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酶联免疫吸附实验(ELISA)基本原理

基本原理 1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地地放大反应效果,......阅读全文

酶免疫分析技术进展与自动化

郝繁运   综述 中国误诊学杂志  2007年 第一期  第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编 摘要:本文主要介绍了酶免疫分析的发展现状,从酶免疫分析标记技术若干环节的技术进步、在方法学上与现代化技术的融合与发展、酶免疫分析技

酶联免疫法在农药残留检测中的应用

  摘 要:酶联免疫法(ELISA)是以酶标记抗体或抗原为主要试剂的一种标记免疫分析技术,其结合了抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用,具有灵敏度高、特异性强、准确性好、检测成本低、迅速等优点,该方法近年来被广泛应用于食品安全中农药残留的检测。   古语有云:“民以食为天”,随着人们

手把手教程:实验室检测艾滋病这样做

中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心继发布《全国艾滋病检测技术规范(2009 年版)》后,近日即将发布 2015 年版《全国艾滋病检测技术规范》,此规范堪称艾滋病检测实验室的「红宝书」,适用于疾病控制中心艾滋病确认实验室和医疗机构的艾滋病初筛实验室的 HIV 检测技术操作。今天来一起了解一下

实验室HIV检测技术概述及进展

艾滋病(AIDS)又称获得性免疫缺陷综合征,是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的一种免疫缺陷性疾病。HIV感染的诊断是艾滋病预防控制 工作的重要组成部分,建立敏感实用的检测方法对于监测、诊断或血液筛查,控制艾滋病的流行显得尤为重要。以下本文就HIV的检测技术现状及进展做一综述。1 

人类免疫缺陷病毒实验室检测技术研究进展

 人类免疫缺陷病毒(HIV)检测的主要目的是用于获得性免疫缺陷综合症(AIDS)即艾滋病的病原体诊断。本文就近年来HIV检测的研究进展综述如下。         1 抗原检测  &

初探ELISA的分类和发展(一)

引言1971年瑞典的Engvall等人分别以纤维素和聚苯乙烯试管作为固相载体吸附抗原/抗体,建立了酶联免疫吸附测(Enzyme Linked Immunosrbent Assay,简称ELISA),后来人们改用板式反应孔进行ELISA,大大地提高了实验通量。ELISA实验具有极高的灵活性,实

斑点酶联免疫吸附测定

实验概要斑点酶联免疫吸附测定法(DotELISA,DELISA)是以纤维素膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板而建立的一种免疫检验方法。DELISA不仅保留了常规ELISA的优点,而且还弥补了抗原或抗体对载体包被不牢等不足,所以具有敏感性高,特异性强,被检样品用量少,节省材料,不需特殊仪

斑点酶联免疫吸附测定

实验概要斑点酶联免疫吸附测定法(DotELISA,DELISA)是以纤维素膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板而建立的一种免疫检验方法。DELISA不仅保留了常规ELISA的优点,而且还弥补了抗原或抗体对载体包被不牢等不足,所以具有敏感性高,特异性强,被检样品用量少,节省材料,不需特殊仪

食品安全快速检测技术你知多少?

快速检测技术广泛用于食品安全快速检测,临床检验、检验检疫、毒品检验等公共领域。食品安全快速检测是指对食品利用便携式分析仪器及配套试剂快速得到检测结果的一种检测方式。    1、食品安全问题主要有害污染物    (1)农药,化肥:有机磷,有机氯,硝酸盐 

CFDA颁布第一批120项医疗器械行业标准

  6月30日,国家食品药品监督管理总局在网站上发布新闻,表示以2014年第30号公告形式颁布了《子宫刮匙》等120项推荐性医疗器械行业标准。这是今年6月1日起新修订的《医疗器械监督管理条例》施行后颁布的第一批医疗器械行业标准。标准的正式颁布将推动医疗器械监督管理,对保障医疗器械安全有效、促进医疗器

