Antpedia LOGO WIKI资讯

转基因植株的选择实验——转基因植物的分析

实验材料叶片试剂、试剂盒液氮DNA 纯化试剂盒bar 基因引物吐温PPT仪器、耗材PCR 分析塑料盆实验步骤一、PCR 分析1. 当植株长到合适大小时(即 3 ~4 张叶片),取约 2 cm 长的叶片,立即放于液氮中,抽提基因组 DNA。2. 在液氮中将叶片磨成粉末状,并使用 Wizard 基因组 DNA 纯化试剂盒提取基因组 DNA。3. 为了确定是否为转基因植株,利用 bar 基因引物 1 和引物 2 对 DNA 做 PCR 分析,退火温度为 57℃。4. 将 PCR 阳性植株移栽到直径为 13 cm 的塑料盆中,并继续在转基因封闭温室中生长。二、除草剂叶片涂抹检测1. 用 0.1% 吐温将除草剂母液(如 Challenge) 稀释成两种浓度,其活性成分 PPT 浓度分别为 2.0 g/L 和 0.2 g/L。2. 每个待测植株,尽可能在不同分蘖上选择三张大小相近、生长健壮的叶片,避免取旗叶。立即在所选叶片植株的......阅读全文

转基因植物及其安全性研究进展

  摘要:介绍了目前常用的植物转基因方法,并简要就转基因植物的生态安全性、35S启动子安全性、栽体骨架序列安全性、抗生素抗性标记基因安全性和食品安全性五个方面进行了综述。   21世纪,生命科学成为了自然科学中的主导科学。生物技术的核心是基因工程技术,新的技术带来了巨大的科学发展及经济效益,同时

转基因植物及其安全性研究进展

  摘要:介绍了目前常用的植物转基因方法,并简要就转基因植物的生态安全性、35S启动子安全性、栽体骨架序列安全性、抗生素抗性标记基因安全性和食品安全性五个方面进行了综述。   21世纪,生命科学成为了自然科学中的主导科学。生物技术的核心是基因工程技术,新的技术带来了巨大的科学发展及经济效益,同时

基因插入位点和模式实验

实验材料dCTP                                        

基因插入位点和模式实验

实验材料dCTP试剂、试剂盒乙醇次氯酸钠β-葡萄糖醛酸酶基因活性测定液溴化乙锭仪器、耗材培养室MS 培养基实验步骤一、转基因插入位点的数目第一代( T0)转基因植株外源基因的插入位点数目,一般都是通过遗传方法进行鉴定。虽然遗传分析可以在任何世代进行,但是一般选择转基因植株自交,或与野生型测交后得到的

燕麦转基因及其在提高渗透胁迫耐受中的应用实验

实验材料:燕麦试剂、试剂盒:乙醇                                      

燕麦转基因及其在提高渗透胁迫耐受中的应用实验

实验材料燕麦试剂、试剂盒乙醇蒸馏水Clorox 漂白剂仪器、耗材培养皿MSI 培养基实验步骤1. 芽尖培养( 1 ) 成熟的燕麦(Ogle、Pacer 和 Prairie ) 种子用于芽尖培养。( 2 ) 徒手去除种子的外稃和内稃。( 3 ) 种子用 70% 乙醇(Sigma) 浸泡 5 min 进

基因插入位点和模式实验(一)

实验材料 dCTP试剂、试剂盒 乙醇次氯酸钠β-葡萄糖醛酸酶基因活性测定液溴化乙锭仪器、耗材 培养室MS 培养基实验步骤 一、转基因插入位点的数目第一代( T0)转基因植株外源基因的插入位点数目,一般都是通过遗传方法进行鉴定。虽然遗传分析可以在任何世代进行,但是一般选择转基因植株自交,或与野

农杆菌瞬时表达CRISPR编辑基因和快速筛选突变植株新方法

  最近,美国康涅狄格大学和南京农业大学李义教授团队在Horticulture Research发表了题为“A method for the production and expedient screening of CRISPR/Cas9-mediated non-transgenic mutan

