利用CRISPR/Cas9来攻克乙肝

在一项新研究中,麻省理工学院的研究人员利用CRISPR/Cas9 系统,对受到感染的哺乳动物肝细胞进行基因组编辑,从中删除了乙肝病毒(HBV)DNA。根据发表在《Scientific Reports》杂志上的研究结果,该研究小组靶向切割了HBV病毒共价闭合环状DNA(cccDNA)的一些特异位点。 根据世界卫生组织(WHO)报道,全球有20多亿人曾受到过乙型肝炎病毒感染,大约3.5亿至4亿人罹患慢性HBV感染,在亚洲和非洲发病率尤其高。他们面临着形成肝硬化或甚至肝癌的高风险。尽管现有的抗病毒药物可以控制乙型肝炎病毒,但却不能完全清除它。因此,一旦停止治疗患者肝脏中的HBV会重新活化。这是因为cccDNA “匿藏”在细胞核中。 HBV的基因组(rcDNA)进入到细胞核后,rcDNA在病毒蛋白和宿主细胞因子的帮助下修复成cccDNA。前基因组RNA(pgRNA)出核后,在胞质中形成εpgRNA,并与病毒的聚合酶P蛋白共价结合......阅读全文

慢病毒转染肝细胞方法

Lentivirus Transduction of Hematopoietic CellsMing-Jie Li and John J. RossiDivision of Molecular Biology, Beckman Research Institute of the City of Ho

揭示乙肝病毒和丁肝病毒如何在肝细胞中建立感染

  在一项新的研究中,来自美国普林斯顿大学的研究人员开发出一种新的可扩展的细胞培养系统,它允许对宿主细胞如何应对乙型肝炎病毒(HBV,又称乙肝病毒)和丁型肝炎病毒(HDV,又称丁肝病毒)感染进行了详细调查。相关研究结果于2019年6月17日在线发表在Hepatology期刊上,论文标题为“Analy

PNAS:让病毒“吐出”基因组

  病毒感染导致的手足口病,会使儿童出现可能致命的脑肿胀和麻痹,现在科学家们找到了治疗这种疾病的潜在途径,这一发现也为对抗其他相关病毒提供了宝贵线索。   在中国和东南亚国家,每年都会出现手足口病的爆发,这种疾病是由肠道病毒71型(EV71)引起的。在一些受到感染的儿童中,病毒会引发脑炎造成

Nature医学:肝炎病毒的诡计-诱骗肝细胞破坏免疫防御

  11月14日,华盛顿大学的研究人员及其同事在《Nature Medicine》发表的一项研究表明,导致丙型肝炎的病毒,本身可通过阻断“唤醒肝细胞中免疫防御”的信号,来保护自己。  这项研究的通讯作者、华盛顿大学医学院免疫学助理教授Ram Savan说:“这个发现有助于解释‘为什么许多患者对某些药

Nature医学:肝炎病毒的诡计,诱骗肝细胞破坏免疫防御

  11月14日,华盛顿大学的研究人员及其同事在《Nature Medicine》发表的一项研究表明,导致丙型肝炎的病毒,本身可通过阻断“唤醒肝细胞中免疫防御”的信号,来保护自己。  这项研究的通讯作者、华盛顿大学医学院免疫学助理教授Ram Savan说:“这个发现有助于解释‘为什么许多患者对某些药

Science:人巨细胞病毒病毒基因组测序

  人巨细胞病毒是一种很常见的疱疹病毒,感染约50-100%的成人,但通常没有不良影响,并且它可以保持潜伏多年。人巨细胞病毒感染是比较常见的,发展中国家感染人数比发达国家人数多。   该病毒可导致出新生儿生缺陷和免疫系统受损,可能会导致致命疾病。该病毒也与癌症发展有关联。这项新的研究分析了病毒的蛋

树懒基因组中发现“化石”病毒

        二趾树懒(Choloepus hoffmanni,如上图)的基因组中隐藏着一个“化石”病毒。   据美国《科学》杂志在线新闻报道,就像恐龙在焦油中留下的脚印一样,逆转录酶病毒会将其DNA中的一些片段插入到一种动物的基因组中。研究人员在树懒的基因组中发现了泡沫病毒的古老片段。研究人

关于病毒基因组的基本介绍

  病毒是最简单的生物,完整的病毒颗粒包括外壳蛋白和内部的基因组DNA或RNA(有些病毒的外壳蛋白外面有一层由宿主细胞构成的被膜(envelope),被膜内含有病毒基因编码的糖蛋白。病毒不能独立地复制,必需进入宿主细胞中借助细胞内的一些酶类和细胞器才能使病毒得以复制。外壳蛋白(或被膜)的功能是识别和

