兔抗人血清抗体的制备和效价测定

实验原理 凡能刺激机体产生抗体,并能与抗体发生特异性结合的物质称为抗原。物质所具有的这种特性称为抗原性(Antigenicity)。当机体受抗原刺激后,在体液中出现的一种能与相应抗原发生反应的球蛋白,称免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)。含有免疫球蛋白的血清称免疫血清。 医学上常见的抗原物质,种类很多,如病原微生物及其代谢产物(毒素),异种动物血清(各种抗毒素,免疫血清的来源),同种血型抗原,同种异体皮肤,器官等组织抗原,自身组织抗原,肿瘤细胞抗原。具有抗原性的各种化学成分有蛋白质、脂蛋白、多糖体、脂多糖、糖蛋白、多肽以及核蛋白等,这些抗原物质均可刺激机体产生抗体或细胞免疫反应。 机体在抗原物质的刺激下产生特异性免疫反应的过程,大体上可分为3个阶段。 1.致敏阶段(加工处理抗原阶段):当颗粒性抗原初次进入人体内时,首先被巨噬细胞吞噬(可溶性抗原可直接被T淋巴细胞吞饮,多......阅读全文

兔抗人血清抗体的制备和效价测定

实验原理 凡能刺激机体产生抗体,并能与抗体发生特异性结合的物质称为抗原。物质所具有的这种特性称为抗原性(Antigenicity)。当机体受抗原刺激后,在体液中出现的一种能与相应抗原发生反应的球蛋白,称免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)。含有免疫球蛋白的血清称免疫血清。 医学上常

免疫血清的制备及效价测定

实验概要本实验制备了抗绵羊红细胞 (SRBC)的免疫血清并对其效价进行了测定。实验原理1.  制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B  细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B  细胞系产生该决定簇的

免疫血清的制备及效价测定

实验概要本实验制备了抗绵羊红细胞 (SRBC)的免疫血清并对其效价进行了测定。实验原理1.  制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B  细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B  细胞系产生该决定簇的

免疫血清的制备及效价测定

制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的抗体,因此用抗原免疫机体获得的免疫血清一般均为多克隆抗体。 制备的免疫血清的质量(特异性、

抗原和免疫血清的制备实验——抗人血清抗体的制备

实验材料家兔试剂、试剂盒羊毛脂石蜡油卡介苗生理盐水仪器、耗材研钵离心机培养箱实验步骤1.  弗氏佐剂的制备将羊毛脂与石蜡油按1:5比例混合,高压灭菌。2.  人血清—弗氏完全的制备将灭菌佐剂一份置研钵中,边研磨边滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液,使成油色水乳剂,研磨要充分,使乳剂滴入冰水中

ELISA测定抗体效价方法

我用的是间接ELISA,以下copy自我的毕业论文:将抗原用包被液稀释至约10 ?g/mL;分别将阳性血清和阴性血清用TBS倍比稀释,稀释梯度从1:200,1:400至1:204800,二抗用的是HRP标记的羊抗兔IgG(1:5000稀释) 。酶标仪测定450nm处各个孔的吸光度(A450),计算阳

什么是IgG抗A效价测定

  IgG抗A-效价测定是检查孕妇血清中有无IgG性质的抗A抗体并滴定其效价,评估ABO-HDN发生的可能性。

抗体效价的定义

抗体效价,用抗体的物理状态及其在体内的滞留时间,以其与抗原反应的多少来表示其免疫效果。抗体效价的高低是衡量血清中抗体水平的一项检测指标,正常人血清中抗体效价一般都小于1:64。抗体效价的检测就是根据大分子颗粒抗原与其相应的抗体相结合,在适量的电解质存在及一定的温度下,经过一定时间可出现肉眼可见的凝集

冷自身抗体特异性鉴定和效价测定

冷自身抗体特异性鉴定和效价测定原理:    有些冷自身抗体与鉴定细胞的反应凝集强度一致,但是其与脐血O细胞、成人Ac 或成人Bc反应也有其特异性如抗H、抗I、抗HI。    抗I——抗I常见于正常人,一般为IgM抗体,4℃反应最佳,效价一般<64.抗体效价高时室温下可检测到。抗I抗体和成人红

什么是抗体效价

一般来说,父母一方是o型血,一方是A型血,新生儿有发生溶血的可能。什么是溶血呢,就是胎儿的血液和母体的血液不融合,孩子生下来后有一定的危险。抗体效价就是在孩子出生之前检查一下,看数值是不是溶血,如果是溶血,可以提前做好一些防护措施。怀孕五个多月,做抗体效价有点早,抗体效价具体什么时候做,要咨询一下医

免疫荧光细胞化学染色方法1

一、标本制作可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法   (一)直接法   1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等),

IgG抗A效价测定的临床意义

  异常结果:IgG抗A效价≥1:64,患儿可能发生ABO-HDN,表现为胎儿水肿和死胎,如流产、早产、死产或出生后数小时内死亡;患儿出现重度贫血、黄疸、核黄疸等症状。  需要检查的人群:夫妇血型不同或母婴血型不同的孕妇。

IgG抗A效价测定的检查过程

  采集被检对象静脉血,取血清标本50微升加入等体积的牛血清白蛋白,37度水浴温育30-60分钟,倍比稀释后依次将稀释血清分别加入标记的为主凝胶抗人球蛋白卡中,在所有孔中加入等量A型0.5%红细胞悬液后37度孵育5分钟,用专用离心机离心5分钟并观察结果。

抗体的效价鉴定-方法

抗体的效价鉴定 不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩

双向免疫扩散法测定抗血清效价

实验方法原理 将抗原和相应抗体分别加入同一凝胶板中的相邻小孔中,使两者互相扩散,当扩散到它们的浓度达当量点时(浓度相当)形成沉淀线。如果抗原-抗体的浓度合适时,沉淀线在两孔的中间。如抗体过量,沉淀线靠近抗原孔。如抗原过量,沉淀线靠近抗体孔。此技术可以测定抗血清的效价。此外,根据沉淀融合的情况,还可以

