单晶培养科研实验知识分享
好多同学/老师一直培养不出单晶，或者周期太长了，希望这个分享能得到一些帮助。单晶培养的方法多种多样，如升华法、共结晶法等。最简单的最实用常用的有1.溶剂缓慢挥发法；2.液相扩散法；3.气相扩散法。99％的单晶是用以上三种方法培养出来的。一、单晶培养要点 1、一般以10--25mg 为佳，如果你只有2mg左右样品，也没关系，但这时就要选择液相扩散法和气相扩散法，不能使用溶剂缓慢挥发法。2、单晶培养的样品的预处理样品溶解后一定要过滤，不能用滤纸，而是用 一小团棉花轻轻的塞在滴管的中下部或下部，不要塞太紧，否则流的太慢。样品当然是越纯越好，不过如果实在没办法弄纯也没关系，培养一次就相当于提纯了一次，也可用一些TLC 显示有杂点的东西长单晶，但要多养几次。3、一定要做好记录，一次就得到单晶的可能性比较小。因此最好的方法就是在第一次培养单晶的时候，采取少量多溶剂体系的办法。如果你有 50mg 样品， 建议你以 5mg 为一单位，......阅读全文
单晶培养科研实验知识分享
好多同学/老师一直培养不出单晶，或者周期太长了，希望这个分享能得到一些帮助。单晶培养的方法多种多样，如升华法、共结晶法等。最简单的最实用常用的有1.溶剂缓慢挥发法；2.液相扩散法；3.气相扩散法。99％的单晶是用以上三种方法培养出来的。一、单晶培养要点 1、一般以10--25mg 为佳，如果你只有2
知识分享：细胞传代、培养的方法
实验原理： 将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。 细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时 也将细胞数量扩大，就
知识分享：质粒提取实验步骤
实验原理 现在较常用的质粒提取方法有三种:碱裂解法、煮沸法和去污剂裂解法，前两种方法较为剧烈，适用于较小的质粒（＜15Kb），而去污剂裂解法则比较温合，一般用于分子量较大的质粒（＞15Kb）。 碱裂解法是一种最广泛使用的制备质粒DNA的方法。其原理为：染色体DNA远大于质粒DNA，且
知识分享：WesternBlot实验方法及注意事项
实验原理： WesternBlot印迹方法，又称为免疫印记，是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离，并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物（NC膜或PVDF膜）上，用抗靶蛋白的非标记抗体（一抗）与转印后膜上的靶蛋白进行特异性结合，再与
知识分享：肿瘤相关基因
癌基因（英语：Oncogene，亦称为致癌基因）是细胞遗传物质的一部分, 它们参与细胞从正常生长状态到肿瘤的过程。它们通过诱导或突变被激活。 致癌基因 原癌基因是参与细胞生长、细胞分裂和细胞分化的正常基因。但当其发生突变后，就会变成致癌基因。它们会在诸如放射性物质，化学物
射频知识分享：调试篇
导语射频产品设计，在经历前期的器件选型，原理图绘制，LAYOUT相关阻抗控制等一系列工作后，当第一版样机出来之后，射频指标的调试，也是整个射频产品开发中比较重要的一个环节。射频指标调试，是基于射频产品开发初期，我们在开发方案射频指标理论值估算的基础上，通过调试让实际测试指标更接近我们理论值，从而实现
知识分享：基因定点突变
实验原理 基因定点突变是指通过聚合酶链式反应（PCR）等方法改变目的基因的序列，包括碱基的插入、缺失、点突变等。基因定点突变是基因研究中比较常用的方法，可以短时间内研究目的DNA所表达的目的蛋白的性状及表征。 定点突变需要设计特定的突变引物。引物长度一般为25-45 bp，建议选择3
知识分享：细胞冻存与复苏的实验方案
实验原理： 冻存和复苏的原则：慢冻快融。 当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形
变频串联谐振设备知识分享
串联谐振变压器优点1、所需电源容量大大减小。串联谐振电源是利用谐振电抗器和被试品电容谐振产生高电压和大电流的，在整个系统中，电源只需要提供系统中有功消耗的部分，因此，试验所需的电源功率只有试验容量的1/Q.2、设备的重量和体积大大减少。串联谐振电源中，不但省去了笨重的大功率调压装置和普通的大功率工频
