电穿孔技术简介
电穿孔(Electroporation)也叫电转染,是通过高强度的电场作用,瞬时提高细胞膜的通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA 与RNA、蛋白、糖类、染料及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对其它物理和化学转化方法,是一种有价值和有效的替代方法。......阅读全文
电穿孔技术简介
电穿孔(Electroporation)也叫电转染,是通过高强度的电场作用,瞬时提高细胞膜的通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA 与RNA、蛋白、糖类、染料及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对其它物理和化学转化方法,是一种有价值和有效的替代方法。
电穿孔的技术简介
电穿孔或电渗透是微生物学技术,其中将电场施加到细胞以增加细胞膜的渗透性,从而允许化学品,药物或DNA被引入细胞。在微生物学中,电穿孔过程通常用于通过引入新的编码DNA来转化细菌,酵母或植物原生质体。如果细菌和质粒混合在一起后,质粒可以在电穿孔后转移到细菌中,尽管取决于正在转移的细胞穿透肽或CellS
不可逆的电穿孔技术简介
在Gustave Roussy研究所,由Lluis M Mir领导的第一批研究医疗应用的电穿孔。在这种情况下,他们研究了使用可逆电穿孔与不可渗透的大分子。东弗吉尼亚医学院和奥多明尼昂大学的研究人员首先研究了如何在人类细胞上使用纳秒脉冲,并于2003年出版。关于不可逆的电穿孔,2007年,一组科学家在
电穿孔或电渗透的技术简介
电穿孔或电渗透是微生物学技术,其中将电场施加到细胞以增加细胞膜的渗透性,从而允许化学品,药物或DNA被引入细胞。在微生物学中,电穿孔过程通常用于通过引入新的编码DNA来转化细菌,酵母或植物原生质体。如果细菌和质粒混合在一起后,质粒可以在电穿孔后转移到细菌中,尽管取决于正在转移的细胞穿透肽或CellS
电穿孔的技术特点
电穿孔(Electroporation)也叫电转染,是通过高强度的电场作用,瞬时提高细胞膜的通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA 与RNA、蛋白、糖类、染料及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对其它物理和化学转化方法,是一种有价值和有效的替代方法。电穿孔是功能强大
电穿孔技术物理机制
脂双层力学电穿孔允许细胞引入高度带电荷的分子,例如不会被动地扩散穿过疏水性双层核心的DNA。这一现象表明,该机制是在膜上形成纳米级的充水空穴。虽然电穿孔和介电击穿这两者都是由电场的应用引起的,所涉及的机制是根本不同的。在电介质击穿中,阻挡材料被电离,产生导电通路。材料的变化因此是化学性质的。相比之下
电穿孔技术医疗应用
不可逆的电穿孔在Gustave Roussy研究所,由Lluis M Mir领导的第一批研究医疗应用的电穿孔。在这种情况下,他们研究了使用可逆电穿孔与不可渗透的大分子。东弗吉尼亚医学院和奥多明尼昂大学的研究人员首先研究了如何在人类细胞上使用纳秒脉冲,并于2003年出版。关于不可逆的电穿孔,2007年
电穿孔技术的应用
当细胞置于非常高的电场中,细胞膜就变得具有通透性,能让外界的分子扩散进细胞内,这一现象称为电穿孔。运用这一技术,许多物质,包括DNA、RNA、蛋白质、药物、抗体和荧光探针都能载入细胞。作为一种基因转导方法,电穿孔已被广泛用于各种细胞类型,包括细菌、酵母、植物和动物细胞;而且,它还能作为注射方法(称为
电穿孔技术的技术优势
与其他常用的导入外源物质的方法相比,电穿孔具有很多优点。首先,不必象显微注射那样使用玻璃针,不需要技术培训和昂贵的设备,可以一次对成百万的细胞进行注射。第二,与用化学物质相比,电穿孔几乎没有生物或化学副作用。第三,因为电穿孔是一种物理方法,较少依赖细胞类型,因而应用广泛。实际上,对大多数细胞类型,用
CRISPR重要成果:电穿孔技术
简单的电穿孔似乎使T细胞更容易接受新的遗传物质,这可以加速免疫疗法的发展。 加州大学旧金山分校的研究人员发表了题为“Reprogramming human T cell function and specificity with non-viral genome targeting”的文章,指
电穿孔技术的方法步骤
除了能使细胞膜具有通透性,让外界的分子扩散入胞液中以外,高强度的电场脉冲也能引起细胞融合,这一现象叫做电融合。然而,在用电脉冲融合前必须使细胞相互紧密接触,这一电融合方法在原生质融合制取杂交植物,胚胎细胞相互融合制备动物克隆方面非常有用,尤其在制取杂交瘤细胞制备单克隆抗体方面用处很大。几个实验室已证
电穿孔和电融合技术
实验概要了解细胞电穿孔(electroporation)和电融合(Electrofusion Method)的基本原理。学习电穿孔和电融合基本技术。实验原理当细胞置于非常高的电场中,细胞膜就变得具有通透性,能让外界的分子扩散进细胞内,这一现象称为电穿孔。运用这一技术,许多物质,包括DNA、 RN
电穿孔技术的物理机制
脂双层力学电穿孔允许细胞引入高度带电荷的分子,例如不会被动地扩散穿过疏水性双层核心的DNA。这一现象表明,该机制是在膜上形成纳米级的充水空穴。虽然电穿孔和介电击穿这两者都是由电场的应用引起的,所涉及的机制是根本不同的。在电介质击穿中,阻挡材料被电离,产生导电通路。材料的变化因此是化学性质的。相比之下
