倚天屠龙,谁与争锋——且看基因敲除与RNA干扰的关系

研究历史 20世纪80年代初,胚胎干细胞分离和体外培养的成功为基因敲除奠定了技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组(homology recombination, HR)的存在为基因敲除奠定了理论基础[2]。为了编辑基因,传统的靶向特定等位基因的同源重组技术被使用,但是,这个方法在当年来说,存在效率低、劳动成本高的缺点,严重制约了基础研究和临床应用,这就需要科学家探索更为简洁高效的基因编辑技术。 为了实现利用简单的方法使特定基因失去功能,科学家研发出了RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,希望更易于研究哺乳动物细胞的基因功能,它具有操作简单、效果明显等优点。但RNAi不能作用于所有基因和某些细胞类型(如神经元),而且存在位置效应、临时性和不完全敲除的缺点[3]。 随着各种基因编辑技术的进步,如:锌指核酸酶技术(zinc finger nuclease,ZFN)[4]、......阅读全文

倚天屠龙,谁与争锋——且看基因敲除与RNA干扰的关系

  研究历史   20世纪80年代初,胚胎干细胞分离和体外培养的成功为基因敲除奠定了技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组(homology recombination, HR)的存在为基因敲除奠定了理论基础[2]。为了编辑基因,传统的靶向特定等位基因的同源重组技术被使用,但是,这

基因敲除与RNA干扰的关系

20世纪80年代初,胚胎干细胞分离和体外培养的成功为基因敲除奠定了技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组(homology recombination, HR)的存在为基因敲除奠定了理论基础[2]。为了编辑基因,传统的靶向特定等位基因的同源重组技术被使用,但是,这个方法在当年来说,存

基因敲除,rna干扰,基因沉默有什么关系

基因敲除一般指永久的、不可逆转的敲除/失活靶基因,目前其中一种热门的,常见的基因敲除方法是CRISPR/Cas9,利用gRNA靶向靶基因并指导cas9切割基因双链,形成移码突变或片段敲除来完成基因敲除。基因沉默与基因敲除不同的地方在于,沉默可以是暂时性的、可逆转的失活基因/抑制基因表达,基因可以是存

扁鹊与希波克拉底之争再度来袭,谁与争锋

  在业界内外我们总会听到各种关于中医与西医的分歧,有人说中医缺少现代科学的验证,它是一门膜拜古老的理论,让你糊里糊涂。西医是持续发展、不断纠正、不断更新的科学,所以它冰冷。可所谓众说纷纭、各执一词,难以协调统一。  今天生物谷发起“中医鼻祖扁鹊vs西医鼻祖希波克拉底“话题之争看看大家对于它们的看法

药物作用靶点筛选与基因敲除技术的关系

  2018年一对双胞胎婴儿的CCR5基因敲除的事件在社会上引起了轩然大波,抛开这次事件而言,作为一项生物研究技术,基因敲除在药物研发领域应用也很广泛,今天我们来看一下它在药物作用靶点筛选上的作用吧!   通过药物作用的靶点来设计开发创新药物是目前创新药制剂开发的一条重要线索,每年都会有作用于新靶

药物作用靶点筛选与基因敲除技术的关系

  2018年一对双胞胎婴儿的CCR5基因敲除的事件在社会上引起了轩然大波,抛开这次事件而言,作为一项生物研究技术,基因敲除在药物研发领域应用也很广泛,今天我们来看一下它在药物作用靶点筛选上的作用吧!   通过药物作用的靶点来设计开发创新药物是目前创新药制剂开发的一条重要线索,每年都会有作用于新靶

分子倚天剑,免疫屠龙刀,孰强孰弱?

分子和免疫,IVD的两大法宝,孰强孰弱?而ctDNA作为分子检测用于肿瘤的早筛,根据一些研究表明,比标志物有更高的灵敏度和特异性。但是ctDNA阳性,是不是可以确定肿瘤细胞生长的位置?这一点答案不清晰。京东上的泛癌种筛查试剂,思康宁。价格不菲,9000元,测一次,一个苹果手机没了。假设检测阳性,但是

2020年疫苗Top5,辉瑞VS赛诺菲谁与争锋?