恒温摇床基础知识分享
恒温摇床具有不锈钢万用夹具、数显控温、无极调速和良好的热循环功能，是一种多用途的生化器，是植物、生物、微生物、遗传、病毒、环保、医学等科研，教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备，适用于各大中院校、油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作为生生、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物的振荡
消化炉知识经验点分享
很多人只知道凯氏定氮仪，对消化炉却没有太多的了解，最终出现测定结果不准确、误差等一系列问题。因此在利用专业仪器开展试验前，我们必须熟知仪器本身及配套设备的构造原理及操作注意事项。消化炉也不例外，它是为加速样品消化煮解时间，提高蛋白质测定速度的理想仪器。它还能将消化管内溢出的有害气体，经过抽气
恒温摇床基础知识分享
恒温摇床具有不锈钢万用夹具、数显控温、无极调速和良好的热循环功能，是一种多用途的生化器，是植物、生物、微生物、遗传、病毒、环保、医学等科研，教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备，适用于各大中院校、油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作为生生、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物的振荡培
分享移液器的日常维护保养知识
移液器是生物、药物、化学等行业科研工作者每天都使用的工具，除了正确使用移液器，日常维护保养也十分重要： 1.维护 (1)移液器不用时,应在专用支架上竖直放置。 (2)每天使用前,应检查移液器外表面是否有灰尘和污物,要注意移液器的嘴锥处,只能用70%的酒精溶液清洁。
知识分享：AAV在肺部的应用
腺相关病毒（AAV）属于依赖病毒属，细小病毒亚科，是一类自然缺陷的单链DNA病毒。野生型AAV基因组约4.7kb，含有rep和cap基因以及两端的ITR序列。尽管人类对AAV易感，但临床还并未发现与AAV相关的疾病。根据AAV衣壳蛋白基因的变异，可将AAV分为不同的血清型。不同血清型的AAV具有不同
密度计的小知识分享
1.密度计应满足的技术条件： a.光源的辐射函数（相对辐射分布）s（λ）； b.传感器的相对光谱灵敏度s（λ）r； c.滤光片的光谱透射率τ（λ）； d.测量的几何条件和测量块的大小； e.读数的性和显示的线性； f.被测样本的光谱反射参数； g.定标板的光
知识分享：光遗传学技术
光遗传学（optogenetics）又称光刺激基因工程（optical stimulation plus genetic engineering），是一种通过光学和遗传学技术在活体动物脑内精准控制细胞行为的技术。由于其高度的时空特异性，光遗传技术广泛应用于神经科学领域的研究。 2010
密度计的小知识分享
1.密度计应满足的技术条件： a.光源的辐射函数（相对辐射分布）s（λ）； b.传感器的相对光谱灵敏度s（λ）r； c.滤光片的光谱透射率τ（λ）； d.测量的几何条件和测量块的大小； e.读数的精确性和显示的线性； f.被测样本的光谱反射参数；
德国Fevik菲维科分享冻干机知识
真空冷冻干燥是将含水物质先冻结成固态，然后使其中的水份从固态升华成气态，从而除去水份而保存物质的方法。 一、冻干机系统 1. 控制系统 控制系统有可编程程序控制器、触摸屏、外围继电器、传感器等组成。 2. 制冷系统 制冷系统由制冷压缩机及辅助设施构成，为干燥箱和冷阱
知识分享：变性梯度凝胶电泳
实验原理 DNA 双链分子在全长不断增加温度或用化学变性剂条件处理下，两条链就会开始分开（即解链）。首先解链的区域由解链温度较低的碱基组成。GC碱基对比AT碱基对结合得要牢固，因此GC含量高的区域具有较高的解链温度。同时影响解链温度的因素还有相邻碱基间的吸引力。解链温度低的区域，通常位于端
知识分享：Teton表达调控系统