肿瘤治疗新技术:不可逆电穿孔技术
不可逆电穿孔技术(Irreversible electroporation,IRE)是一种电能产生的生物效应。当细胞暴露于短脉冲的高压电场时,细胞膜对于离子和大分子的通透性增加,形成纳米级孔隙,使细胞内外物质交换程度加大,该效应即为电穿孔。电穿孔可以是可逆的,也可以是不可逆的。特定条件(如极大的
电穿孔技术实验室实践
电穿孔是用电穿孔器,在细胞溶液中产生静电场的专用器具进行的。将细胞悬浮液被吸取到一具有两个铝玻璃或塑料比色皿电极在其两侧。对于细菌电穿孔,通常使用约50微升的悬浮液。在电穿孔之前,将这种细菌悬液与质粒混合被改变。将混合物移液到比色杯中,设定电压和电容,并将比色杯插入电穿孔仪中。该过程需要电极和悬架之
电穿孔技术的医学应用特点
不可逆的电穿孔在Gustave Roussy研究所,由Lluis M Mir领导的第一批研究医疗应用的电穿孔。在这种情况下,他们研究了使用可逆电穿孔与不可渗透的大分子。东弗吉尼亚医学院和奥多明尼昂大学的研究人员首先研究了如何在人类细胞上使用纳秒脉冲,并于2003年出版。关于不可逆的电穿孔,2007年
电穿孔技术应用与药物和基因传递
电穿孔还可以用于通过施加瞬时透化细胞膜的短且强烈的电脉冲来帮助将药物或基因递送到细胞中,从而允许运输分子,否则不能通过细胞膜运输。当待输送的分子是DNA时,这个过程被称为电化学疗法,当待输送的分子是化学治疗剂或基因电转移时。来自卡罗林斯卡研究所和牛津大学的科学家使用外来体的电穿孔在全身注射(在血液中
电穿孔的
脂双层力学电穿孔允许细胞引入高度带电荷的分子,例如不会被动地扩散穿过疏水性双层核心的DNA。这一现象表明,该机制是在膜上形成纳米级的充水空穴。虽然电穿孔和介电击穿这两者都是由电场的应用引起的,所涉及的机制是根本不同的。在电介质击穿中,阻挡材料被电离,产生导电通路。材料的变化因此是化学性质的。相比之下
电穿孔的概念
电穿孔(Electroporation)也叫电转染,是通过高强度的电场作用,瞬时提高细胞膜的通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA 与RNA、蛋白、糖类、染料及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对其它物理和化学转化方法,是一种有价值和有效的替代方法。电穿孔是功能强大
电穿孔技术增强艾滋病疫苗的响应
肌肉细胞:电让它们的膜在短时间里具有通透性 一场国际艾滋病会议的与会者得知,一种DNA疫苗给药的新方法可能导致更廉价和更有效的针对艾滋病病毒和其它病毒的保护方法。 DNA疫苗是由遗传物质的环组成,其中插入了来自致病微生物的基因。一旦进入人类细胞,这些基因就引发了细胞制造来
酿酒酵母的电穿孔转化法实验_电穿孔转化法
实验材料细胞试剂、试剂盒PEG3350仪器、耗材YPAD 液体培养基涡旋振荡器实验步骤1. 将菌株接种 100 ml 的 YPAD 液体培养基,30℃ 振荡培养过夜,使细胞滴度达到每毫升 1X108 到 2X108 个细胞。2. 3000 g 离心 5 分钟沉淀细胞,用 100 ml 灭菌水洗两遍,
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038Institute of Orthopedi
Genetics:电穿孔技术或提高CRISPR/Cas9系统效率
发表于国际杂志Genetics上的一篇研究论文中,来自美国杰克逊实验室(Jackson Laboratory)的研究人员通过研究表明,利用一种电流来运输CRISPR/Cas9系统对实验室小鼠进行工程化的遗传改造,或许可以明显而且有效地改善CRISPR/Cas9系统的作用效率。 CRISPR/C
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthopedic Oncology, Fourth Military Medical University, Xi''an 710038
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthop
电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Insti
什么是细胞电穿孔?
电穿孔(Electroporation)也叫电转染,是通过高强度的电场作用,瞬时提高细胞膜的通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA 与RNA、蛋白、糖类、染料及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对其它物理和化学转化方法,是一种有价值和有效的替代方法。电穿孔是功能强大
电穿孔法稳定转染
实验材料 L8057-Y10细胞 D-PBSA 仪器、耗材 培养瓶 培养板
电穿孔转染-DNA-实验
电穿孔可以有效地转染磷酸钙-DNA 沉淀物等其他方法转染效果不好的细胞系。但是,与其他转染方法一样,未使用过的细胞系进行电穿孔转染的实验条件要经过优化。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料指数生长的哺乳动物细胞培养液试剂、试剂盒Giem
电穿孔法稳定转染
方案27.12 脂质体介导的瞬时转染 实验材料 L8057-Y10细胞 D-PBSA