两种测定抗体效价方法的实验原理和操作步骤

酶联免疫吸附实验法一、实验目的1. 深入了解ELISA法测定抗体效价的原理。2. 掌握ELISA法测定单克隆抗体效价的方法。二、实验原理ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。免疫酶技术是将酶标记在抗体/抗原分子上,形成酶

免疫荧光细胞化学染色方法

免疫荧光细胞化学染色方法 一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 (一)直接法 1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光 抗体或兔抗人 IgG 或 IgA 荧光抗体

抗原和免疫血清制备实验—抗红细胞抗体(溶血素)制备

实验材料家兔试剂、试剂盒红细胞悬液生理盐水阿氏液仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1.  红细胞悬液的制备(1) 采血采取的绵羊血与灭菌的保存液等量混合,置冰箱中,可保存数周,也可用抗凝方法(2) 洗涤血球先将抗凝血液离心沉淀(2000 cpm×5分钟)吸去上清。加入2~3倍的生理盐水并用毛细滴管反复吹

免疫荧光细胞化学染色方法

一、标本制作  可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。  二、荧光抗体染色方法  (一)直接法  1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等),在室温或37℃染色30

血型抗体效价(ABO和Rh)操作规程

以稀释倍数最高而又显凝集者为凝集效价。方法:1、取小试管20支,分两排放置于试管架上,前排标明A,后排标明B,再浆各排由左而右注明号码。2、各管均加生理盐水0.2ml。3、吸取A型被测血清0.2ml,加入A排第1管中,混匀,吸出0.2ml加入第2管直到第10管,从第10管中吸出0.2ml弃掉。用同样

血型抗体效价(ABO和Rh)操作规程

以稀释倍数最高而又显凝集者为凝集效价。方法:1、取小试管20支,分两排放置于试管架上,前排标明A,后排标明B,再浆各排由左而右注明号码。2、各管均加生理盐水0.2ml。3、吸取A型被测血清0.2ml,加入A排第1管中,混匀,吸出0.2ml加入第2管直到第10管,从第10管中吸出0.2ml弃掉。用同样

临床化学检查方法介绍IgG抗A效价测定

IgG抗A-效价测定介绍:  IgG抗A-效价测定是检查孕妇血清中有无IgG性质的抗A抗体并滴定其效价,评估ABO-HDN发生的可能性。IgG抗A-效价测定正常值:  IgG抗A效价

IgG抗A效价检查作用

IgG抗A-效价测定是检查孕妇血清中有无IgG性质的抗A抗体并滴定其效价,评估ABO-HDN发生的可能性。异常结果:IgG抗A效价≥1:64,患儿可能发生ABO-HDN,表现为胎儿水肿和死胎,如流产、早产、死产或出生后数小时内死亡;患儿出现重度贫血、黄疸、核黄疸等症状。

igg抗a效价512怎么降低

一旦igg抗a效价512应该及时降下来,那么igg抗a效价512怎么降低呢?igg抗a效价512需要采取必要治疗措施设法降低孕妇体内的IgG血清抗体,如采用口服中药茵陈汤,静脉推注维生素C和50%葡萄糖,静脉注射免疫球蛋白,必要时进行血浆置换或宫内输血,以控制并降低孕妇体内的IgG抗A效价,减少胎儿

血液的化学检验项目IgG抗A效价测定介绍

IgG抗A-效价测定介绍:  IgG抗A-效价测定是检查孕妇血清中有无IgG性质的抗A抗体并滴定其效价,评估ABO-HDN发生的可能性。IgG抗A-效价测定正常值:  IgG抗A效价

血液的化学检验项目IgG抗B效价测定

IgG抗B-效价测定介绍:  IgG抗B-效价测定是检查孕妇血清中有无IgG性质的抗B抗体并滴定其效价,评估ABO-HDN发生的可能性。IgG抗B-效价测定正常值:  IgG抗B效价

ELISA技术测定单克隆抗体效价方法

一、实验目的1.深入了解elisa 法测定抗体效价的原理。2.掌握ELISA 法测定单克隆抗体效价的方法。二、实验原理ELISA 是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。免疫酶技术是将酶标记在抗体/抗原分子上,形成酶标抗体/酶标抗原

ELISA技术测定单克隆抗体效价方法

一、实验目的1.深入了解elisa 法测定抗体效价的原理。2.掌握ELISA 法测定单克隆抗体效价的方法。二、实验原理ELISA 是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。免疫酶技术是将酶标记在抗体/抗原分子上,形成酶标抗体/

尿激酶的效价测定

1 酶活力(1)试剂 牛纤维蛋白原溶液取牛纤维蛋白原,加巴比妥一氯化钠缓冲液(pH 7.8)制成每1ml中含6.67mg可凝结蛋白的溶液。牛凝血酶溶液 取牛凝血酶,加巴比妥一氯化钠缓冲液(pH 7.8)制成每1ml中含6.0单位的溶液。牛纤维蛋白溶酶原溶液 取牛纤维蛋白溶酶原,加三羟甲基氨基甲烷缓冲

噬菌体效价的测定

实验方法原理 噬菌体的效价就是 1 ml 培养液中所含活噬菌体的数量。效价测定的方法,一般应用双层琼脂平板法。由于在含有特异宿主细菌的琼脂平板上,噬菌体产生肉眼可见的噬菌斑,因此,能进行噬菌体的计数,但因噬菌斑计数方法其实际效率难以接近 100%(—般偏低,因为有少数活噬菌体可能未引起感