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大规模培养常用方法(贴壁培养、悬浮培养与固定化培...2

大规模培养常用方法(贴壁培养、悬浮培养与固定化培养)-2CelliGen、 CelliGen PlusTM和Bioflo3000反应器是常用的贴壁培养式生物反应器,用于细胞贴壁培养时可用篮式搅拌系统和圆盘状载体。此载体是直径6毫米无纺聚酯纤维圆片,具很高表面积与体积比(1200cm2/g),利于获得高细胞密度。篮式搅拌系统和载体培养是目前贴壁细胞培养使用最多方式,用于杂交瘤细胞、Hela细胞、293细胞、CHO细胞及其它细胞培养。此种方式培养细胞,细胞接种后贴壁快。 三、悬浮培养(suspension culture):是指细胞在反应器中自由悬浮生长的过程。主要用于非贴壁依赖型细胞培养,如杂交瘤细胞等;是在微生物发酵的基础上发通起来的。 无血清悬浮培养是用已知人源或动物来源的蛋白或激素代替动物血清的一种细胞培养方式,它能减少后期纯化工作,提高产品质量,正逐渐成为动物细胞大规模培养的研究新方向。 四、固定化培养(i......阅读全文

293细胞的大规模培养

293细胞是腺病毒载体的包装细胞。腺病毒是继逆转录病毒后用于基因治疗研究的热门载体。直接将腺病毒载体导入人体内表达目的基因,治疗恶性肿瘤、心血管疾病或一些遗传疾病已取得可喜进展;利用腺病毒载体在包装细胞293中表达分泌性蛋白质,如蛋白酪氨酸激酶1C等亦成为生产重组蛋白的一条途径。因此完善293细胞的

动物细胞大规模培养方法

   根据动物细胞的类型,可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。   一、动物细胞生长特性及培养温度   1.细胞生长缓慢,易污染,培养需用抗生素   2.细胞大,无细胞壁,机械强度低,环境适应性差   3.需氧少,不耐受强力通风与搅拌   4.群体生

293细胞的大规模培养

293细胞是腺病毒载体的包装细胞。腺病毒是继逆转录病毒后用于基因治疗研究的热门载体。直接将腺病毒载体导入人体内表达目的基因,治疗恶性肿瘤,心血管疾病或一些遗传疾病已取得可喜进展;利用腺病毒载体在包装细胞 293中表达分泌性蛋白质,如蛋白酪氨酸激酶 1C等亦成为生产重组蛋白的一条途径。因此完善 293

动物细胞大规模培养方法

根据动物细胞的类型,可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。 一、动物细胞生长特性及培养温度 1.细胞生长缓慢,易污染,培养需用抗生素 2.细胞大,无细胞壁,机械强度低,环境适应性差 3.需氧少,不耐受强力通风与搅拌 4.群体生长效应,贴壁生长(锚地依赖性) 5.培养过程产

微载体细胞培养技术及应用原理

  微载体细胞培养技术是细胞培养过程中常见的一种细胞培养技术。关于微载体细胞培养技术,以动物细胞为例,具体介绍如下:   一、微载体培养技术的应用   微载体培养技术于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展,该技术目前已渐日趋完善和成熟,并广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。

干货|了解这些,养好细胞不是事儿!!!

  抗体药物是目前生物技术药物研究中最为活跃的领域,特别是在肿瘤和自身免疫性疾病等方面的临床应用,更是大放异彩。随着临床需求的增加,单克隆抗体药物发展迅速,FDA已批准的抗体药物多达70多个,抗体药物销售量年增长率基本在10%以上,大大高于制药行业平均水平,其市场规模已经达到千亿美元。  我国针对单

大规模培养常用方法(贴壁培养、悬浮培养与固定化培...-1

大规模培养常用方法(贴壁培养、悬浮培养与固定化培养)-1根据动物细胞的类型,可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。 一、动物细胞生长特性及培养温度 1. 细胞生长缓慢,易污染,培养需用抗生素 2.细胞大,无细胞壁,机械强度低,环境适应性差 3.需氧少,不耐

华东理工大学动物细胞与组织工程研究室成立30周年

  2016年11月26~27日,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室动物细胞与组织工程研究室举办了隆重的30周年成立庆祝活动,研究室主任、华东理工大学张江现代生物技术研究院院长、上海倍谙基生物科技有限公司董事长谭文松教授以及周燕教授、蔡海波教授、美国俄亥俄州立大学温志友教授、美国礼来公司生物工