  尽管被誉为“医药界诺贝尔奖”之称的“沛儿”(Prevenar)疫苗在2014年遇到了一些挫折,辉瑞7价肺炎球菌疫苗(商品名:沛儿)在今年早些时候宣布退出中国,而新产品13价肺炎球菌疫苗尚未获批,辉瑞决定暂停其在华疫苗业务的商务运营。   然而,疫苗单品销售方面,辉瑞的沛儿13(Prevenar

“金戈”出马-谁与争锋?广药“伟哥”只待获批

  自全球首款治疗和改善男性ED(勃起功能障碍)的万艾可 (俗称伟哥),在中国的ZL保护到期以来,国内十多家药企等待抢滩该市场。7月30日上午,广药集团董事长李楚源通过微博透露了白云山版“伟哥”的名字。  广药集团相关人士回应 《每日经济新闻》记者称,白云山版“伟哥”名为“金戈”,今年6月已完成制剂

13位大咖厦门共论质谱,谁与争锋?

  第三届全国质谱分析学术报告会”在厦门翔鹭国际大酒店举办。    活动现场  分析测试百科网讯 2017年12月9日,由中国化学会质谱分析专业委员会主办,厦门大学承办,中国质谱学会和中国分析测试协会协办的“第三届全国质谱分析学术报告会”在厦门翔鹭国际大酒店举办(相关报道:千人质谱会再次来袭 看“高

RNA干扰的发现与研究

RNAi是在研究秀丽新小杆线虫(C. elegans)反义RNA(antisense RNA)的过程中发现的,由dsRNA介导的同源RNA降解过程。1995年,Guo等发现注射正义RNA(sense RNA)和反义RNA均能有效并特异性地抑制秀丽新小杆线虫par-1基因的表达,该结果不能使用反义RN

基因敲除的原理与方法

基因敲除可以说是基因组 学、细胞分离培养以及转基因技术的组合。那么基因敲除的原理是什么呢? 基因敲除的方法有哪些呢?在此,做个小结,以供大家学习。一.概述:基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子 生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用D

孟山都CTO谈基因编辑、RNA干扰与行业并购影响

  Fraley对两公司的合并持乐观态度,并认为这是一次积极健康的合并。通过合并,两者可扩大规模,同时得到更多研发资金,继续保持育种优势。  记者:关于基因编辑的问题。之前有报道说孟山都已经在谈基因编辑的ZL问题,很多人猜测孟山都很可能已经有基因编辑的产品在研发,或者是将要推出来,能不能介绍一下基因

RNA干扰(RNAi)实验原理与方法(3)

3.DEAE-葡聚糖和polybrene带正电的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚体复合物和带负电的DNA分子使得DNA可以结合在细胞表面。通过使用DMSO或甘油获得的渗透休克将DNA复合体导入。两种试剂都已成功用于转染。DEAE-葡聚糖仅限于瞬时转染。4.机械法转染技术也包括使用机械的方法,

RNA干扰(RNAi)实验原理与方法(2)

dsRNA消化法的主要优点在于可以跳过检测和筛选有效siRNA序列的步骤,为研究人员节省时间和金钱(注意:通常用RNAse III通常比用Dicer要便宜)。不过这种方法的缺点也很明显,就是有可能引发非特异的基因沉默,特别是同源或者是密切相关的基因。现在多数的研究显示这种情况通常不会造成影响。最

RNA干扰(RNAi)实验原理与方法(1)

近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(RNAi)。一、R

网红”抗癌药赛道谁与争锋?第5款国产PD1单抗

  8月5日,NMPA官网显示,康方生物与正大天晴共同开发的PD-1单抗药物派安普利单抗已获国家药监局批准上市,用于治疗至少经过二线系统化疗复发或难治性经典型霍奇金淋巴瘤(r/r cHL)患者。  派安普利由康方生物与中国生物制药旗下正大天晴所设立的合营企业共同开发及商业化,采用免疫球蛋白G1亚型且

癌基因与原癌基因的关系

一般来说,癌基因是功能异常的原癌基因。原癌基因转变为致癌基因主要有两种机制。其一是原癌基因的表达水平由于基因重复或染色体的重排而上升,细胞中原癌基因编码的蛋白超过了正常水平、引发癌变。其二是原癌基因片段上发生了使该基因编码的蛋白质功能出现异常的突变,使原癌基因功能异常,进而引发癌变。导致原癌基因转化

RNAi——双链RNA引起的基因敲除(2)

在构建双链RNA的表达载体时,使用RNA多聚酶Ⅲ来指导RNA的合成。这是因为RNA多聚酶Ⅲ有明确的启始和终止序列,而且合成出的RNA不会带有polyA尾。当RNA多聚酶Ⅲ遇到连续5个胸腺嘧啶时,它指导的转录就会终止,并且转录产物在第二个尿嘧啶处被切下来。U6启动子能被RNA多聚酶Ⅲ识别, 合

