哪些原因会导致液相色谱峰分离度差，峰分不开？
在液相色谱分析中，我们经常会遇到两个化合物无法得到基线分离或分离度差。液相色谱中流动相条件，色谱柱选择以及系统硬件的设置都会影响分离度。我们可以从以下几个方面考虑： 1.流动相 a. 流动相中有机溶剂的类型和比例，会影响色谱分离的选择性。对于反相色谱模式，常用的有机溶剂有甲醇、乙腈和四氢呋喃。我们可以通过改变流动相中的有机相种类或调整其比例，来改变选择性和分离度。 b.流动相的pH值和缓冲盐的添加也会影响分离度。对于中性的化合物，无论是极性还是非极性的，流动相pH值的改变不会对其选择性有太大的影响；对于可解离的化合物，pH的改变会产生较大的影响。对于酸性化合物，比如苯甲酸，其pKa为4.2，当流动相pH值大于5.7（pKa+1.5），则苯甲酸以离子型态存在，则与反相固定相之间的作用较弱，保留时间较短，当流动相pH值小于2.7 （pKa−1.5），则苯甲酸以分子形态存在，则与反相固定相之间有更强的保留作用，保留时间更长。......阅读全文
怎样选择液相色谱柱保护柱不会影响分离分析
液相色谱柱通常在选择保护柱之前首先要考虑样品是否清洁，对于大部分分析工作来说，一支25px长的保护柱便能够提供充分的保护作用。但是，如果样品较脏，或工作中发现经常要更换25px的保护柱，那么就应该选用50px或75px的保护柱。保护柱越长自然所装的色谱填料就越多，则其保护性能越好，当然随着保护柱长度
液相色谱流动相脱气
流动相的脱气HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。（噪声增大，基线不稳，突然跳动）。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂PH的变化，对分
液相色谱流动相小议
一、液相色谱流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流
色谱柱分离经验
色谱柱可以分为：加压、常压、减压色谱柱。压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶
色谱柱分离原理
原理很简单，就是相似相溶的原理，相溶的停留时间长，极性不相溶的仪时间短。
色谱柱分离经验
色谱柱子可以分为：加压，常压，减压。 压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。 减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的
色谱柱分离经验
柱子可以分为：加压，常压，减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂
反相色谱分离极性物质的高水流动相的色谱填料塌陷
在如今的色谱分析应用中，反相色谱无疑是应用的zui为广泛的色谱分离模式.但是当用反相色谱法分离极性化合物时，因为溶解度的因素很多极性化合物更适用于用高水流动相，有的甚至要在非常高的水流动相时色谱柱才具有保留能力，一些非常高极性的化合物甚至要用100%的水作流动相.而反相色谱柱的固定相通常疏水性很强，
气相色谱故障排查–柱效损失（分离度）
就GC色谱柱固定相的膜厚而言，其可能会以不同方式影响早期和之后洗脱峰的柱效，k'值5时反之亦然。但是，除非大幅度改变膜厚度（例如，从0.1mm改变为1mm），否则改变膜厚度的效果不会太剧烈。 这些值在等温分离中适用，而在梯度温度编程分离中则不同，但是趋势仍然适用。 综上所述的信息将使
怎样选择高效液相色谱柱保护柱不会影响分离分析？
高效液相色谱柱通常在选择保护柱之前首先要考虑样品是否清洁，对于大部分分析工作来说，一支25px长的保护柱便能够提供充分的保护作用。但是，如果样品较脏，或工作中发现经常要更换25px的保护柱，那么就应该选用50px或75px的保护柱。保护柱越长自然所装的色谱填料就越多，则其保护性能越好，当然随着保
C18液相色谱柱色谱柱液相色谱柱
分析型到制备型一套完整的填料体系，目前可提供的填料键合相有C18、C4、C8、SI、NH2、CN、Phenyl、Diol以及手性填料TBB和 DMB。孔径有60A、100A和300A三种，满足不同条件的分析。填料粒径可以提供3.5um、5um、7um、10um、13um和16um六种。可谓品
Kromasil色谱柱是否可以在纯水流动相下操作？
Kromasil是否可以在纯水流动相下操作？当您使用Kromasil反向C4、C8、C18色谱柱时，流动相中至少要有5%有机相。 Kromasil苯基柱，Eternity系列都可以在100%纯水流动相下使用，不会出现润湿问题！
手性柱分析流动相方法优化
手性分析很关键的一项是流动相的选择，手性分析一般都采用正相，使用zui多的流动相是正己烷、正庚烷、乙醇和异丙醇这四种，其中起洗脱作用的流动相是乙醇和异丙醇，正己烷和正庚烷用来调节流动相的洗脱强度。正己烷和正庚烷对于样品分离没有什么太大的影响，不会改变选择性和分离度，通常都可以混用，不过正庚烷比正己
药品研发中HPLC液相色谱柱的选择和流动相的优化
分析方法的开发主要包括色谱柱的选择、流动相的选择、检测波长的选择和梯度的优化几个方面。目前高效液相色谱法（HPLC)多使用反相色谱法，本文主要以反相为例讲解。 1.液相色谱柱的选择 原料药生产对产品的纯度和杂质含量的要求非常苛刻，要求检测使用的色谱柱有较高的理论塔板
药品研发中HPLC液相色谱柱的选择和流动相的优化
分析方法的开发主要包括色谱柱的选择、流动相的选择、检测波长的选择和梯度的优化几个方面。目前高效液相色谱法（HPLC)多使用反相色谱法，本文主要以反相为例讲解。1.液相色谱柱的选择 原料药生产对产品的纯度和杂质含量的要求非常苛刻，要求检测使用的色谱柱有较高的理论塔板数，能提
色谱流动相如何调整？
色谱流动相如何调整？还在模棱两可的看过来 开发方法或方法验证时最重要的一步就是流动相的选择和比例的调整。我想大家肯定都遇到过分离度不好或峰形不好的情况，大部分原因就是流动相没调好，那到底该怎么调，怎么选择呢？看完下文可能你就知道答案了。 秘诀1：由强到弱 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水