多项仪器研发项目列入863计划和2014备选项目

  一、前沿生物技术主题  1.蛋白质测序新技术新装备及配套试剂国产化  (1)阵列毛细管柱蛋白质分离-阵列点样装置  研制二维阵列毛细管分离新装置,第一维分离柱可分离48个馏分,第二维维阵列毛细管分离柱可同时分离48个流份;开发阵列紫外检测器; 研制多柱点样头并行点样器和流份收集器;开发

微载体培养技术(microcarrier culture technique)原理操作-2

5. 微载体培养操作要点 ●培养初期:保证培养基与微球体处于稳定的PH与温度水平,接种细胞(对数生长期,而非稳定期)至终体积1/3的培养液中,以增加细胞与微载体接触的机会。不同的微载体所用浓度及接种细胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微载体含量,更高的微载体浓度需要控制环境或经常换液。 ●

重组杆状病毒的纯化实验——编码β-半乳糖苷酶

杆状病毒是一类在自然界中专一性感染节肢动物的DNA病毒,可用于(1)作为基因工程病毒杀虫剂 ,提高害虫防治效率(2)作为超高效的真核基因表达载体 ,生产有用的工程蛋白(3)研究杆状病毒基因组的结构与功能(4)研究真核基因表达的调控机制。实验方法原理由于昆虫杆状病毒环状双链DNA基因组很大 (约 13

动物细胞大规模培养有哪几种生物反应器

      在过去几十年来,动物细胞大规模培养技术经有了很大发展,从使用转瓶(roller bottle) 、CellCube等贴壁细胞培养,发展为生物反应器(Bioreactor)进行大规模细胞培养。 自70年代以来,细胞培养用生物反应器有很大的发展,种类越

动物细胞大规模培养技术-1

一、前言动物细胞培养开始于本世纪初1962年,动物细胞培养规模开始扩大,发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法,利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等,动物细胞培养已成为医药生物高技术产业的重要部分。利用动物细胞培养技术生产的生物制品已占世界生物高技术产品市

微载体细胞培养技术及应用原理(二)

5.微载体培养操作要点• 培养初期:保证培养基与微球体处于稳定的PH与温度水平,接种细胞(对数生长期,而非稳定期)至终体积1/3的培养液中,以增加细胞与微载体接触的机会。不同的微载体所用浓度及接种细胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微载体含量,更高的微载体浓度需要控制环境或经常换液。• 贴壁阶

悬浮细胞培养技术在兽用疫苗领域的应用

细胞悬浮培养是利用生物反应器大规模培养动物细胞生产生物制品的核心技术,是当前国际上生物制品生产的主流模式,其最大优势是通过更为精确有效的工艺控制手段,在获得最大产量的同时能稳步提高产品的质量。但该技术目前在国内尚未得到广泛应用,生物制品生产仍主要采用病毒产率低、生产成本高、劳动强度大的转瓶细胞培养方

用生物反应器生产物质有何好处

法国巴斯德研究所利用生物反应器进行Vero细胞的大规模培养获得成功以来,生物反应器便以其高密度、大规模、低成本的优势时引起广泛关注。与先进国家相比,我国动物细胞生物反应器方面的技术研究和装备严重滞后,国内用于动物细胞工业化大规模培养生产的人用和兽用疫苗生产技术正处于从转瓶培养向生物反应器悬浮培养技术

大规模的问题及对策-2

用基因工程方法将bcl-2基因这种细胞凋亡抑制基因导入细胞,成为众多研究者的选择。bcl-2基因的过量表达能抑制Gln或氧缺乏引起的细胞凋亡,减少细胞特定营养成分的消耗,提高细胞密度和目的蛋白产量,这对于细胞大规模培养具有重大意义。对细胞的这种保护作用依赖于bcl-2等抑制基因的高水平表达。因此,需

动物细胞大规模培养技术-2

2、固定化方法的选择 (1) 培养规模 由于各种固定化系统可以获得相同的细胞密度,且细胞的产率主要取决于细胞的扩散,因此反应器的体积是培养规模放大的主要决定因素。虽然微载体系统可以提供最大的单元操作,但其他系统也可以通过增加单元套数而获得放大。 (2) 培养方式&nbs

利用生物反应器来生产人类所需要的某些物质有哪些好处

 缩短时间,例如生产人参素,人参要很久才长大,用机器既可以大量生产,又可以缩短时间,可以解决以前市场的供不应求的局面。  法国巴斯德研究所利用生物反应器进行Vero细胞的大规模培养获得成功以来,生物反应器便以其高密度、大规模、低成本的优势时引起广泛关注。与先进国家相比,我国动物细胞生物反应器方面的技

我国大规模细胞培养生物反应器综述(一)

文章比较全面的介绍了我国目前生物反应器的现状,各种品种发酵的特点.提出了反应器的设计要以代谢流分析为核心,要从系统生物学的角度出发.1、发展大规模细胞培养及其生物反应器借助于细胞培养进行各种产品生产已是我国生物技术产业化的重要组成部分,涉及医药、化工、轻工、食品、农业、海洋、环保等行业。培养的细胞不

无血清细胞培养基与血清细胞培养基哪个好?

