新型溶瘤病毒M1产业化关键技术获突破
广东中山大学颜光美团队继去年鉴定出甲病毒M1可作为一个全新的抗肿瘤溶瘤病毒后,今年进一步研究发现,一种小分子化合物能增加溶瘤病毒M1的复制产量十倍以上。这一重要研究结果近日发表在美国出版的基因与细胞治疗学领域知名期刊《分子治疗》上。这将成为M1迈向产业化的关键一步,还将有效扩大M1的抗肿瘤范围。 近年来受到广泛重视与深入研究的溶瘤病毒疗法,是一种新型的选择性靶向肿瘤的疗法。整体动物模型证明,该种小分子化合物能特异地在动物肿瘤内增加M1病毒的复制,可以使新型溶瘤病毒M1的产量升高十倍以上,并增强实验性肿瘤的治疗效果,而正常器官则不受影响。为何M1病毒会在细胞内大量增加?原理在于,当M1病毒进入细胞时,细胞会自动产生许多抗病毒因子,而这种小分子化合物的加入,能够激活细胞内的特异性信号通路(Epac),使得抗病毒因子无法“清除”M1病毒,从而使得M1病毒大量复制。 这项发现的临床意义在于,一方面这种小分子化合物可作为M1病......阅读全文
巨细胞病毒行肺炎的诊断
由于病毒性肺炎在临床表现上具有一定的相似性,因而病原学检查尤为重要。CMV的病原学检查可通过以下几方面进行:①检测CMV包涵体细胞和病毒颗粒:如从患者血、尿、和支气管灌洗液中分离,但存在较高的假阳性,71%~91%的高危移植患者从BAL中虽分离到CMV,但无活动性肺炎证据。也可以将患者各种分
巨细胞病毒行肺炎的病因
巨细胞病毒属于B族疱疹病毒,为双链DNA病毒,外有包膜,核为球状。对热和低温稳定性差,56℃30min或4℃1周均可灭活,也可以紫外线和脂溶性溶剂灭活。CMV具有两种抗原,补体结合抗原和中和抗原。前者的存在形式大部分为可溶性抗原,后者主要为糖蛋白构成,为病毒包膜组成成分之一。CMV的感染具有严格
“人体免疫细胞+病毒”可抗耐药菌
随着抗生素的广泛使用,耐药菌株已成为引起临床感染较为常见的病原菌。特别是医院内耐药菌株的感染使病死率大幅增加,其治疗已成为临床上的难题。 目前临床常见的重要耐药革兰阳性菌有耐甲氧西林葡萄球菌(MRSA)、对青霉素耐药的肺炎球菌(PRSP)和万古霉素耐药的肠球菌(VRE)。我国各地报道耐中氧西林金
小儿巨细胞病毒肺炎的鉴别
CMV肺炎与其他病毒性肺炎仅就本身的临床症状,不易区别,若伴有全身其他症状可作参考,确诊需靠实验室的病原诊断。此外CMV肺炎尚应与败血症、单纯疱疹、先天性麻疹和弓形体病等表现有肺炎者相鉴别。
概述巨细胞病毒的诊断方法
唾液、尿液、子宫颈分泌液等标本离心沉淀,将脱落细胞用姬姆萨染色镜检,检查巨大细胞及核内和浆内嗜酸性包涵体,可作初步诊断。 分离培养可将标本接种于人胚肺纤维母细胞中,由于CMV生长周期长,细胞病变出现慢,为了快速诊断,可将培养24小时的感染细胞固定,用DNA探针进行原位杂交,检测CMV DNA。
基因重组疱疹病毒专杀癌细胞
意大利博洛尼亚大学研究人员日前通过生物基因技术,重组出一种专门杀死恶性肿瘤细胞而不伤害健康细胞的疱疹病毒。动物实验证实,用这种病毒治癌有一定效果。 据意大利《共和国报》报道,这种疱疹病毒在经过部分基因重组后,可“辨认”恶性肿瘤细胞内一种名为HER-2的致癌基因,直接定位并杀死肿瘤细胞,避免
EB病毒转化成淋巴细胞
实验材料 全血 试剂、试剂盒 刀豆凝集素A 仪器、耗材
巨细胞病毒病的发病机制
人一旦发生CMV感染,常终身带毒,可侵入肺、肾、肝、肠道、视网膜等脏器及唾液腺、乳腺其他腺体和多核白细胞和淋巴细胞,可长期或间隙地自唾液、乳、汗、血液、尿液、精液、子宫分泌物多处排出病毒。免疫正常时可无症状,但病毒仍潜伏持续存在,主要潜伏部位是血管内皮细胞及血管平滑肌细胞,此外也潜伏于淋巴细胞、
巨细胞病毒的预防措施
巨细胞病毒对人类的危害性很大,所以我们应积极预防其发生。 ⑴进行有意识的身体素质的锻炼。提高机体免疫机能及抗病能力,特别是育龄期妇女,以减少巨细胞病毒对胎儿的严重危害。 ⑵对于孕妇或有慢性消耗性疾病、免疫力低下等患者要注意保护,使她们远离传染源。 ⑶注意环境卫生、饮食卫生。 ⑷乳汁中巨细
