基因枪法转化小麦实验——使用PDS1000／He基因枪轰击
实验材料金粉试剂、试剂盒乙醇消毒液实验步骤注意：由于基因枪通过高压使粒子加速到极高的速度，故操作基因枪时应采取适当的安全措施并且佩戴安全眼镜。在任何使用基因枪转化的实验中，必须设置对照检测分化和选择效率（见注 40) 。( 1 ) 根据 PDS-1000/He (见图 4.2 ) 基因枪操作指南操作，将 DNA 包埋的金粉 ( 见第 3.2 节步骤 2 ) 转到组织中。下面的参数是按照标准设置的（见注 41) 。距离 2.5 cm（破裂盘到载体膜之间距离），阻挡板孔径 0.8 cm （载体膜到终止屏之间的距离），目标距离 5.5 cm（终止屏到被轰击样品平板距离），真空度 91.4~94.8 kPa，真空流速 5.0，排气流量 4.5 [ 8]。( 2 ) 用 90% 乙醇对基因枪表面及样品室进行消毒，使乙醇能够完全蒸发。( 3 ) 用无水乙醇浸没载体膜及其固定器、终止屏和破裂盘。放置在超净台使乙醇完全挥......阅读全文
基因枪法转化小麦实验——使用－PDS1000/He－基因枪轰击
实验材料金粉试剂、试剂盒乙醇消毒液实验步骤注意：由于基因枪通过高压使粒子加速到极高的速度，故操作基因枪时应采取适当的安全措施并且佩戴安全眼镜。在任何使用基因枪转化的实验中，必须设置对照检测分化和选择效率（见注 40) 。( 1 ) 根据 PDS-1000/He (见图 4.2 ) 基因枪操作指南操
基因枪法转化小麦实验
实验材料幼胚盾片 试剂、试剂盒乙醇 漂白消毒剂
基因枪法转化小麦实验（二）
实验材料 BIO-RAD 亚微米金粉试剂、试剂盒 无水乙醇TE 缓冲液亚精胺仪器、耗材 离心管实验步骤 1. 准备金粉颗粒( 1 ) 称取 20 m BIO-RAD 亚微米金粉（0.6 μm) 至 1.5 ml 离心管中，加入 1 ml 无水乙醇。超声波处理 2 min，短暂离心 3s，然后弃上清。
基因枪法转化小麦实验（一）
实验材料 幼胚盾片试剂、试剂盒 乙醇漂白消毒剂仪器、耗材 诱导培养基实验步骤 下面介绍的是经过优化的针对幼胚盾片转化的方法，幼穗可以代替幼胚盾片使用。对某些特定的品种，幼穗转化比幼胚盾片转化更有效，如普通小麦品种 T.aestivum vars. Baldus 和 Brigadier，以及其他小
基因枪法转化小麦实验——轰击后未成熟盾片培养
实验材料幼胚盾片试剂、试剂盒新霉素磷酸转移酶草胺膦乙酰转移酶基因仪器、耗材基因枪诱导培养基分化培养基实验步骤1. 诱导愈伤( 1 ) 基因枪轰击后，将盾片分散转移，每个重复分到 2~3 个含诱导培养基（MS9% 0.5 Dag) 的平皿中，大约 10 个盾片一皿（见注 48)。( 2 ) 用封口膜
基因枪法转化小麦实验——准备供体材料
实验材料幼胚盾片试剂、试剂盒乙醇漂白消毒剂仪器、耗材诱导培养基实验步骤下面介绍的是经过优化的针对幼胚盾片转化的方法，幼穗可以代替幼胚盾片使用。对某些特定的品种，幼穗转化比幼胚盾片转化更有效，如普通小麦品种 T.aestivum vars. Baldus 和 Brigadier，以及其他小麦亚族 Tr
基因枪法转化小麦实验——DNA包裹金粉颗粒
实验材料BIO-RAD 亚微米金粉试剂、试剂盒无水乙醇TE 缓冲液亚精胺仪器、耗材离心管实验步骤1. 准备金粉颗粒( 1 ) 称取 20 m BIO-RAD 亚微米金粉（0.6 μm) 至 1.5 ml 离心管中，加入 1 ml 无水乙醇。超声波处理 2 min，短暂离心 3s，然后弃上清。重复用乙
基因枪法转化大麦实验
实验材料麦穗试剂、试剂盒植物凝胶乙醇次氯酸钠蒸馏水亚精胺仪器、耗材EP 管移液枪实验步骤1. 组织培养基的准备( 1 ) 首先准备所需浓度 2 倍的植物凝胶，高压灭菌（见注 2 ) 。( 2 ) 所有的组织培养基都要过滤灭菌，因此除了无菌的储备液，其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀，调到合适
