颜光涛：标记抗体在免疫治疗和诊断技术方面的应用
分析测试百科网讯 2016年6月1日-3日，在国际检验医学溯源联合委员会（JCTLM）的指导下，由国际计量局(BIPM)、中国计量科学研究院(NIM)和中国食品药品检定研究院(NIFDC)主办、成都市人民政府联合主办、中国分析测试协会(CAIA) 承办、全国临床医学计量技术委员会协办的“蛋白和肽类药物及诊断试剂研发与质控国际研讨会”在成都香格里拉大酒店隆重召开。解放军总医院生化科主任 颜光涛 解放军总医院生化科主任颜光涛带来《标记抗体在免疫治疗和诊断技术方面的应用》的精彩报告。 免疫诊断是采用抗原和抗体特异性的特异结合反应确定抗原或抗体的微量的方法。一些免疫诊断结果可以直接由抗原-抗体反应的组合观察到，但在目前，大多数免疫分析首选与同位素，酶，荧光标签标记抗原或抗体，通过测量放射性、吸光度或发光强度进行抗原或抗体的定性或定量测定。免疫诊断可分为辐射免疫测定法、酶联免疫吸附法（ELISA）、胶体金、时间分辨荧光、化学发光......阅读全文
标记免疫分析专业委员会2017年学术峰会闭幕
分析测试百科网讯 2017年6月30日-7月1日，由中国分析测试协会标记免疫分析专业委员会（以下简称标记免疫分析专委会）主办，中国人民解放军总医院承办，绍兴市生物医学工程学会协办的“标记免疫分析专业委员会2017年学术峰会”在绍兴市咸亨大酒店召开。大会第二日邀请了军事医学科学院放射与辐射医学研究
标记免疫分析专委会2017学术峰会媒体见面会在绍兴召开
分析测试百科网讯 2017年6月29日，由中国分析测试协会标记免疫分析专业委员会（以下简称标记免疫分析专委会）主办，中国人民解放军总医院承办，绍兴市生物医学工程学会协办的“标记免疫分析专业委员会2017年学术峰会媒体见面会”在绍兴市咸亨大酒店召开。标记免疫分析专委会主任委员颜光涛、绍兴加州国际纳
FITC标记抗体Marsshall氏法
材料：抗体球蛋白溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶（25—50ml）、冰及冰槽（或1000ml烧杯）、电磁搅拌器、灭菌吸管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯（500ml）、pH7.2或8.0的0.01mol/L PBS等； 方法
标记抗体的应用技术
实验方法原理 ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用
FITC标记抗体Chadwick氏法
试剂：抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%重碳酸钠水溶液、pH8.0的0.01mol/L PBS、1%硫柳汞； 材料：离心机及离心管、三角烧瓶（25ml）、冰槽、无菌吸管及毛细滴管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯（500ml）等； 方法与步骤：1. 抗体的准备。用0—4℃ pH8.0的PBS
酶标记抗体技术方法（三）
3. 结果判定： 除标记物IgG量的计算，略有不同以外，其余均同戊二醛法。 IgG量(mg／ml)＝(OD280nm-OD403nm×0.3)×0.62 4. 试剂及器材: (1) 0.1M NaIO４：称取241mg高碘酸钠(广州化学试剂厂，批号830602)溶于蒸馏水10ml中。 (2
酶标记抗体技术方法（二）
三、HRP标记抗体的方法 酶与抗体交联的方法有许多种,根据酶的结构不同可采用不同的方法。对于制备HRP结合物，可用戊二醛二步法和过碘酸钠法。尤以简易过碘酸钠法更为常用。 戊二醛二步法 1. 原理：戊二醛为一种双功能试剂，通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白
非标记抗体免疫电镜技术
一、原理 标记抗体法虽然具有许多优点，但也存在一些难以克服的问题，如标记抗体的分子增大，对细胞膜和组织的穿透力减弱；化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响；结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合，影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素，通过一系统的非标记抗体的免疫学反应，对组织
非标记抗体免疫电镜实验
实验方法原理 标记抗体法虽然具有许多优点，但也存在一些难以克服的问题，如标记抗体的分子增大，对细胞膜和组织的穿透力减弱；化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响；结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合，影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素，通过一系统的非标记抗体的免疫学反应，对组
非标记抗体免疫电镜技术
（一） 原理标记抗体法虽然具有许多优点，但也存在一些难以克服的问题，如标记抗体的分子增大，对细胞膜和组织的穿透力减弱；化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响；结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合，影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素，通过一系统的非标记抗体的免疫学反应，对组
酶标记抗体技术方法（一）
酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否，因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体，它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体，其次要有良好的制备方法。目前，高质
酶标抗体标记效果测定
酶标抗体标记效果测定：测定内容包括酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。
标记抗体的概念和应用
抗体经过酶标记、铁蛋白标记或通过胶体金标记获得标记抗体，是免疫电镜样品制备的一种方法，用于观察抗原抗体免疫复合物方面研究的手段。免疫标记技术是将一些既易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上，通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含量。抗体标记主要是用于抗原的
FITC标记抗体改良法
FITC标记抗体-改良法 试剂： 1.0.01mol/L pH7.2 配方。将NaCl 18g、Na2HPO4 1.15g、KH2PO4 0.2g， 溶于2000ml三蒸水中，调整pH至7.2； 2.0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液配法。量取0.5mol/L Na2CO3（5
FITC标记抗体Chadwick氏法
FITC标记抗体-Chadwick氏法试剂：抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%重碳酸钠水溶液、pH8.0的0.01mol/L 、1%硫柳汞；材料：离心机及离心管、三角烧瓶（25ml）、冰槽、无菌吸管及毛细滴管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯（500ml）等；方法与步骤：抗体的准备。用0—4℃ pH8.