1992年Goseen等人成功的利用原核基因调控元件构建了四环素（tetracycline,Tet）真核细胞基因调控表达系统。目前，此系统已被广泛应用于基因功能和基因治疗领域的研究。 1、四环素调控表达系统的基本原理 Tet调控表达系统通过诱导药物（如Tet）改变调控蛋白的构
分享移液器的日常维护保养知识
1.维护 (1)移液器不用时,应在支架上竖直放置。 (2)每天使用前,应检查移液器外表面是否有灰尘和污物,要注意移液器的嘴锥处,只能用70%的酒精溶液清洁。 (3)如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物。 (4)根据使用频率,所有的移液器应定期用肥皂水清洗,或用60%的异丙醇消毒,
电源滤波器综合知识分享
在整流电路输出的电压是单向脉动性电压，不能直接给电子电路使用。所以要对输出的电压进行滤波，消除电压中的交流成分，成为直流电后给电子电路使用。在滤波电路中，主要使用对交流电有特殊阻抗特性的器件，如：电容器、电感器。本文对其各种形式的滤波电路进行分析。一、滤波电路种类滤波电路主要有下列几种：电容滤波电路
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真空冷冻干燥是将含水物质先冻结成固态，然后使其中的水份从固态升华成气态，从而除去水份而保存物质的方法。 一、冻干机系统 1. 控制系统 控制系统有可编程程序控制器、触摸屏、外围继电器、传感器等组成。 2. 制冷系统 制冷系统由制冷压缩机及辅助设施构成，为干燥箱和冷阱
知识分享：稳转株的制备
实验原理： 利用哺乳动物系统生产蛋白的方式有两种：瞬时转染和稳转株筛选。通过稳定细胞系构建筛选稳定表达细胞株。针对瞬时转染，外源基因在短时间转录翻译得到的蛋白量较少，能够满足小量蛋白制备，大量生产成本很高。相对于此，稳定转染的是将外源基因整合到细胞自身的基因组上，随着细胞的生长分裂外源基因
知识分享：mRNA的分离和纯化
实验原理 从细胞或组织中得到RNA是一种混合物，其中包括tRNA，rRNA和mRNA，其中RNA为75％～ 85％，tRNA占10％～16％，而mRNA仅占1%～5％，并且mRNA基因序列不同，分子量大小不均一，各基因的表达丰度也不一样。每克细胞可分离出5-10mg RNA。 真核生
知识分享：细胞自噬研究详解
一、自噬简介 1、大自噬（macroautophagy），也就是通常说的自噬（autophagy），是真核细胞蛋白降解的途径之一。自噬可以被描述为细胞质内的成分（细胞器、蛋白等）被双层膜的囊泡包裹，形成自噬体（autophagosome），进而传递到溶酶体进行降解的过程。 详
分享提高细胞培养实验成功率小技巧
细胞培养实验中离不开血清的支持，而血清中的牛血清因性价比高等因素大多实验室使用牛血清来培养细胞。所以为了更好的完成实验选购合适的血清很重要。内毒素在细胞传代增殖过程中，会直接参与细胞凋亡的过程，一定剂量下，会给细胞培养带来很多问题，特别是免疫细胞和干细胞，例如：诱导免疫细胞释放炎症因子，抑制小鼠红细
分享水浴振荡器的基础知识
水浴恒温振荡器采用电磁振荡原理，类似电磁炉原理，是通过电子线路板组成部分产生交变磁场、不锈钢材质容器即切割交变磁力线而产生交变的电流（即涡流），涡流使容器壁铁分子高速无规则运动，分子互相碰撞、摩擦而产生热能，同时由于涡流存在，水分子受电磁力作用，带动玻璃容器内液体运动，达到震荡的效果。 水浴恒
关于工业内窥镜应用领域知识分享
工业内窥镜随着科学技术的不断发展，在各行业应用的频率越来越高，根据技术及应用范围的不同分为电子工业内窥镜、管道内窥镜、工业电子内窥镜等，下面给大家具体讲一讲工业内窥镜的应用领域。 一、发电厂 用于核电站、风力电厂、水力发电厂、火力电厂以及电力建设单位的设备检测, 如对涡轮机、管道、
专家由知网谈如何走出知识分享困境
学者胜诉中国知网，在学术圈如一石激起千层浪。从关注案件本身，到探讨作者、期刊、数据库平台三者的责权利关系，本报对此作了连续报道。在信息爆炸、技术手段越来越发达的今天，知识分享却面临“困境”：高水平学术资源付费过高，能免费的资源质量又过低。对此，多名专家建议，由政府主导建设国家知识资源数据库，解决知识