病毒基因组的结构特点介绍

  1.病毒基因组大小相差较大,与细菌或真核细胞相比,病毒的基因组很小,但是不同的病毒之间其基因组相差亦甚大。如乙肝病毒DNA只有3kb大小,所含信息量也较小,只能编码4种蛋白质,而痘病毒的基因组有300kb之大,可以编码几百种蛋白质,不但为病毒复制所涉及的酶类编码,甚至为核苷酸代谢的酶类编码,因此

未知基因组的神秘“巨型病毒”揭示病毒世界变异性

  据国外媒体报道,目前,科学家最新发现一种具有未知基因组的神秘巨型病毒。  该病毒被称为“Yaravirus”,是在巴西贝洛哈里桑塔城帕普哈人工湖中发现的,它是以巴西神话传说中“水仙(Yara)”的名字命名的。尽管该病毒可能不是什么超自然警报,但它可能像神话中的“水仙(Yara)”一样神秘。  因

《自然—细胞生物学》:丙肝病毒利用肝细胞脂肪滴增殖

日本研究人员发现,肝细胞内的脂肪滴(一种用于储存中性脂肪的细胞器)是丙肝病毒增殖的一个重要场所。他们认为,如果能找到防止过剩脂肪滴蓄积的药物,将有望阻止丙肝病毒引发的肝脏疾病恶化。 京都大学等机构的研究人员在新一期《自然—细胞生物学》杂志网络版上撰文说,他们观察了丙肝病毒在人工培养的人体肝细胞内的增

Nature-Biotechnology定义病毒基因组标准:何谓高质量基因组

  据说,地球上的微生物总量超过了银河系中的恒星数量,而且病毒总量也要比之前预计的多得多。  在最新的Nature Biotechnology杂志上,美国能源部(DOE)联合基因组研究所(JGI)构建了重要的病毒序列数据库,同时提出了病毒基因组标准,指出了三类基因组质量的分级。  目前虽然许多病毒未

肝细胞的简介

  人肝细胞切片 HE染色 LM10*40倍  肝细胞hepatocyte,hepatic cells,liver cellsLM(光镜):多面体形;核大而圆,居中,常染色质丰富,部分有双核或多倍体核;胞质嗜酸性,含弥散分布的嗜碱性团块EM(电镜):(1)有三种功能面→血窦面→胆小管面→细胞连接面:

肝细胞的溶酶体

  DeDuve于1955年首次在大鼠肝细胞匀浆超速离心后的各组成分中发现溶酶体的存在,后经电镜观察证实。溶酶体是由单层界膜围成的颗粒,其大小形态以及内部结构均极不一致。由于所有溶酶体均含有酸性水解酶,故将此酶作为溶酶体的标志酶。溶酶体借助其所含50多种酶消化、分解各种内生性或外源性物质,因此,可将

中国新型冠状病毒的基因组序列

  《自然》杂志2月3日发表了新型冠状病毒的基因组序列(论文:A new coronavirus associated with human respiratory disease in China),病毒样本系从一名曾在最先爆发疫情的海鲜市场工作过的患者体内分离得到。基因组分析显示,该病毒与此前在

全基因组表达谱芯片应用于TMED3调控原发性肝细胞癌...

全基因组表达谱芯片应用于TMED3调控原发性肝细胞癌(HCC)的转移机制研究原发性肝细胞癌(HCC)肝内外转移是导致临床手术后病人预后较差的重要原因之一。由于目前临床上尚缺乏有效的靶向治疗肝癌的化疗药物,寻找治疗HCC转移的有效靶点一直是科学家关注的重点。来自东方肝胆外科医院周伟平教授,第二军医大学

Nature子刊:基因治疗常用载体可能致癌

  病毒不仅能引发感染,还与一些严重的疾病有关。举例来说,肝脏受到乙肝或丙肝病毒感染之后往往会发展成肝癌。日前法国科学家们又发现了一种与肝癌有关的病毒,这种病毒一直被认为非常安全。这项研究发表在最近的Nature Genetics杂志上。  肝癌是一种预后很差的常见恶性肿瘤。我国是肝癌高发国家,每年

利用CRISPR/Cas9来攻克乙肝

  在一项新研究中,麻省理工学院的研究人员利用CRISPR/Cas9 系统,对受到感染的哺乳动物肝细胞进行基因组编辑,从中删除了乙肝病毒(HBV)DNA。根据发表在《Scientific Reports》杂志上的研究结果,该研究小组靶向切割了HBV病毒共价闭合环状DNA(cccDNA)的一些特异位点

SARS病毒基因组复制机制研究获突破

  近日,武汉大学生命科学学院教授郭德银领导的研究组以选择冠状病毒特有的多个RNA加工酶作为主要研究目标,通过酵母菌系统的功能筛选和体外生物化学分析,发现SARS病毒基因组1b区编码的一种非结构蛋白nsp14同时具有两种RNA加工酶活性,一是参与RNA 5’-端加帽的N7-甲基转移酶,二是进行RNA

酵母还能快速“重建”新冠病毒基因组?