FITC标记抗体Marsshall氏法
材料：抗体球蛋白溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶（25—50ml）、冰及冰槽（或1000ml烧杯）、电磁搅拌器、灭菌吸管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯（500ml）、pH7.2或8.0的0.01mol/L 等；方法与步骤：
单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和...2
单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和生物素标记)（3）移入透析袋中，在1000ml 0.01mol/L PH9.5碳酸盐缓冲液中，4℃透析过夜，更换三次缓冲液，注意避光。 （4）吸取上述醛化好的HRP溶液3ml，加入5mg IgG的碳酸盐缓冲液1ml，室温轻搅2-3小时，避光；加入5m
单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和...1
目前动物用单抗，在动物疫病诊断和检疫、妊娠检测、性别鉴定等方面有广泛的应用，大多以诊断试剂（盒）的形式提供，其中核心试剂为标记的单抗。下面将介绍最常用的几种标记技术。 一、酶标记 1、辣根过氧化物酶（HRP）标记 辣根过氧化物酶（HRP）标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖
光亲和标记的原理和应用
中文名称光亲和标记英文名称photoaffinity labeling定 义应用化学标记试剂R-P的亲和标记法。其中R能特异、可逆地与拟标记分子的活性部位结合，P是在黑暗中不起反应的基团，经光激活作用后，R-P转变为高度活化的中间产物，在结合的部位与拟标记分子形成共价键连接而标记。P可以是亲和物质
标记抗体的应用技术——125I标记单克隆抗体竞争结合试验
实验方法原理125I标记的单克隆抗体能与具有相应抗原的细胞结合，有数百倍以上未标记的特异性抗体同时存在的条件下，则标记抗体的结合受到竞争性抑制。根据不同稀释度抗体分别与相同数量细胞结合后所测得的特异性计数值，可以计算出每个细胞表面的平均抗原密度以及抗原和抗体的亲和力。实验材料细胞McAb抗体试剂、试
颜光美－－迈出抗癌长征第一步
“癌症这件事情非常复杂，复杂性超出我们的预期。”提到自己的研究，颜光美先做了这样的背景介绍。这位湖南口音的学者具有把一项科学研究讲得曲折跌宕又峰回路转的天分。他的一个学生说，“你真该去听听颜老师讲课”，有几个学生都是听过他的课后，来到了中山大学医学院那间实验室。 根据中大官网上的
标免会2023学术峰会盛大开启－多款IVD新品抢先看
2023年4月13日，由中国分析测试协会标记免疫分析专业委员会举办的“中国分析测试协会标记免疫分析专业委员会2023学术峰会开展仪式及新产品发布会”在浙江湖州盛大召开。分析测试百科网作为本届会议支持媒体，进行全程跟踪报道。 本届学术峰会以“精准诊断、守护健康”为主题，邀请了业界著名专家学者分享
2024年标记免疫分析峰会盛大开幕，大咖齐聚襄阳共话IVD前沿技术
——中国分析测试协会标记免疫分析专业委员会2024学术峰会开幕2024年4月18日-20日，由中国分析测试协会标记免疫分析专业委员会举办的“中国分析测试协会标记免疫分析专业委员会2024学术峰会”在湖北襄阳盛大召开。本届学术峰会以“精准诊断、维护健康”为主题，邀请了业界著名专家学者分享前沿学术研究成
藻红蛋白标记抗体的方法﹠PE标记蛋白A方法
藻红蛋白标记抗体的方法：1. 巯基化藻红蛋白（PE）的制备；（1） 将600μl浓度为15.5mg/ml的盐酸巯醇亚胺加到1.2ml浓度为3.6mg/ml的PE中；（2） 将以上混合液和1.2ml pH6.8的PB混合，而后装入透析袋置入50mmol/L p
藻红蛋白标记抗体的方法﹠PE标记蛋白A方法
藻红蛋白标记抗体的方法﹠PE-标记蛋白A方法 藻红蛋白标记抗体的方法： 1. 巯基化藻红蛋白（PE）的制备； （1） 将600μl浓度为15.5mg/ml的盐酸巯醇亚胺加到1.2ml浓度为3.6mg/ml的PE中； （2） 将以上混合液和1.2ml pH6.
免疫球蛋白标记技术_荧光素标记抗体技术
实验方法原理目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素（Fluorescein isothiocynate，FITC）或罗达明（Lissamine rhodamine B200，RB200）。在碱性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε氨基共价结合，标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力。在荧
荧光素标记抗体的操作步骤
FITC荧光素标记抗体的操作步骤 www.runwelltac.com当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键（thiocarbmide）结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖
酶标记抗体或抗原的制备
标记方法应符合：技术方法简单、产率高，且重复性好；标记反应不影响酶和抗原或抗体的活性；酶标志物稳定，应避免酶、抗体（抗原）以及酶标志物各自形成聚合物等。 1.戊二醛交联法：同源双功能交联剂 （1）一步法：连接AP。 ①优点：操作简便、有效，重复性好。 ②缺点：交联时分子间比例不严格，大小
抗体的生物素化标记
本法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后，生物素化的分子可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测。小分子的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础。 NHSB：N-羟基琥珀酰亚胺生物素（有商品供应） 0.1 mol/L 碳酸氢钠缓冲液
非标记抗体免疫电镜操作步骤
1．经典法（1）将被检病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀释的特异性免疫血清0.1ml充分混合。（2）置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃过夜。（3）以17 000r/min～23 000r/min离心90min。（4）吸去上清，将离心管口倒置于滤纸上，吸去残留液体。（5）沉淀物中加少量H2