显微成像小课堂丨宽场荧光显微镜
在活体细胞成像应用中,宽场荧光显微镜有助于观察放置于显微镜载物台上特定的环境室中生长的粘附细胞的动力学特性。在最基本的配置中,配备有EPI荧光照明的标准倒置组织培养显微镜与区域阵列检测器系统(通常是CCD摄像机)、合适的荧光滤色片和光闸系统耦合,以限制细胞过度暴露于有害的激发光。基本荧光显微镜依靠精心匹配的干涉滤色片来选择特定的带宽用于照明和检测发射光。光源包括汞、氙气和金属卤化物弧光灯、光束扩展激光系统和发光二极管(LED),所有这些都需要不同的滤色片规格。用于荧光显微镜的合成荧光团具有覆盖近紫外、可见和近红外区域的发射光谱。基因编码荧光蛋白的应用极大地扩展了荧光显微镜在活细胞成像中的能力,使研究人员能够精确地瞄准感兴趣的亚细胞区域。 锘海自主研发的一款新型光片照明显微镜Nuohai LS 18,专为透明化大组织样品高分辨3D成像而设计,致力于探索脑,脾,小肠,肾,肺,心脏,肿瘤等多种完整器官的3D精准结构。 ......阅读全文
显微成像小课堂丨宽场荧光显微镜
在活体细胞成像应用中,宽场荧光显微镜有助于观察放置于显微镜载物台上特定的环境室中生长的粘附细胞的动力学特性。在最基本的配置中,配备有EPI荧光照明的标准倒置组织培养显微镜与区域阵列检测器系统(通常是CCD摄像机)、合适的荧光滤色片和光闸系统耦合,以限制细胞过度暴露于有害的激发光。基本荧光显微镜依
显微成像小课堂丨告别非焦平面信息干扰
虽然我们常说的分辨率指的焦平面上的分辨率(即XY方向),决定分辨率高下的决定因素是物镜的数值孔径,但是其实在宽场荧光显微镜中,样本中整个被照亮的区域都会发射出荧光,这些非焦平面上的荧光其实对于焦平面上发射出的荧光,也就是我们真正关注的信息来说就是一种干扰,这也可以理解为在Z方向上,也是有分辨率的
宽场荧光显微镜的优势
1、高分辨率16bit。由于是激光和荧光的共聚焦成像以及Pinhole的应用阻止了焦点以外的干扰衍射光和散射光,共聚焦显微镜的分辨率远非普通荧光显微镜所能及,这也是国际上共聚焦显微镜大为流行的原因之一。2、断层扫描共聚焦采取电动马达自动控制步距,使得Z轴上的最小移动步距可精确到40nm。这使得在Z轴
徕卡荧光显微镜明场和暗场的成像方法
徕卡荧光显微镜根据衬度形成的机制,对散射吸收像可以有两种成像方式: (一)明场成像法(BFI),即只让近轴区的透射电子柬通过物镜光阑,形成亮背景上的暗图形像。物镜光阑的孔越小,明场像的衬度越大;(二)暗场成像法(DFI),即只让部分大角度的散射束或晶体的某衍射束通过物镜光阑,而将透射束挡掉。这样形成
BLT小课堂丨植物蛋白互作技术(一)
植物蛋白互作技术我们的世界物种多种多样,而与我们人类生存关系最密切的就是植物。随着时间的推移与科技的进步,人类在逐步揭示自身基因真相的同时,也在不断探寻植物基因的种种功能。其中,蛋白质是植物生命活动的主要承担者。因此,在植物学相关研究中,蛋白质之间的相互作用是研究的重要基础和手段。目前,研究蛋白质-
BLT小课堂丨植物蛋白互作技术(二)
免疫共沉淀技术(CoIP):借助抗体和抗原之间的专一性,确定两种蛋白质在完整细胞内生理性的相互作用。当用预先固化在argarose beads上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白,那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过蛋白变性分离,对B蛋白进行检测,进而证明两者间的相互作用。优
徕卡FLUOSYNC:多色光谱拆分宽场荧光成像方法
作者Johannes Amon博士Peter Laskey博士,徕卡显微系统公司FluoSync 是一种使用单次曝光同时进行多通道荧光成像的精简方法。传统的荧光成像方法通常按顺序对每个通道成像,以减少荧光团之间的串扰。之前已单独介绍了多光谱成像以及后续的线性拆分或基于相量的光谱拆分方法。每一种方法都
宽场荧光和共聚焦显微镜理论
在共聚焦显微镜中,测定共定位的能力受限于光学系统的分辨率及用于照明样品的入射光波长。宽场荧光和共聚焦显微镜理论分辨率约为 200nm,但在实际上,由于各种原因这个数降到 400nm 和 600nm 之间,原因包括显微镜光路未完全对准、光学折射率波动、光学像差及样品制备的不合适。然而,对于一个已经完全