  据《自然》杂志6日发表的一项合成生物学研究,瑞士一个研究团队开发出一种可以快速重建新冠病毒的方法。重建病毒有助于研究人员开发诊疗方法和疫苗,同时,拥有合成能力也被认为是未来防治相关疫情的重要一环。  在实验室重建病毒,是一种有效的研究疾病暴发所涉病原体的方法。发生疫情时,将病毒样本送至研究机构可

牛乳头瘤病毒基因组结构和功能

  乳头瘤病毒(papillomavirus)是感染人和动物皮肤、粘膜并引起乳头状瘤病变的一种DNA病毒,属于乳多空泡病毒(papovavirus)科。根据病毒感染的宿主不同可以分为牛乳头瘤病毒(BPV),人乳头瘤病毒(HPV)等。已发现的乳头瘤病毒基因组都具有相似的结构。下面以BPV为例说明乳头瘤

肝细胞正常代谢功能

肝是人体内体积最大的实质性腺体,是具有重要而复杂的代谢功能的器官。它具有肝动脉和肝静脉双重的血液供应,且有肝静脉及胆道系统出肝,加上丰富的血窦及精巧的肝小叶结构,以及肝细胞中富含线粒体、内质网、核蛋白体和大量酶类,因而能完成复杂多样的代谢功能。每个肝细胞平均约含400个线粒体,呈圆形、椭圆形或棒形。

大鼠肝细胞分离实验

实验方法原理经肝门静脉或肝门静脉分支插管,用无钙缓冲液灌洗肝 15 min,再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞,计数有活力的肝细胞。试剂、试剂盒L-15 Leibovitz 培养液Ham F12 培养液胞培养液HMM SF无钙 HEPES 缓冲液胶原蛋白酶液5% 戊巴比妥钠肝素仪器、耗材聚

大鼠肝细胞分离实验

实验方法原理 经肝门静脉或肝门静脉分支插管,用无钙缓冲液灌洗肝 15 min,再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞,计数有活力的肝细胞。试剂、试剂盒 L-15 Leibovitz 培养液Ham F12 培养液胞培养液HMM SF无钙 HEPES 缓冲液胶原蛋白酶液5% 戊巴比妥钠肝素仪器、耗

肝细胞正常代谢功能

肝是人体内体积最大的实质性腺体,是具有重要而复杂的代谢功能的器官。它具有肝动脉和肝静脉双重的血液供应,且有肝静脉及胆道系统出肝,加上丰富的血窦及精巧的肝小叶结构,以及肝细胞中富含线粒体、内质网、核蛋白体和大量酶类,因而能完成复杂多样的代谢功能。 每个肝细胞平均约含400个线粒体,呈圆形、椭圆形或棒

基因导入的生物学法

  主要通过构建病毒载体来完成。  1 逆转录病毒(retrovirus,Rv)  构建简单,装载外源基因容量最大达8kb,整合入宿主细胞基因组而无病毒蛋白表达。但仅能感染分裂期细胞,体外制备滴度较低,且其随机整合有引起“插入性突变”的可能。  2 腺病毒(adenovirus,Adv)  为近年肝

AVTBGCre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达敲除应用与分析

  AAV-TBG-Cre/GOI系统简介:   l AAV-TBG-Cre系统是整合了肝脏特异性TBG启动子和Cre重组酶的腺相关病毒载体。   Ø TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白(TBG)启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子,用于肝脏特异性转外源基因表达。   Ø Cre重组酶是

AAVTBGCre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达或敲除中的应用...

AAV-TBG-Cre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达或敲除中的应用与优势分析AAV-TBG-Cre/GOI系统简介:l AAV-TBG-Cre系统是整合了肝脏特异性TBG启动子和Cre重组酶的腺相关病毒载体。Ø TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白(TBG)启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子

干扰素调控因子1基础表达能促进肝细胞抵抗多种RNA病毒

  目前的细胞对RNA病毒的固有免疫模型主要是由病毒引发的诱导抗病毒反应,这种反应是由RIG-I类受体或toll类受体发起的,这些受体通过干扰素调控因子(IRFs)感知病原体相关的分子模式,并向下游发出信号;诱导合成I型和III型干扰的转录因子IRF1。  今日,一项刊登在国际杂志Nature Mi

-攻克乙肝不是梦,基因编辑靶向“剪切”乙肝病毒

  7月28日是一年“世界肝炎日”,肝炎是肝脏的炎症,最常见的原因是病毒感染。病毒性肝炎分为甲、乙、丙、丁和戊型,虽然病毒种类不同,但都足以对人构成严重危害,其中乙型和丙型肝炎可以导致肝硬化和肝癌的发生,给全球带来严重的疾病负担。  乙型肝炎病毒简称乙肝病毒,是一种DNA病毒,属于嗜肝DNA病毒科(