ELISA开发方法

一、前言ELISA在生物药物研发的各个环节均有广泛的应用:如以生物大分子检测为目的,在药效药代评估时,对动物实验和临床实验中的血液样品的药物浓度和生物大分子标志物进行定量检测;以亲和力测定为目的,在质量分析过程中,对抗体相对于靶点抗原的亲和力检测;以亲和力筛选为目的,在抗体发现过程中,对杂交瘤细胞克

免疫组化技术全程原理剖析以及案例解答

1、定义用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。2、原理根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞

食品微生物快速检测技术研究

食物病原微生物是食品安全的重要内容,而对其的快速检测(验)一直是相关研究的热点。近年来,微生物的快速检测和自动化研究进展迅速。依靠培养基进行培养、分离及生化鉴定的传统方法费时费力。快速检测及其自动化则综合引用微生物学、化学、分子生物学、生物物理学、免疫学以及血清学试验技术对微生物进行分离、检测、鉴定

免疫PCR的基本原理

    免疫PCR的基本原理1.定义  免疫PCR(immuno polymerase chain reaction,IM-PCR)是1992年Sano建立的一种检测微量抗原的高灵敏度技术。该技术把抗原抗体反应的高特异性和聚合酶链反应的高敏感性有机结

黄曲霉毒素一般检测方法概述

  【薄层色谱法】    1.薄层层析(TLC)法    TLC法是测定黄曲霉毒素的经典方法,在薄层板展开后,在365 nm紫外灯下,黄曲霉毒素B1,B2,G1和G2分别显示紫色、蓝紫色、绿色和绿色荧光。TLC法的特异性较差,灵敏度相对较差,且测定黄曲霉毒

人绒毛膜促性腺激素(HCG)

引言:有人询问血HCG含量(化学发光)在多少范围可以诊断为宫外孕?我找到这篇教材中关于HCG测定的资料给您参考。尚没有用化学发光技术测定血HCG诊断宫外孕的标准报道。一般说来,用HCG正常上 升排除宫外孕的阳性预测值为约95%(正常妊娠每2-3天 血清HCG浓度翻1倍),比较超声结果和HCG浓度也能

各种方法人绒毛膜促性腺激素(HCG)检查

有人询问血HCG含量(化学发光)在多少范围可以诊断为宫外孕?我找到这篇教材中关于HCG测定的资料给您参考。尚没有用化学发光技术测定血HCG诊断宫外孕的标准报道。一般说来,用HCG正常上 升排除宫外孕的阳性预测值为约95%(正常妊娠每2-3天 血清HCG浓度翻1倍),比较超声结果和HCG浓度也能估计宫

酶联免疫吸附(ELISA)实验——双抗体夹心法(测抗原)

酶联免疫吸附(ELISA)可以:(1)免疫酶染色各种细胞内成份的定位。(2)研究抗酶抗体的合成。(3)显现微量的免疫沉淀反应。(4)定量检测体液中抗原或抗体成份。实验方法原理图1. 双抗体夹心法测抗原示意图 本法首先也是用特异性抗体包被于固相载体,经洗涤后加入含有抗原之待测样品,如待检样品

小鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒检测说明

中文名:小鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒别名:小鼠白介素-5(IL-5)ELISA Kit保存温度:2-8℃低温保存有效期:6个月试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-52含量。检测原理:采用双抗体夹心ABC-

食品安全快速检测技术大汇总(一)

快速检测技术广泛用于食品安全快速检测,临床检验、检验检疫、毒品检验等公共领域。食品安全快速检测是指对食品利用便携式分析仪器及配套试剂快速得到检测结果的一种检测方式。 1、食品安全问题主要有害污染物: (1)农药,化肥:有机磷,有机氯,硝酸盐 (2)兽药:兴奋剂,镇静剂,抗生素 (3)

抗体的概念、动物产生抗体的机理及单克隆抗体...(三)