成分输血小课堂(一)
输血是血液病的重要支持疗法,是多数血液病得以有效治疗的重要保障,在某些情况下,输血也是目前个别血液病的唯一有效治疗手段。随着血液分离技术的进展,输血已从传统观念的输全血逐渐发展为成分输血,输血的应用范围也从原来的单纯替代治疗发展为包括干细胞移植等重要的治疗技术。全血输血输血的传统观念是输全血,随着现
成分输血小课堂(二)
7.辐照红细胞红细胞制品经过r 射线照射后称为辐照红细胞。常用的照射源是60Co或137Cs ,照射剂量为1500-3000cGy, 照射目的是灭活血制品中的免疫活性淋巴细胞。因为处于强烈联合化疗及放疗的病人处于继发性免疫缺陷状态,对输入的淋巴细胞无排斥能力,致使供体的淋巴细胞植活,引起输血
荧光显微镜成像质量的决定因素
荧光光学系统的成像质量主要取决于像的衬度和像的亮度,像的衬度是由样品中激发出的荧光与背景上观察到的光之比决定的。背景光包括透过截止激发光的滤色片的杂散激发光,样品组织成分的自发荧光和光学系统的自发荧光和杂散光,在荧光显微术中尽全力要解决的是既获得最佳的像衬度,同时又维持像有足够亮度,这两者往往是矛盾
前沿显微成像技术专题之:光片荧光显微镜(三)
关于光片显微镜,通过前面第一,第二期的介绍,相信大家已经有了较为全面的了解。在本期中,我们将介绍另外几种光片显微技术,它们和第二期最后介绍的晶格光片显微镜一样,都是对传统光片显微技术的改进,以满足更高的成像要求。最后,我们将为大家总结如何挑选适合光片显微镜的科学相机。倒置平面照明显微镜 (d)iSP
前沿显微成像技术专题之:光片荧光显微镜(二)
上一篇简单介绍了光片荧光显微镜的一些基本知识,光片显微镜的诞生大大拓展了生命科学的研究视野,但它也有一些需要克服的天生缺陷和技术难点。本期就让我们从这里开始,一步步追寻光片显微镜的发展足迹。静态光片和技术难点正如我们在上一期提到的那样,传统的光片是由高斯光束通过一个柱形透镜来实现的。 最初,只用一个
前沿显微成像技术专题之:光片荧光显微镜(一)
在过去二十多年中,光学显微成像技术发展迅速,不断突破传统极限。生命科学研究,要求成像系统在不影响生物活性的前提下,实现更大视野,更高分辨率,更高速度的三维成像。这也意味着对成像探测器 - 科研相机的要求也越来越高。从本周开始,我们将为大家带来前沿显微成像技术专题系列,和大家一起探讨前沿的显微成像技术
旋转蒸发器小课堂
导读:旋转蒸发器选购须知-你问我答 1、问:旋转蒸发器的工作原理是什么? 答:负压条件下,蒸发瓶在恒温水浴锅中旋转,溶液在瓶壁上形成薄膜,加大蒸发面积。低温下高效蒸发,冷凝回收、浓缩分离物料。 2、问:其核心技术是什么? 答:是系统的气密性,即在各种溶剂的侵蚀下,在运动状态下,系统能否保持高真空度。
高内涵显微镜哪个好
如何选择适合自己的高内涵仪器,主要考虑三个方面: 1、成像速度 高内涵仪器是在显微镜的基础上搭建的高速显微成像的平台,从所得图像中抽出一张和普通显微镜拍摄的图像没有区别,也就是说,宽场荧光显微镜型高内涵提供的是宽场荧光显微图像
SCIEX学堂新课-|-QTRAP®小课堂
质谱进阶不用愁,短视频轻松看 “玩转质谱之QTRAP小课堂”,是“SCIEX 学堂”平台中一个专注于分享质谱知识,仪器操作、数据处理的实用技巧小课程。 一台仪器可实现两台质谱的功能,一个平台一次进样可同时进行定性和定量分析。MRM-IDA-EPI技术可同时获得与三重四极杆灵敏度相当水平的MRM数据
SCIEX学堂新课-|-QTRAP®小课堂
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挑战更高效的高内涵分析:In-Cell-Analyzer高内涵分析系统
高内涵成像技术已成为不可缺少的工具,推进我们在细胞水平了解人体是如何工作的。——Anthony Davies,都柏林大学圣三一学院 高内涵研究中心主管 高内涵分析(High Content Analysis,简称HCA)是对高分辨率显微镜所拍摄细胞图像的自动提取和分析。高内涵,意味着丰富的信息。这
3D荧光显微镜可帮助大脑深度成像
