报告基因：β半乳糖苷酶的原位染色实验
原位染色技术 实验方法原理 β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子，通过原位染色，在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。 实验材料 β-gal表达质粒转染细胞 试剂、试剂盒 D-PBSA 染色液 仪器、耗材 6 孔培养板 恒温箱 倒置显微镜 ......阅读全文
报告基因：β半乳糖苷酶的原位染色实验——原位染色技术
β-半乳糖苷酶的原位染色可应用于：（1）确定导人的DNA是否已被整合到宿主细胞；（2）来示踪细胞与细胞相互作用。实验方法原理β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子，通过原位染色，在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。实验材料β-gal表达质粒转染细胞试剂、试剂盒D-PBSA染色液
报告基因：β半乳糖苷酶的原位染色实验
原位染色技术 实验方法原理 β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子，通过原位染色，在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。
报告基因：β半乳糖苷酶的原位染色实验
试剂、试剂盒 D-PBSA 染色液质粒实验步骤 一、材料非消毒物品 1. D-PBSA2. 底物：X-gal（nvitrogen），以二甲基甲酰胺配成 20 mg/mL，用多聚丙烯管-20℃ 避光保存，最长可达 6 个月 3. 固定液：1.8% 的甲醛和 0.05% 戊二醛，均以 PBSA 液配制；
报告基因：β半乳糖苷酶的原位染色实验
原位染色技术 实验方法原理 β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子，通过原位染色，在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。
荧光原位杂交染色体分析技术
FISH是上世纪80年代中期发展起来并直到现在仍在不断改进、完善的技术。其基本过程是：首先制成染色体标本，和与所感兴趣的目的基因（或染色体片段）互补的探针，并在探针上标记荧光色素，当探针与染色体标本上的靶序列杂交后，利用荧光显微镜观察荧光信号从而获得染色体核型的信息。此技术具有灵敏度强、背景低、
荧光原位杂交的染色体分析
荧光原位杂交的染色体分析（一）标本的制备1．室温下，依次用70％、90％和100％的乙醇脱水5min。2．空气干燥载玻片。3．若短期使用，载玻片可在室温贮存数天。若载玻片要长期保存，应在室温下过夜使组织“老化”（aged），然后放入容器中，该容器密封于含干燥剂的塑料袋内，－70℃保存。根据作者的经验
染色体荧光原位杂交技术简介
一、定义：在细胞遗传学，分子生物学和免疫学相结合基础上发展的一种新科学，他利用已知的核酸序列作为探针，以荧光素直接标记或以非放射性物质标记后与靶DNA结合，在通过荧光素标记，最后在荧光显微镜下观察杂交信号，从而对标本中的待测核苷酸进行定性，定位和定量分析。二、原理：利用DNA变性后双链解开变成单链，
羊水细胞染色体制备方法（原位法）
细胞培养1. 将羊水（约20ml）转移到无菌的离心管中，1000rpm离心10分钟；2. 去除上清液，用于其它分析，保留细胞悬液约0.5~1ml，用培养基混匀到2~2.5ml左右；3. 将细胞悬液平分到3只Chromslide培养皿中；4. 培养24/48小时后，向每只Chromslide培养皿中加
荧光原位杂交染色体分析技术
FISH是上世纪80年代中期发展起来并直到现在仍在不断改进、完善的技术。其基本过程是：首先制成染色体标本，和与所感兴趣的目的基因（或染色体片段）互补的探针，并在探针上标记荧光色素，当探针与染色体标本上的靶序列杂交后，利用荧光显微镜观察荧光信号从而获得染色体核型的信息。此技术具有灵敏度强、背景低、
报告基因实验
实验方法原理报告基因是一个分子生物学概念，它是指一类在细胞、组织/器官或个体处于特定情况下会表达并使得他们产生易于检测、且实验材料原本不会产生的性状的基因。作为报告基因，在遗传选择和筛选检测方面必须具有以下几个条件：①已被克隆和全序列已测定；②表达产物在受体细胞中本不存在，即无背景，在被转染的细胞中
染色体荧光原位杂交和染色体核型分析一样吗
从定义来看： 荧光原位杂交方法是一种物理图谱绘制方法，使用荧光素标记探针，以检测探针和分裂中期的染色体或分裂间期的染色质的杂交。 染色体核型分析是将待测细胞的染色体依照该生物固有的染色体形态结构特征，按照一定的规定，人为的对其进行配对、编号和分组，并进行形态分析的过程。 从运用场景来看：
报告基因的应用
实验概要报告基因被广泛地应用于细胞生物学中的基因表达和细胞相关内容的研究。常用的报告基因主要有GUS基因、CAT基因、hGH基因、Cato2ase基因、绿色荧光蛋白基因及萤火虫荧光素酶基因等。在这些报告基因中萤火虫荧光素酶基因因其表达产物－荧光素酶敏感性高，测定方法快速且宜于掌握，线性好，并且荧光素
Luciferase－报告基因技术
Luciferase 报告基因技术自然界中广泛分布着生物发光有机体，其中包括细菌、真菌、鱼、昆虫等。在这些生物发光有机体中催化生物发光反应的各种酶都称之为荧光素酶（Luciferases），底物则命名为荧光素（Luciferin）。自1986— 1987 年首次被当作报告基因使用以来，荧光素酶基因已
Luciferase－报告基因技术
Luciferase 报告基因技术自然界中广泛分布着生物发光有机体，其中包括细菌、真菌、鱼、昆虫等。在这些生物发光有机体中催化生物发光反应的各种酶都称之为荧光素酶（Luciferases），底物则命名为荧光素（Luciferin）。自1986— 1987 年首次被当作报告基因使用以来，荧光素酶基因已
报告基因检测概述