RNAi——双链RNA引起的基因敲除(1)

1995年,康奈尔大学的Su Guo博士用反义RNA阻断线虫基因表达的试验中发现,反义和正义RNA都阻断了基因的表达,他们对这个结果百思不得其解。直到1998年, Andrew Fire的研究证明,在正义RNA也阻断了基因表达的试验中,真正起作用的是双链RNA[1]。这些双链RNA是体外

基因与心肌的复杂关系

遗传性心肌病是一类致病机制复杂的疾病,目前研究已经发现了导致各类遗传性心肌病的多个基因位点及相关发病机制,这些机制的阐释对心肌病的治疗提供方向。遗传性心肌病是各个年龄阶段心脏病的主要原因之一,按照心肌的形态和功能变化可以粗略分为肥厚性心肌病、扩张性心肌病、限制性心肌病、致心律失常型   右室

寨卡病毒基因组RNA结构与感染性的关系

        2018年11月21日,清华大学生命科学学院张强锋课题组、药学院谭旭课题组在《细胞宿主与微生物》(Cell Host & Mircobe)期刊在线发表题为《寨卡病毒基因组RNA结构的综合分析揭示了病毒感染性的关键决定因素》(Integrative Analysis of

过表达质粒与RNA干扰质粒有什么不同

本质上是一样的,都是让外源性的基因序列在细胞内得到表达。但是由于目的不同,技术细节上也会有不同。过表达的质粒如果是一过性表达,不需要整合到细胞染色体组,只要有强的启动子就可以了。稳定表达的,需要有筛选基因的表达来选出整合的细胞。而干扰质粒一般都需要是稳定的表达,现在都是通过慢病毒来实现,质粒基本都弃

微流控芯片与基因的关系

  基因测序主要是指采用先进的方法对高等动物、低等动物核酸序列进行系统化、规范化、快速化分析,此过程需要的工程量尤为巨大。目前,对微流控芯片实验室主要采用96根阵列毛细管电泳对基因序列进行系统化测定,虽在一定程度上加快了人类基因组项目,但是还不能实现高效、灵敏、快速、价廉、自动、准确等基本特点,而微

RNA干扰(转录后基因沉默)实验

RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。目前主要用于(1)特异性剔除或关闭特定基因的表达 (2)探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的治疗 (3)使

RNA干扰(转录后基因沉默)实验

RNA干扰             实验方法原理 1. 病毒基因、人工转入基因、转座子等外源性基因随机整合到宿主细胞基因组内,并利用宿主细胞进行转录时,常产生一些dsR

个体发育中质基因与核基因的关系

1、细胞质基因在个体发育中的作用是必须的,不可缺少的。2、细胞核基因在个体发育中的起主导作用。3、核质互作辨证统一的关系生物遗传性状中,有两个主要的遗传系统—核遗传和质遗传,它们除了有相对的独立性,核基因起主导作用外,但又密切的联系,互相协调,在遗传上综合地发挥作用。

微流控芯片与基因诊断的关系

一般而言,基因缺失主要是指高等动物、低等动物基因由于受到体内外各种因素的干扰促使机体部分基因区域缺如,由此将会影响高等动物、低等动物的部分结构和功能。目前,微流控芯片可以将高等动物、低等动物基因的大片段缺失区域进行确定,例如X染色体连锁的隐性遗传病抗肌萎缩蛋白基因的缺失,使用微流控芯片可以进行检测分

艾滋病与遗传基因的关系

HIV的遗传物质是RNA。在讲述“DNA是主要的遗传物质”时,可结合HIV对遗传物质进行分类。在绝大多数生物,如全部的植物、动物、细菌和绝大多数病毒,都含有DNA,以DNA作为遗传物质。DNA是主要的遗传物质,HIV病毒不含DNA,只含有RNA(HIV含有两条单链的RNA),在这种情况下,HIV的遗

植物形态建成与基因表达调控的关系

植物形态建成即植物的个体发育,指植物生命所经历的全过程。从受精卵的最初分裂开始,经过种子萌发、营养体形成、生殖体形成、开花、传粉和受精、结实等阶段,直至衰老和死亡。但一般以种子萌发为开始阶段。构成植物个体的细胞和器官也有其自身发端、形成和衰老的发育过程。发育包括生长和分化。生长指植物细胞、组织和器官