EB病毒诱导淋巴细胞实验步骤
实验步骤:1、EB病毒液的制备复苏B95.8细胞株,使用培养基为10% FCS RPMI-1640逐步添加培养基至细胞长至对数生长期细胞计数,调节细胞数量为1×10^6个/ml在CO2培养箱中继续续培养10天,中间不换液至第10天收集培养上清,1800rpm,4℃离心15分钟0.22μm滤器过滤,1
巨细胞病毒病的症状体征
1.后天感染 多呈隐性感染或症状轻微,但少数患者临床表现较为严重。围生期感染的新生儿患者(其中部分可能系在宫内受染)可呈迁延性肺炎;儿童及成人患者可发生巨细胞病毒性肝炎(症状体征类似于一般病毒性肝炎)。有的患者可表现为畏寒、发热、咽痛、头痛、身痛、血中出现变异淋巴细胞,可高达10%~20%,其临
巨细胞病毒抗体阳性是什么
IgM是抗体的一种类型。意思就是检测到了体内有巨细胞病毒的IgM。IgM出现于感染的早期,所以是近期感染
人巨细胞病毒致病的进展
近十 年来,对人巨细胞病毒(HCMV)的研究有突破性进展 由于它与多 疾病有关,日益受到重视。该病毒感染的普遍性、致病的复杂性、体内不同寻常的潜伏及再激活方式、常 无症状感染。因此,有价值的诊断技术及治疗尚有待解决, 给人们提出了严峻的挑战。 、HCMV的流行病学 HCMV为常见人体感染病毒。
EB病毒转化成淋巴细胞
实验材料全血试剂、试剂盒刀豆凝集素A仪器、耗材RPMI 生长培养基离心管实验步骤1. 混合 10 ml 全血和 10 ml RPMI 生长培养基。生长培养基(RPMI1640 800 ml,FBS 200 ml,2 mmol/L-谷氨酰胺,5 μg/ml 两性霉素,50 μg/ml 庆大霉素)2.
小儿巨细胞病毒肺炎的检查
由于CMV不显性感染广泛存在,因此在解释实验室阳性结果时要慎重,必须结合病毒分离、血清学和细胞病理学检查方能得以肯定诊断。传统的实验室检查方法有病毒分离和补体结合试验以及中和试验3种。采取患儿的尿、咽洗液、痰、胃液、脑脊液或脏器活检及尸检组织接种于敏感细胞中,培养24h后,经特殊染色可见包涵体。
使用流式细胞仪检测病毒
流式细胞术是一种通常用于从混合样品中识别和分离特定细胞的技术。这种技术可以应用于大量的样品筛选,这对于进一步的统计分析是非常理想的。流式细胞仪已用于检测病毒,该技术被人们称为“流式病毒仪”。 此外,流式细胞术已被用于根据感染性的不同对病毒颗粒进行分类,以及检测被病毒感染的细胞。 “流式病毒
杆状病毒昆虫细胞表达系统2
五、亲代杆状病毒基因组的改进就像转移质粒的改进,对亲代杆状病毒基因组的改进也是为了满足各种不同的需要。起初,最主要的目的是找到克服重组杆状病毒载体构建和分离低效率的方法,这也是最初的杆状病毒-昆虫细胞系统存在的主要问题。现在已经知道这个问题的根源在于, 在共转染的昆虫细胞系中,转移质粒和亲代杆状病毒
巨细胞病毒的临床意义
可通过多种途径传播。正常人感染:人群中感染非常广泛,通常呈现隐性感染,少数出现传染性单核细胞增多症。免疫功能缺损的个体的感染:HCMV感染所致的间质性肺炎是骨髓移植受者的首位死因。AIDS患者HCMV感染以肺、中枢神经系统和胃肠道感染最为常见。先天性和围生期感染。
杆状病毒昆虫细胞表达系统3
七、杆状病毒表达载体的新一代昆虫细胞宿主最早的鳞翅类昆虫细胞的遗传转化技术出现在1990年(Jarvisetal.,1990)。那时,研发该技术的初衷在于构建一个稳定转化的昆虫细胞系,它旨在能够持续生产目标重组蛋白而无需使用杆状病毒进行感染。然而, 构建这个生产用细胞系所用的载体及方法也为构建具有新
巨细胞病毒的定义和分布
巨细胞病毒(Cytomegalovirus)是一种疱疹病毒组DNA病毒。亦称细胞包涵体病毒,由于感染的细胞肿大,并具有巨大的核内包涵体。巨细胞病毒分布广泛,其他动物皆可遭受感染,引起以生殖泌尿系统,中枢神经系统和肝脏疾患为主的各系统感染,从轻微无症状感染直到严重缺陷或死亡。