基因枪法转化大麦实验
实验材料麦穗 试剂、试剂盒植物凝胶 乙醇
基因枪法转化大麦实验（一）
实验材料 麦穗试剂、试剂盒 植物凝胶乙醇次氯酸钠蒸馏水亚精胺仪器、耗材 EP 管移液枪实验步骤 1. 组织培养基的准备( 1 ) 首先准备所需浓度 2 倍的植物凝胶，高压灭菌（见注 2 ) 。( 2 ) 所有的组织培养基都要过滤灭菌，因此除了无菌的储备液，其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀，
基因枪法转化大麦实验（二）
4. 粒子轰击幼胚(1) 幼胚渗透处理轰击前，取分离 1 天后的幼胚，放在高渗培养基中处理 4 h。每皿 20~30 枚幼胚，置于培养皿中心 1.6 cm2 范围内，盾片朝上。胚可以放得紧密一些，但相互之间不要碰到。轰击之后幼胚继续高渗处理 16 h。(2) 基因枪准备① 基因枪所有组件和内部的枪体
基因枪法介绍
基因枪法，又称粒子轰击(particle bombardment)，高速粒子喷射技术(High-velocity particle microprojection)或基因枪轰击技术(gene gun bombardment)，是由美国Cornell大学生物化学系John.C.Sanford等于198
什么是基因枪法？
基因枪法，又叫粒子轰击细胞法或微弹技术。基因枪的作用是用压缩气体(氦或氮等) 动力产生一种冷的气体冲击波进入轰击室(因此可免遭由“热”气体冲击波引起的细胞损伤)，把粘有DNA 的细微金粉打向细胞，穿过细胞壁、细胞膜、细胞质等层层构造到达细胞核，完成基因转移。只有很少部分的细胞符合这样的要求，大多数会
基因枪法的作用
基因枪法，又叫粒子轰击细胞法或微弹技术。基因枪的作用是用压缩气体(氦或氮等) 动力产生一种冷的气体冲击波进入轰击室(因此可免遭由“热”气体冲击波引起的细胞损伤)，把粘有DNA 的细微金粉打向细胞，穿过细胞壁、细胞膜、细胞质等层层构造到达细胞核，完成基因转移。只有很少部分的细胞符合这样的要求，大多数会
基因枪（颗粒轰击法）相比传统的转化优势？
简单快速功能灵活，各类细胞类型通用只需要少量的DNA和细胞能进行多质粒共同导入能输送大片段DNA没有无光的基因或蛋白被转导
转基因技术基因枪法简介
利用火药爆炸或高压气体加速（这一加速设备被称为基因枪），将包裹了带目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中，然后通过细胞和组织培养技术，再生出植株，选出其中转基因阳性植株即为转基因植株。与农杆菌转化相比，基因枪法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的限制。而且其载体质粒的构建
细胞共定位
实验概要本实验子在构建了中间载体pA7-CFP和pA7-YFP的基础上，构建了pA7- CFP- AtCOP1，pA7-AtCRY1-YFP，pA7- CFP-OsCOPl和pA7-OsCRY1b-YFP载体。利用基因枪将重组质粒轰击入洋葱内表皮。主要试剂高保真聚合酶(pfu ultra)，限制性内
细胞共定位
实验试剂 高保真聚合酶(pfu ultra)，限制性内切酶(XhoI、SpeI、BamHI、SpeI、SacI)，金粉，无水乙醇，2.5MCaCl2 ，20ul 0.1M亚精胺实验设备 PCR扩增仪，PDS-1000/He型基因枪，激光共聚焦显微镜(Carl Zeiss LSM 510 )实验材料
基因枪法的操作过程
基因枪法： 将直径4um的钨粉或金粉在供体DNA中浸泡，然后用基因枪将这些粒子打入细胞、组织或器官中，具有一次处理多个细胞的优点，但转化效率较低。另外这种方法也用于基因治疗和抗体制备，并已取得初步成效。
基因枪法的定义和原理简介
基因枪法是一种基因导入仪技术，它把遗传物质或其他物质附着于高速微弹直接射入细胞、组织和细胞器，是目前国际上最先进的基因导入技术。气体基因枪以压缩气体（氦或氮）转换成的气体冲击波为动力，使气体基因枪枪产生一种“冷”的气体冲击波进入轰击室，因此可免遭由“热”气体冲击波引起的细胞损伤。气体基因枪可在广泛的