很难一句话来说。但可以从几个方面分别比较。1. 产品性能方面无血清培养基更好。血清并不是生来就为养细胞而来的。血清是全血的一部分,组分很复杂,有150多种已知组分组分,多种未知组分。这些组分中,有些对细胞生长是有利的,有些对细胞生长是无作用的,有些对细胞生长反而是有害的。另外,不同的牛,由

无血清细胞培养基与血清细胞培养基哪个好?

很难一句话来说。但可以从几个方面分别比较。1. 产品性能方面无血清培养基更好。血清并不是生来就为养细胞而来的。血清是全血的一部分,组分很复杂,有 150 多种已知组分组分,多种未知组分。这些组分中,有些对细胞生长是有利的,有些对细胞生长是无作用的,有些对细胞生长反而是有害的。另外,不同的牛

生物反应器悬浮培养关键技术有哪些

 一、生物反应器在生物制药中的应用及现状  21世纪初,随着流加培养、灌流培养、基因工程等技术的发展,作为大规模培养主要设备的生物反应器规模也趋向大型化和自动化。当前生物制药的主流技术是在大型机械搅拌式反应器中,用无血清培养基和灌流工艺悬浮培养细胞进行生产。   生物反应器大规模培养在生物

微载体细胞培养技术及应用原理(一)

微载体细胞培养技术是细胞培养过程中常见的一种细胞培养技术。关于微载体细胞培养技术,以动物细胞为例,具体介绍如下: 一、微载体培养技术的应用微载体培养技术于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展,该技术目前已渐日趋完善和成熟,并广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。微载体培养是目前公认的

我国大规模细胞培养生物反应器综述(三)

3.2国内生物反应器设计与制造发展趋势  3.2.1以代谢流分析为核心的生物反应器   长期来发酵过程优化与放大所依据的基本思想和方法是采用经典动力学为基础的最佳工艺控制点为依据的静态操作方法,实质上这只是化学工程宏观动力学概念在发酵工程上的延伸。例

微载体培养技术(microcarrier culture technique)原理操作-1

一、微载体培养应用此技术于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展,该技术目前已渐日趋完善和成熟,并广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。微载体培养是目前公认的最有发展前途的一种动物细胞大规模培养技术,其兼具悬浮培养和贴壁培养的优点,放大容易。目前微载体培养广泛用于培养各种类型细胞,生产

细胞培养反应器的操作模式

动物细胞大规模培养的生物反应器操作模式,一般分为分批式操作(batch)、流加式操作(Fed-batch)、半连续式操作(semi-continuous)、连续式操作(continuous)和灌流式操作(perfusion)五种操作模式。 1. 批式操作(batch c

细胞培养反应器的操作模式

实验概要动物细胞大规模培养的生物反应器操作模式,一般分为分批式操作(batch)、流加式操作(Fed-batch)、半连续式操作(semi-continuous)、连续式操作(continuous)和灌流式操作(perfusion)五种操作模式。实验步骤1. 批式操作(batch culture)&

实验的过程中植物培养箱操作步骤和如何选用实验仪器

实验的过程中植物培养箱操作步骤和如何选用实验仪器培养基配制的操作程序:1、加琼脂和无离子水至定容量的70%左右,加热使琼脂溶解;2、琼脂溶解后,加入培养基母液、激素、糖等,稍加热使糖溶解;3、糖溶解,加无离子水至定容量;4、充分搅拌后,测pH值至要求值;5、培养基分装入瓶后灭菌。组培玻璃器皿的选择和

细解植物培养箱操作步骤

实验的过程中植物培养箱操作步骤培养基配制的操作程序:1、加琼脂和无离子水至定容量的70%左右,加热使琼脂溶解;2、琼脂溶解后,加入培养基母液、激素、糖等,稍加热使糖溶解;3、糖溶解,加无离子水至定容量;4、充分搅拌后,测pH值至要求值;5、培养基分装入瓶后灭菌。组培玻璃器皿的选择和清洗1、玻璃器皿的