慢病毒感染目的细胞实验步骤
1. 感染预实验以 24 孔培养板为例,同时进行目的细胞和工具细胞的感染预实验。工具细胞可选择 293T(人胚肾上皮细胞)、H1299(人肺癌细胞)或其它细胞。实验材料:培养基、24 孔培养板,移液枪,枪头, EP 管,细胞计数板、冰盒、废液缸等。(根据目的细胞情况,可酌情使用 Polybrene)
昆虫细胞高MOI杆病毒感染
高MOI( Multiplicity Of Infection,等于用于感染的病毒数目与细胞数目的比值)感染是生产蛋白的最好方法。这有两个原因。一是不用考虑DIP(Defective Interfering Particles,即只包装入部分基因组的病毒颗粒)的形成,因为关心的是细胞或者培养液中的蛋
巨细胞病毒感染诊断方案
巨细胞病毒感染诊断方案 中华医学会儿科学分会感染消化学组 (1998年11月,湖北宜昌) 巨细胞病毒感染( cytomegalovirus infection )是由人巨细胞病毒( human cytomegalovirus,CMV )引起的人类感染性疾病。CMV感染
外无细胞体系翻译病毒-mRNA
实验材料 ATP GTP 质粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 胶肌酸磷酸激酶 核酸酶 tRNAHeLaS3 细胞 TgSVA 细胞 Lx 细胞来源于表达人脊髓灰质炎病毒受体的 Ltk 细胞 NS20Y 细胞 人肝癌来源的 HepG2 细胞试剂、试剂盒 HEPES-KOH Tris-HCl 等渗
小儿巨细胞病毒肺炎的病理
肺部病变广泛,与其他间质性肺炎相似,巨细胞病毒肺炎的特点是终末气道肺泡壁及肺泡腔可见许多巨细胞,其中含核内包涵体和胞质内包涵体,这些包涵体亦可见于唾液腺、肾、胃肠道、肝、脑等器官。此外,肺间质和肺泡内均有单核细胞浸润及富含蛋白质的液体。
单核细胞高是病毒还是细菌
病毒。单核细胞高也叫单核细胞增多症,是由EBV病毒(一种接触传染性病毒,Epstein-Barrvirus)所致的急性自限性传染病。其临床特征为发热,咽喉炎,肝脾淋巴结肿大,外周血淋巴细胞显著增多并出现异常淋巴细胞,嗜异性凝集试验阳性,感染后体内出现抗EBV抗体。青少年及年轻成年人较易发生(12到4
巨细胞病毒免疫球蛋白
中文名称巨细胞病毒免疫球蛋白英文名称cytomegalovirus immunoglobulin定 义针对巨细胞病毒的特异性免疫球蛋白。应用学科免疫学(一级学科),免疫病理、临床免疫(二级学科),感染免疫(三级学科)
细胞因子的抗病毒作用
细胞毒效应细胞(CTL、NK及活化的巨噬细胞)与靶细胞结合后,通过释放出的细胞毒性物质杀伤病毒感染的靶细胞,前已述及。近年来在小鼠体内实验中证实,活化的T细胞释放的LL-2促使T细胞、NK细胞、单核巨噬细胞在病毒感染的部位大量聚集,释放IFN-γ、IFN-α并形成足够的浓度,从而在基因转录、翻译
巨细胞病毒行肺炎的简介
巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)是以受感染细胞形成巨大的A型嗜酸性核内及胞质内包涵体为特征的病毒性肺炎。大多数是无症状隐性感染,但在免疫功能低下和婴儿中可引起严重的肺部感染而导致死亡。移植后发生巨细胞病毒性肺炎存在两种临床表现:1.急进型在移植后1~2月即出现发热、咳嗽、不适
简述巨细胞病毒的免疫功能
机体的细胞免疫功能对CMV感染的发生和发展起重要作用,细胞免疫缺陷者,可导致严重的和长期的CMV感染,并使机体的细胞免疫进一步受到抑制,如杀伤性T细胞活力下降,NK细胞功能减低等。 机体原发感染CMV后能产生特异性抗体和杀伤性T淋巴细胞,激活NM细胞。抗体有限CMV复制能力,对相同毒株再感染有