农杆菌瞬时表达CRISPR编辑基因和快速筛选突变植株新方法

  最近,美国康涅狄格大学和南京农业大学李义教授团队在Horticulture Research发表了题为“A method for the production and expedient screening of CRISPR/Cas9-mediated non-transgenic mutan

农杆菌瞬时表达CRISPR编辑基因和快速筛选突变植株新方法

  最近,美国康涅狄格大学和南京农业大学李义教授团队在Horticulture Research发表了题为“A method for the production and expedient screening of CRISPR/Cas9-mediated non-transgenic mutan

遗传修饰(转基因)风险评估(二)

3. 慎重向环境释放未经事先批准的转基因植物是不能够释放到环境中去的。在欧洲,2001/18 号欧盟指令( 见注 7 ) 专门规定了慎重向环境中释放转基因植物。该指令涵盖了两种类型的环境释放: 实验释放 ( B 部分)和投放市场的商业释放( C 部分)( 见注 8) 。对于每个授权的 B 释

分子标记

内容:一、遗传标记 二、DNA分子标记 三、染色体原位杂交 四、DNA分子标记的应用 长期以来,植物育种中选择都是基于植株的表型性状进行的,当性状的遗传基础较为简单或即使较为复杂但表现加性基因遗传效应时,表型选择是有效的。但水稻的许多重要农艺性状为数量性状,如

如何选择BTX转基因仪(电转仪)?(一)

1、确定目标对象:也就是你所有转的目的物是什么东西?     细胞系和细胞类型     细胞类型包括人类、哺乳动物、细菌、植物、藻类、霉菌、寄生虫等     细胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyce

如何确定转基因拷贝数

鉴定转基因植物的第一步就是要确定被转基因已经稳定的整合到了染色体上。第二步任务就是评估有多少个转基因拷贝,以及每个转基因的表达水平如何。一般经过上游表达载体的设计构建以及下游转化体系的建立、转化品系的筛选鉴定等一系列步骤后,即获得 T 0 代转基因植物。在转化过程中,外源 DNA 随机插入植物

加快光保护机制反而限制了拟南芥的生物量积累

德国慕尼黑大学的科研人员,通过Imaging-PAM叶绿素荧光成像系统,阐释了植物光保护机制与生物量积累之间深刻而复杂的关系。研究表明,加快光保护机制反而限制了拟南芥在波动光下的生物量积累,未能重现该策略之前在烟草上的成功。文章认为,改变光保护对植物生产性能(包括产量)的影响需要在其他(模式)物种中

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基因片段...

实验材料核苷酸                                         &n

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基...(一)

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基因片段实验实验材料 核苷酸试剂、试剂盒 冰水8-羟基喹啉秋水仙素固定剂酶解缓冲液仪器、耗材 载玻片玻璃盖玻片解剖针及镊子实验步骤 原位杂交的基本操作方法(图 14 .2 ) 演化自 Southern 杂交:标底是玻片上的染色

植物RAPD分析技术

RAPD(Randomly Amplified Polymorphic DNA),意为随机扩增多态性DNA,是利用PCR技术进行随机扩增,把扩增的DNA片段进行琼脂糖凝胶电泳,根据DNA条带的多态性来反应模板DNA序列上的多态性。RAPD同AFLP、SSR等分子标记一样都基于PCR扩增,只

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合转基因片段实验

实验材料核苷酸试剂、试剂盒冰水8-羟基喹啉秋水仙素固定剂酶解缓冲液仪器、耗材载玻片玻璃盖玻片解剖针及镊子实验步骤原位杂交的基本操作方法(图 14 .2 ) 演化自 Southern 杂交:标底是玻片上的染色体和细胞核,探针是带标记的待测 DNA 序列 [ 本书中即是转基因和对照,图 14.3(a)

基因枪法转化小麦实验——轰击后未成熟盾片培养

实验材料幼胚盾片试剂、试剂盒新霉素磷酸转移酶草胺膦乙酰转移酶基因仪器、耗材基因枪诱导培养基分化培养基实验步骤1. 诱导愈伤( 1 ) 基因枪轰击后,将盾片分散转移,每个重复分到 2~3 个含诱导培养基(MS9%  0.5 Dag) 的平皿中,大约 10 个盾片一皿(见注 48)。( 2 )