基因枪法的基本原理
这一方法是依靠一种基因枪来帮助导入外源基因。基因枪根据动力系统可分为火药引爆、高压放电和压缩气体驱动三类。其基本原理是通过动力系统将带有基因的金属颗粒（金粒或钨粒），将DNA吸附在表面，以一定的速度射进植物细胞，由于小颗粒穿透力强，故不需除去细胞壁和细胞膜而进入基因组，从而实现稳定转化的目的。它具有
基因枪技术的历史
基因枪的历史可以追溯到1987年。第一代基因枪是台式基因枪，其中火药型台式基因枪是基因枪中最原始的类型。最早的基因枪是由美国康奈尔大学Sanford于1987年与该校工程技术专家Wolf及Kallen合作研究出的一种基因转移的新方法。该方法一经发明便在学界崭露头角，Klein等人于1987年最早应用
基因枪的历史
基因枪的历史可以追溯到1987年。第一代基因枪是台式基因枪，其中火药型台式基因枪是基因枪中最原始的类型。最早的基因枪是由美国康奈尔大学Sanford于1987年与该校工程技术专家Wolf及Kallen合作研究出的一种基因转移的新方法。该方法一经发明便在学界崭露头角，Klein等人于1987年最早应用
基因枪法可以得到永久转基因植株吗？
基因枪法注入基因后，该植物原则上一直都是转基因植物，无性繁殖的后代也一直是转基因植物，而其种子繁殖的下一代则不一定，有可能种子繁殖的下一代含有目标基因，也可能没有。
基因枪操作步骤
微弹制备（金粉母液配制） （1）称取60mg金粉加入Eppendorf管。 （2）加入1mL 75%乙醇，充分涡旋，静置15min，1500rpm离心5min。 （3）弃上清，加入1mL无菌水，充分涡旋，1500rpm离心5min。重复3次。 （4）弃上清，加入1mL无菌
基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达
实验概要本实验在构建了OsAGAP瞬时表达载体的基础上，采用基因枪轰击洋葱表皮观察了GFP的瞬时表达。主要试剂高渗培养液(MS无机盐、40g/L甘露醇)，高渗固体培养基(MS无机盐、40g/L甘露醇、0.7% agar)，无水乙醇，无菌去离子水，12.5 M CaCl2，0.1 M亚精胺，等渗培养基
基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达
实验试剂高渗培养液(MS无机盐、40g/L甘露醇)，高渗固体培养基(MS无机盐、40g/L甘露醇、0.7% agar)，无水乙醇，无菌去离子水，12.5 M CaCl2 ，0.1 M亚精胺，等渗培养基(MS培养基)实验设备高速离心机，1.5 ml Ep管，涡旋器，超净台，基因枪，气瓶，激光共聚焦显微
棉花转基因技术基因枪法花粉活体育种实例
中国农科院棉花研究所针对 20 多个棉花品种，成功建立了高效、稳定的规模化转化体系，以流水线的操作方式，建立了高效、工厂化的棉花转基因技术体系。本文援引中国农业科学院棉花研究所的发明ZL内容，以制备转 GAPDH 基因棉花的具体方法为例，以应用实例演示棉花转基因技术的具体应用案例。土壤盐渍化是一个全
基因枪应用技术问答解疑
1. 基因枪转化法对受体有啥要求？基因枪对动物：任何可暴露于基因枪口外的组织（皮肤、器官）细胞、外植体和器官培养；植物：田间和温室使用、植物培养细胞和外植体；酵母、细菌、其它微生物细胞器、叶绿体、线粒体；受体广泛。2. 基因枪（颗粒轰击法）相比传统的转化那些优势？简单快速功能灵活，各类细胞类型通用只
植物基因转化常用方法4
1.2 其它的基因附加工程在水稻、棉花、马铃薯、番茄和其它作物上也进行了δ-内毒素工程，获得昆虫抗性也不仅仅是指有着一种方法。蛋白酶抑制剂也是较好的选择，它可以一只昆虫肠道内的蛋白酶活性，阻止或减缓害虫生长，许多植物能产生蛋白酶抑制剂，如豇豆和common bean, 他们的基因已经被成功的转移到其