植物蛋白互作技术(二)

免疫共沉淀技术(CoIP):借助抗体和抗原之间的专一性,确定两种蛋白质在完整细胞内生理性的相互作用。当用预先固化在argarose beads上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白,那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过蛋白变性分离,对B蛋白进行检测,进而证明两者间的相互作用。优

徕卡FLUOSYNC:多色光谱拆分宽场荧光成像方法

作者Johannes Amon博士Peter Laskey博士,徕卡显微系统公司FluoSync 是一种使用单次曝光同时进行多通道荧光成像的精简方法。传统的荧光成像方法通常按顺序对每个通道成像,以减少荧光团之间的串扰。之前已单独介绍了多光谱成像以及后续的线性拆分或基于相量的光谱拆分方法。每一种方法都

宽场荧光和共聚焦显微镜理论

在共聚焦显微镜中,测定共定位的能力受限于光学系统的分辨率及用于照明样品的入射光波长。宽场荧光和共聚焦显微镜理论分辨率约为 200nm,但在实际上,由于各种原因这个数降到 400nm 和 600nm 之间,原因包括显微镜光路未完全对准、光学折射率波动、光学像差及样品制备的不合适。然而,对于一个已经完全

成分输血小课堂(一)

输血是血液病的重要支持疗法,是多数血液病得以有效治疗的重要保障,在某些情况下,输血也是目前个别血液病的唯一有效治疗手段。随着血液分离技术的进展,输血已从传统观念的输全血逐渐发展为成分输血,输血的应用范围也从原来的单纯替代治疗发展为包括干细胞移植等重要的治疗技术。全血输血输血的传统观念是输全血,随着现

成分输血小课堂(二)

7.辐照红细胞红细胞制品经过r 射线照射后称为辐照红细胞。常用的照射源是60Co或137Cs ,照射剂量为1500-3000cGy, 照射目的是灭活血制品中的免疫活性淋巴细胞。因为处于强烈联合化疗及放疗的病人处于继发性免疫缺陷状态,对输入的淋巴细胞无排斥能力,致使供体的淋巴细胞植活,引起输血