农杆菌介导的大麦转化方法实验

实验材料 植物凝胶pBract 质粒pSoup 质粒试剂、试剂盒 利福平卡那霉素仪器、耗材 MG L 培养基实验步骤 1. 组织培养基的准备提前准备好所需浓度 2 倍的植物凝胶,高压灭菌(见注 3 ) 。所有的组织培养基都要过滤灭菌,因此除了无菌的储备液,其他培养基

高校实验废弃物分类与安全处置探讨

随着高校办学规模的不断扩大,各类实验室教学、科研任务日趋繁重,实验室废弃物如不及时、有效、安全处置,必将对实验室安全造成较大的隐患,更可能造成对人员、环境的重大威胁,本文对实验室废弃物的分类、危害及安全处置进行了探讨。  引言   高校实验室多为相对独立的单位

植物RAPD(随机扩增多态性DNA)分析技术

RAPD(Randomly Amplified Polymorphic DNA),意为随机扩增多态性DNA,是利用PCR技术进行随机扩增,把扩增的DNA片段进行琼脂糖凝胶电泳,根据DNA条带的多态性来反应模板DNA序列上的多态性。RAPD同AFLP、SSR等分子标记一样都基于PCR扩增,只是RA

农杆菌介导的大麦转化方法实验

实验材料:植物凝胶                                        

农杆菌介导的大麦转化方法实验

实验材料植物凝胶pBract 质粒pSoup 质粒试剂、试剂盒利福平卡那霉素仪器、耗材MG L 培养基实验步骤1. 组织培养基的准备提前准备好所需浓度 2 倍的植物凝胶,高压灭菌(见注 3 ) 。所有的组织培养基都要过滤灭菌,因此除了无菌的储备液,其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀,调到合适的

遗传发育所等作物驯化基因平行选择研究取得进展

  作物驯化是农业发展中最重要的事件之一。作物驯化过程中,一些重要农艺性状表现出趋同驯化的特征,这些特征综合在一起被称为“驯化综合征”。控制这些性状的基因是否在不同物种驯化中受到平行选择一直是进化研究中的重要科学问题。迄今为止,同一基因在不同科作物驯化中受到平行选择仍未见报道。种子休眠减弱是一个典型

2017年5月CRISPR/Cas亮点盘点

  基因组编辑技术CRISPR/Cas9被《科学》杂志列为2013年年度十大科技进展之一,受到人们的高度重视。CRISPR是规律间隔性成簇短回文重复序列的简称,Cas是CRISPR相关蛋白的简称。CRISPR/Cas最初是在细菌体内发现的,是细菌用来识别和摧毁抗噬菌体和其他病原体入侵的防御系统。  

棉花耐盐相关基因 GhVP 的表达及功能分析

土壤盐渍化是世界范围内限制农作物产量和品质的重大问题。棉花是改良盐碱地的先锋作物。培育棉花耐盐品种,开发利用大面积盐碱地是棉花种植的必然趋势,通过分子生物学手段挖掘棉花耐盐相关基因,创新棉花种质资源,对棉花耐盐性研究尤为重要。系统进化分析表明 GhVP 与盐生植物盐爪爪、灰绿藜的亲缘关系最近,进一步

棉花耐盐相关基因 GhVP 的表达及功能分析

土壤盐渍化是世界范围内限制农作物产量和品质的重大问题。棉花是改良盐碱地的先锋作物。培育棉花耐盐品种,开发利用大面积盐碱地是棉花种植的必然趋势,通过分子生物学手段挖掘棉花耐盐相关基因,创新棉花种质资源,对棉花耐盐性研究尤为重要。系统进化分析表明 GhVP 与盐生植物盐爪爪、灰绿藜的亲缘关系最近,进一步

植物基因转化常用方法-4

1.2 其它的基因附加工程在水稻、棉花、马铃薯、番茄和其它作物上也进行了δ-内毒素工程,获得昆虫抗性也不仅仅是指有着一种方法。蛋白酶抑制剂也是较好的选择,它可以一只昆虫肠道内的蛋白酶活性,阻止或减缓害虫生长,许多植物能产生蛋白酶抑制剂,如豇豆和common bean, 他们的基因