液相色谱流动相走空
泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环，最终产生漏液。
液相色谱流动相的特点
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点： （1）流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。 （2）流动相与样品不产生化学反应 （3）流动相的黏度要尽量小，以便得到好的分离效果；降低柱压降，延长泵的
液相色谱流动相的特征
流动相要求液相色谱的流动相必须符合下列要求：（1）能溶解样品，但不能与样品发生反应。（2）与固定相不互溶，也不发生不可逆反应。（3）粘度要尽可能小，这样才能有较高的渗透性和柱效。（4）应与所用检测器相匹配。例如利用紫外检测器时，溶剂要不吸收紫外光。（5）容易精制、纯化、毒性小，不易着火，价格尽量低等
液相色谱流动相的选择
在化学键合相色谱法中，溶剂的洗脱能力直接与它的极性相关。在正相色谱中，溶剂的强度随极性的增强而增加；在反相色谱中，溶剂的强度婕缘脑銮慷跞酢?BR>正相色谱的流动相通常采用烷烃加适量极性调整剂。反相色谱的流动相通常以水作基础溶剂，再加入一定量的能与水互溶的极性调整剂，如甲醇、乙腈、四氢呋喃等。极性
液相色谱流动相不过滤
因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏，而常用的方法是滤过，可采用Millipore滤膜（0.2μm或0.45μm）等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒（或片）。输液泵的滤器应经常清洗或更换。
液相色谱流动相的贮存
流动相的贮存流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内，不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂，导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统，可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成变化，也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸盐缓冲液
液相色谱流动相的贮存
流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内，不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂，导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统，可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成变化，也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉，应
液相色谱流动相的脱气
HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。（噪声增大，基线不稳，突然跳动）。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化，对分离或分析结果
液相色谱流动相的滤过
流动相的滤过所有溶剂使用前都必须经0.45µｍ（或0.22µｍ）滤过，以除去杂质微粒，色谱纯试剂也不例外（除非在标签上标明“已滤过”）。用滤膜过滤时，特别要注意分清有机相（脂溶性）滤膜和水相（水溶性）滤膜。有机相滤膜一般用于过滤有机溶剂，过滤水溶液时流速低或滤不动。水相滤膜只能用于过滤水溶液，严禁用
高效液相色谱流动相选择
流动相选择1）由强到弱：一般先用90％的乙腈（或甲醇）／水（或缓冲溶液）进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂（乙腈或甲醇）的比例。2）三倍规则：每减少10％的有机溶剂（甲醇或乙腈）的量，保留因子约增加３倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中，注意观察
液相色谱流动相的贮存
液相色谱流动相的贮存流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内，不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂，导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统，可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成变化，也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸
高效液相色谱流动相选择
流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 流动相选择 1：由强到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况
液相色谱柱的分离效果取决于色谱柱的制备和操作条件
色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70 kg/cm2 时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛光相同。还有使
高效液相色谱柱的分离效果取决于色谱柱制备和操作条件
色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70 kg/cm2 时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛光相同。还有