单克隆抗体杂交瘤技术基本流程单克隆抗体的制备步骤1、免疫原的制备;2、免疫动物 ;选择体重18-20g BALB/C 雌性小鼠用于免疫。50-100ug抗原/只与等体积福氏完全佐剂混合,充分乳化后,经背腹部皮下多点注射及腹腔注射相结合的方式免疫,总的免疫体积0.2-0.3ml每只;间隔3周,取与

酶联免疫吸附(ELISA)实验

酶联免疫吸附(ELISA)可以:(1)免疫酶染色各种细胞内成份的定位。(2)研究抗酶抗体的合成。(3)显现微量的免疫沉淀反应。(4)定量检测体液中抗原或抗体成份。实验方法双抗体夹心法(测抗原)间接法(测抗体)竞争法测抗原实验方法原理图1. 双抗体夹心法测抗原示意图 本法首先也是用特异性抗体

生物技术在食品安全检测中的应用

  [摘要]由于人们生活质量水平的提高,对食品安全问题的关注度越来越高,在一定程度上食品检测技术水平得到了不断提高,从而使各种新设备、新技术不断应用于食品检测中。现如今,生物技术在食品检测中得到了广泛的应用,不仅提高了食品检测的精确度,而且拓展了食品检测的新方向,大大地提高了食品的安全性。文章就生物

如何检测小龙虾的孔雀石绿残留?

在之前的文章中,小编带大家实地检测了“网红“小龙虾的食品安全检测项目——重金属检测。今天,我们要书接上回,继续小龙虾食品安全检测之旅,带大家了解安全检测项目(二) ——检测兽药残留:孔雀石绿 硝基呋喃 孔雀石绿孔雀石绿不含孔雀石,它是一种人工合成的有机化合物,学名叫:三苯甲烷,有毒,能杀菌

酶联免疫吸附(ELISA)实验

 酶联免疫吸附(ELISA)可以:(1)免疫酶染色各种细胞内成份的定位。(2)研究抗酶抗体的合成。(3)显现微量的免疫沉淀反应。(4)定量检测体液中抗原或抗体成份。1 实验方法原理   双抗体夹心法(常用于测定抗原)    用特异性抗体包被

ELISA方法快速检测肉制品中的沙门氏菌

一、实验目的        掌握ELISA方法快速检测肉及肉制品中的沙门氏菌的具体方法及操作步骤。        二、实验原理  &nbs

酶标仪的分类以及特性功能

前言:我们大家都知道生物实验中有个重要的实验就是酶特性的实验,那么在做实验时有一个用来对酶进行做标记的仪器就是酶标仪,我们并不是特别的了解酶标仪,知识知道它的作用而已。下面就由小编为大家做一下酶标仪的简单介绍,希望对大家了解酶标仪有所帮助。酶标仪介绍:主要由光源系统、单色器系统、样品室、探测器和微处

ELISA法检测HIV抗体的影响因素

酶联免疫吸附实验(ELISA)是一种常用的固相免疫测定方法,被广泛应用于各种抗原和抗体的测定。《全国艾滋病检测技术规范》(2009年修订版)中要求:各筛查实验室在进行抗体检测时,先用第一种筛查试剂(高敏感性ELISA)检测,出现阴性反应报告“HIV抗体阴性”,出现阳性反应时不可直接报告阳性结果,则用

酶联免疫斑点实验(ELIspot)_PVDF Eli-spot法

实验方法原理细胞受到刺激后局部产生细胞因子,此细胞因子被特异单克隆抗体捕获。细胞分解后, 被捕获的细胞因子与生物素标记的二抗结合,其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后,PVDF孔板出现"紫色"的斑点表明细胞产生了细胞因子,通过ELISPOT酶联斑点分析系

酶标仪工作原理及未来发展

        即酶联免疫检测仪,是酶恋免疫吸附实验的专用仪器。可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来分析抗原或抗体的含量。ELISA测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下,