活体小鼠大脑深处血管成像图。 截图来源:Eurekalert网站 科技日报北京5月30日电 (实习记者张佳欣)来自瑞士苏黎世大学和苏黎世理工大学的研究人员开发出一种称为漫反射光学定位成像(DOLI)的新技术,利用它可以高分辨率、无创观察活体小鼠大脑深部的微血管。该技术具有卓越的分辨率,可
倒置荧光显微镜技术参数、构造及成像原理
倒置荧光显微镜是近代发展起来的新式荧光显微镜,特点是激发光从物镜向下落射到标本表面,即用同一物镜作为照明聚光器和收集荧光的物镜。光路中需加上一个双色束分离器,它与光铀呈45。角,激发光被反射到物镜中,并聚集在样品上,样品所产生的荧光以及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜,反回到双色
显微课堂-|-如何辨别文件真伪
从泛泛之类到奇怪鲜有的造假案件全球身份证和驾驶证类案件占据了他工作量的 80% 左右, 接下来是出生证明和国籍证明。 但是, 也有很多奇怪鲜有的案件。 “ 我遇到最蹊跷的案件是一份塞内加尔人的单身证明, 这是一张长且窄的纸张, 上面的排版是我这辈子从来没见过的。 在做出判断前, 我所面临的挑战是找
显微课堂-|-如何辨别文件真伪
从泛泛之类到奇怪鲜有的造假案件全球身份证和驾驶证类案件占据了他工作量的 80% 左右, 接下来是出生证明和国籍证明。 但是, 也有很多奇怪鲜有的案件。 “ 我遇到最蹊跷的案件是一份塞内加尔人的单身证明, 这是一张长且窄的纸张, 上面的排版是我这辈子从来没见过的。 在做出判断前, 我所面临的挑战是找
新一代微型化双光子荧光显微镜研制成功
膜生物学国家重点实验室(中国科学院动物研究所、清华大学、北京大学)程和平院士团队研制成功了新一代高速高分辨微型化双光子荧光显微镜,获取了小鼠自由行为过程中大脑神经元和神经突触活动清晰、稳定的图像。 新一代微型化双光子荧光显微镜体积小,仅重2.2 克,适于佩戴在小动物头部颅窗上,实时记录数十个神
新一代微型化双光子荧光显微镜研制成功
膜生物学国家重点实验室(中国科学院动物研究所、清华大学、北京大学)程和平院士团队研制成功了新一代高速高分辨微型化双光子荧光显微镜,获取了小鼠自由行为过程中大脑神经元和神经突触活动清晰、稳定的图像。 新一代微型化双光子荧光显微镜体积小,仅重2.2 克,适于佩戴在小动物头部颅窗上,实时记录数十
新一代微型化双光子荧光显微镜研制成功
膜生物学国家重点实验室(中国科学院动物研究所、清华大学、北京大学)程和平院士团队研制成功了新一代高速高分辨微型化双光子荧光显微镜,获取了小鼠自由行为过程中大脑神经元和神经突触活动清晰、稳定的图像。 新一代微型化双光子荧光显微镜体积小,仅重2.2 克,适于佩戴在小动物头部颅窗上,实时记录数十个神
Nature-Methods-|-深度学习:二维图片到三维的变换
荧光显微镜在生命科学等学科中有重要作用。通过激发样本的特异性荧光标记,荧光显微镜可以准确揭示生物内部特定的组织,结构和活动。 2019年11月4日,来自UCLA的Aydogan Ozcan教授科研团队在Nature Methods上发表题为“Three-dimensional virtual
给孩子们的风险小课堂
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/8/506774.shtm在充满不确定性的世界中,如何帮助孩子们正确认识各种不期而遇的风险?如何让他们得到更好的风险教育?8月17日,“不确定性世界漫游指南”亲子科普共读活动在上海书展现场举办。 ?
电转染小课堂之如何选择波形
欢迎大家订阅电转染小课堂,本期我们来分享如何选择电穿孔的波形,各波形需要设置的参数有哪些?以及两种波形之间的转换Part 1 方波方波脉冲是指电压瞬间升至预设电压,保持电压放电,然后瞬间终止放电。一般哺乳动物细胞电转染时选择方波脉冲,有较高的转染效率和细胞存活率。选择方波时,有以下参数要进行考虑:场
Joe-Flow的流变学小课堂
温度控制:加热和冷却“今天,我想跟大家谈谈温度控制在流变测量中的重要性。要了解温度对样品流变特性的影响程度,只需测试同一个校准过的标准样品在不同温度下的粘度值就可以了。即使两次测量之间温度仅相差 1 ℃,都会导致 7 % 的粘度值变化。因此,地温度控制极其重要。”01哪种温控设备适合哪个温度范围?