电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthopedic Oncology, Fourth Military Medical University, Xi'an 710038, China 摘 要 电穿孔技术利用电场造成细胞膜的改变从而将DNA导入细胞内,同时还可用于细胞融合以及动物克隆等。基因电转移的效率通常比化学法提高1-2个数量级,主要与脉冲波形、长度、缓冲液等有关。方波直流电脉冲应用广泛,在有关细胞核移植的多项研究报告中均指出其重要作用。关键词 基因转移,胚胎克隆,电穿孔 过去十年中,关于基因功能的研究取得了丰硕的成果,并因此带动了基因工程、基因治疗以及单克隆抗体技......阅读全文
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038Institute of Orthopedi
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Insti
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthopedic Oncology, Fourth Military Medical University, Xi''an 710038
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthop
电穿孔技术医疗应用
不可逆的电穿孔在Gustave Roussy研究所,由Lluis M Mir领导的第一批研究医疗应用的电穿孔。在这种情况下,他们研究了使用可逆电穿孔与不可渗透的大分子。东弗吉尼亚医学院和奥多明尼昂大学的研究人员首先研究了如何在人类细胞上使用纳秒脉冲,并于2003年出版。关于不可逆的电穿孔,2007年
电穿孔技术的应用
当细胞置于非常高的电场中,细胞膜就变得具有通透性,能让外界的分子扩散进细胞内,这一现象称为电穿孔。运用这一技术,许多物质,包括DNA、RNA、蛋白质、药物、抗体和荧光探针都能载入细胞。作为一种基因转导方法,电穿孔已被广泛用于各种细胞类型,包括细菌、酵母、植物和动物细胞;而且,它还能作为注射方法(称为
电穿孔技术的医学应用特点
不可逆的电穿孔在Gustave Roussy研究所,由Lluis M Mir领导的第一批研究医疗应用的电穿孔。在这种情况下,他们研究了使用可逆电穿孔与不可渗透的大分子。东弗吉尼亚医学院和奥多明尼昂大学的研究人员首先研究了如何在人类细胞上使用纳秒脉冲,并于2003年出版。关于不可逆的电穿孔,2007年
电穿孔或电渗透的医疗应用
不可逆的电穿孔在Gustave Roussy研究所,由Lluis M Mir领导的第一批研究医疗应用的电穿孔。在这种情况下,他们研究了使用可逆电穿孔与不可渗透的大分子。东弗吉尼亚医学院和奥多明尼昂大学的研究人员首先研究了如何在人类细胞上使用纳秒脉冲,并于2003年出版。关于不可逆的电穿孔,2007年
电穿孔的方法概念和应用特点
电穿孔(Electroporation)也叫电转染,是通过高强度的电场作用,瞬时提高细胞膜的通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA 与RNA、蛋白、糖类、染料及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对其它物理和化学转化方法,是一种有价值和有效的替代方法。
电穿孔技术应用与药物和基因传递
电穿孔还可以用于通过施加瞬时透化细胞膜的短且强烈的电脉冲来帮助将药物或基因递送到细胞中,从而允许运输分子,否则不能通过细胞膜运输。当待输送的分子是DNA时,这个过程被称为电化学疗法,当待输送的分子是化学治疗剂或基因电转移时。来自卡罗林斯卡研究所和牛津大学的科学家使用外来体的电穿孔在全身注射(在血液中
电穿孔的
脂双层力学电穿孔允许细胞引入高度带电荷的分子,例如不会被动地扩散穿过疏水性双层核心的DNA。这一现象表明,该机制是在膜上形成纳米级的充水空穴。虽然电穿孔和介电击穿这两者都是由电场的应用引起的,所涉及的机制是根本不同的。在电介质击穿中,阻挡材料被电离,产生导电通路。材料的变化因此是化学性质的。相比之下
转基因技术的发展及其在转基因动植物的应用
自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来,我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式:针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用,从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大阻碍了农业的发展,迫切地需要
转基因技术的发展及其在转基因动植物的应用
自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来,我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式:针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用,从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大阻碍了农业的发展,迫切地需要
转基因技术的发展与转基因动植物
1.转基因技术的发展 自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来,我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式:针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用,从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大
转基因技术的发展与转基因动植物