报告基因检测是功能基因组学研究的一个重要手段，在真核基因表达调控研究和相关药物或蛋白筛选工作中，有广泛的应用。报告基因检测系统，是把顺式调控元件（即DNA非编码序列）与某一种非常容易被鉴定的蛋白（即报告基因产物）的编码序列连接起来，通过测定该报告基因在细胞内的表达产物的量或活性，来判断顺式调控元件的
中期染色体和间期核的原位杂交实验
实验材料含有人类中期染色体的载玻片或盖玻片试剂、试剂盒变性液乙醇Cot-1 DNA非同位素标记的 DNA 探针去离子甲醜胺基本杂交混合液甲酰胺SSC生物素检测溶液DAPI适当的抗褪色剂仪器、耗材玻片染色缸水浴箱相差显微镜盖玻片橡皮泥湿盒干燥的玻片盒指甲油实验步骤展开
原位PCR和原位RT
（一）、仪器设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪 。（二）、操作流程1、原位PCR 步骤1）预处理：（1）切片常规脱蜡；（2）0.2mol/L HCl处理10min；（3）5μg/ml蛋白酶K消化组织37℃10min；（4）Nase消化组织37℃ 30min；（5）梯度酒精脱水，室温干燥
什么是Luciferase报告基因系统
Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)
报告基因(report－gene)的应用
报告基因被广泛地应用于细胞生物学中的基因表达和细胞相关内容的研究。常用的报告基因主要有GUS基因、CAT基因、hGH基因、Cato2ase基因、绿色荧光蛋白基因及萤火虫荧光素酶基因等。在这些报告基因中萤火虫荧光素酶基因因其表达产物－荧光素酶敏感性高，测定方法快速且宜于掌握，线性好，并且荧光素酶产生的
报告基因的特点和作用
理想的报告基因通常具备如下基本要求：①、受体细胞中不存在相应内源等位基因的活性；②、它的产物是唯一的，且不会损害受体细胞；③、具有快速、廉价、灵敏、定量和可重复性的检测特性。常用的报告基因有氯霉素乙酰转移酶基因（cat）、荧光素酶基因（luc）、β-葡萄糖苷酸酶基因（gus）等。
报告基因实验——MUG－荧光分析
实验材料组织提取物试剂、试剂盒GUS 缓冲液MUG仪器、耗材96 孔板数显荧光计实验步骤1. 分别取 25 ul 和 50 ul 组织提取物样品于 96 孔板中（黑色或者白色），包括未转化的对照组织，加 GUS 缓冲液至总体积为 200 ul，混匀。2. 加入 100 μl 含 2.5 mg/ml
报告基因分类及优缺点
报告基因（reporter gene）是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，其表达产物非常容易被鉴定。把它的编码序列和基因调节序列相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。作为报告基因必须具备的条件：（1）全序列已测定（2）表达产物在手提细胞中不存在，即无背景，
放射自显影原位杂交玻片的压片固定_苏木精/伊红染色
实验材料水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒苏木精染料（用乙酸处理的Harris改进苏木精 无汞)0. 1%氢氧化铵伊红染料仪器、耗材玻璃染色盘实验步骤1) 将显影过的载玻片（在玻片架中）放入盛有水的染色盘中。2) 在染色盘中准备以下各组液体：1个盘： 苏木精染液2个盘： 水1个盘： 0.1%氢氧化
放射自显影原位杂交玻片的压片固定实验_姆萨－染色
实验材料水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒吉姆萨染色液（Fisher)710 mmol L磷酸钠缓冲液pH 6.8 (500 mmol L原液按1:50稀释）50%、70%、95% 和100% 乙醇、二甲苯封片介质为Permount (Fisher)或 Gelvatol (现称 Airvol来自A
冰冻切片组织蛋白酶B（CATHEPSIN－B）活性原位荧光染色检...
主要用途冰冻切片组织蛋白酶B（CATHEPSIN B）活性原位荧光染色检测试剂是一种旨在通过荧光染料甲酚紫标记的多肽底物作为探针，自由进入细胞内，受到组织蛋白酶B水解后，呈现荧光现象，以分析样品酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种冰冻组织内组织蛋白酶B的
间接原位PCR（原位杂交PCR）
与直接原位PCR所不同的是，靶基因在扩增时不进行标记基团的掺入，而是标记一段与扩增片段互补的探针，在扩增结束后，应用此探针进行原位杂交。因此，此处主要介绍原位杂交，其余方法同原位PCR。实验材料组织或细胞样品试剂、试剂盒SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脱脂奶粉Denhardt’s 液SDS变性的鲑鱼精DNAR
间接原位PCR（原位杂交PCR）
间接原位PCR（原位杂交PCR） 实验材料 组织或细胞样品 试剂、试剂盒
间接原位PCR（原位杂交PCR）
与直接原位PCR所不同的是，靶基因在扩增时不进行标记基团的掺入，而是标记一段与扩增片段互补的探针，在扩增结束后，应用此探针进行原位杂交。因此，此处主要介绍原位杂交，其余方法同原位PCR。一、预杂交1. 试剂与配制2×SSC50%去离子甲酰胺：用4×SSC配制（v/v）预杂交液：2×SSC，5%硫酸葡
原位PCR
About in situ PCR (Applied Biosystems) Basic information about in situ PCR and its applications. The In Situ PCR: Amplification and Detection in
原位PCR
实验概要原位PCR技术自上世纪90年代初建立至今，科学家就一直对原位PCR的技术和应用进行研究，目前该项技术已日臻完善。原位PCR既能分辨带有靶序列的细胞又能标出靶序列在细胞内的位置，在分子和细胞水平上研究疾病的发病机理、临床过程以及病理的转归，其特异性和敏感性均高于一般PCR技术。在病毒学、病理学