1.转基因技术的发展 自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来,我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式:针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用,从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大
活体电穿孔法在基因治疗方面的应用
活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~115μm ,这种
转基因技术的发展及其在转基因动植物的应用(一)
转基因技术的发展自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来,我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式:针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用,从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大阻碍了农业的发展
电穿孔的概念
电穿孔(Electroporation)也叫电转染,是通过高强度的电场作用,瞬时提高细胞膜的通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA 与RNA、蛋白、糖类、染料及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对其它物理和化学转化方法,是一种有价值和有效的替代方法。电穿孔是功能强大
电穿孔技术简介
电穿孔(Electroporation)也叫电转染,是通过高强度的电场作用,瞬时提高细胞膜的通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA 与RNA、蛋白、糖类、染料及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对其它物理和化学转化方法,是一种有价值和有效的替代方法。
BTX特殊电极的应用汇总
BTX特殊电极的应用此次只将贴壁转染、活体等进行总结,对于大规模的转基因的应用,由于BTX公司有新的发展,故此次未将其列入,待下次完善后补充。1、Adherent Cell Transfections (ACT)贴壁细胞转染•In-situ electroporation of cells in t
BTX特殊电极的应用汇总
BTX特殊电极的应用 此次只将贴壁转染、活体等进行总结,对于大规模的转基因的应用,由于BTX公司有新的发展,故此次未将其列入,待下次完善后补充。 1、 Adherent Cell Transfections (ACT)贴壁细胞转染 • In-situ electroporat
转基因技术的发展及其在转基因动植物的应用(二)
体细胞核移植是近些年来新出现的一种转基因技术。该方法是先把外源基因与供体细胞在培养基中培养,使外源基因整合到供体细胞上,然后将供体细胞细胞核移植到受体细胞——去核卵母细胞,构成重建胚,再把其移植到假孕母体,待其妊娠、分娩,便可得到转基因的克隆动物。在这一技术中,外源基因的稳定表达和重建胚的良好发育是
酿酒酵母的电穿孔转化法实验_电穿孔转化法
实验材料细胞试剂、试剂盒PEG3350仪器、耗材YPAD 液体培养基涡旋振荡器实验步骤1. 将菌株接种 100 ml 的 YPAD 液体培养基,30℃ 振荡培养过夜,使细胞滴度达到每毫升 1X108 到 2X108 个细胞。2. 3000 g 离心 5 分钟沉淀细胞,用 100 ml 灭菌水洗两遍,
活体电穿孔法的基本信息介绍
近年来活体电穿孔法用于转基因研究的报道不断增多,在基因治疗方面的优势也日趋显著,是一种很好的活体基因导入方法。 活体电穿孔法可用于检测瞬时表达系统中载体的表达状况。大量的研究表明活体电穿孔法在基因治疗方面有非常好的应用前景。因此目国内外对活体电穿孔法介导外源基因转移的研究越来越多。
概述活体电穿孔法在基因治疗方面的应用
原来在基因治疗中利用活体电穿孔法将抗体或化疗药物导入肿瘤中,促进抗体和化疗药物的运送来进行治疗,现在则以特异的外源基因替代了抗体的应用,简化操作步骤同时降低了费用。 首先,在皮肤瘤和脑瘤的治疗中,电穿孔法可有效地将药物基因导入治疗部位。电穿孔法导入人单核细胞趋化物蛋白基因到大鼠脑瘤后,该蛋白在
如何选择BTX转基因仪(电转仪)?
1、确定目标对象:也就是你所有转的目的物是什么东西? 细胞系和细胞类型 细胞类型包括人类、哺乳动物、细菌、植物、藻类、霉菌、寄生虫等 细胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, Rice, Tomato,Tr
如何选择BTX转基因仪(电转仪)?(一)
1、确定目标对象:也就是你所有转的目的物是什么东西? 细胞系和细胞类型 细胞类型包括人类、哺乳动物、细菌、植物、藻类、霉菌、寄生虫等 细胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, Rice, Tomato
转基因技术的工业应用
工业领域的应用主要指在食品工业中的应用,主要包括:(1)对工业发酵食品菌种如酵母菌和乳酸菌的改良;(2)生产食品添加剂和加工助剂;(3)制造有益于人类健康的保健成分或有效因子,携带不同目的基因的转基因动植物可以成为人类治疗各种疑难杂症的资源丰富的药库。
转基因技术的渔业应用
利用转基因技术可以改善鱼类养殖性能,增强其抗寒抗病能力,已有多种哺乳类和鸟类的基因被成功地整合到鱼类的基因组中,使转基因鱼的肌肉蛋白含量和饲料转换率明显提高,生长速度加快。此外还可以生产医药制品,譬如将人胰岛素基因导入斑马鱼卵子中,其受精孵化后可生成胰岛素产物。还可利用转基因技术培养观赏鱼等用途。
基因重组应用——转基因技术
基因重组中转基因技术的理论基础来源于进化论衍生来的分子生物学。基因片段的来源可以是提取特定生物体基因组中所需要的目的基因,也可以是人工合成指定序列的DNA片段。基因重组DNA片段被转入特定生物中,与其本身的基因组进行重组,再从重组体中进行数代的人工选育,从而获得具有稳定表现特定的遗传性状的个体。该技