NK细胞滋养层培养技术，前路何在？
NK细胞培养吸引了众多目光。培养技术一直有两种：一种是便宜的滋养层培养技术，一种是昂贵的纯因子培养技术。两种培养技术各有粉丝，原本相安无事，但在生物谷举办的2017（第八届）细胞治疗国际研讨会上，北京一家专注于无血清培养基研发与生产的公司打破了其中的平衡，推出了3000+的纯因子培养方案，让NK细胞培养产品市场更有看头。 NK细胞的培养，一直吸引着众多研究资源。 NK细胞培养一直存在两种培养方式。一种是滋养层细胞培养方式，首先获得具有不分裂不增殖但仍保持代谢活性的滋养层细胞。该细胞通过基因工程技术进行改造，再经过钴60辐照，细胞膜表面稳定表达多种细胞因子，在多种细胞因子协同作用下，外周血单个核细胞中的自然杀伤细胞得到定向激活和扩增.该种培养方式的价格相对便宜，仅有3000元左右。从培养结果来看，细胞收获量可达到20亿/L的水平，NK表型阳性率达到80%-90%左右。价格便宜加上效果稳定，这种滋养层细胞培养方式在国内......阅读全文
NK细胞体外培养方法之纯因子培养
关于NK细胞培养，也许您还在疑惑为什么细胞培养到后期生长缓慢？为什么细胞扩增状态不理想？培养过程中补液标准判断的依据是什么？为了解决实验中遇到的种种问题，减少摸索的苦恼，我们特地为大家精心准备了NK试剂盒教学视频以及实验操作要点等，有了这篇干货，相信大家就能轻松搞定实验中的疑难杂症。视频已备好，快识
NK细胞滋养层培养技术，前路何在？
NK细胞培养吸引了众多目光。培养技术一直有两种：一种是便宜的滋养层培养技术，一种是昂贵的纯因子培养技术。两种培养技术各有粉丝，原本相安无事，但在生物谷举办的2017（第八届）细胞治疗国际研讨会上，北京一家专注于无血清培养基研发与生产的公司打破了其中的平衡，推出了3000+的纯因子培养方案，
NK细胞培养与优化
因NK细胞是一种比较难培养的细胞。培养过程会涉及很多问题，如：细胞接种密度如何？NK细胞有哪些特性？NK细胞具有哪些形态特征？...... 使用的NK细胞培养套装为无饲养层细胞体外扩增技术，以外周血单个核细胞（PBMC）为起始种子细胞，结合多种细胞因子的诱导和刺激，实现NK细胞体外特
采用试剂盒因子法体外培养NK细胞的方法
Nk细胞又称自然杀伤细胞，是人体内抗癌活性最强的免疫细胞之一，它在骨髓中发育成熟后，主要存在于外周血、肝脏、腹膜腔和胎盘中，在遇到肿瘤病变细胞时就会把它们杀死，同时也会刺激身体产生抗肿瘤的免疫反应，所以被医学界称为“抗癌的第一道防线”。NK细胞主要分布于外周血，占外周血淋巴细胞总数的5-10％，无需
肿瘤细胞培养技术要点
取材材料主要来源于外科手术或活检瘤组织，取材时避免用坏死组织，要挑选瘤细胞集中和活力较好的部位，瘤性转移淋巴结或胸腹水是较好的培养材料。取材后尽快培养，因故不能立即培养者，可冻存。其培养方法及冻存方法同前述正常组织。成纤维细胞排除在肿瘤组织中常混杂有一些成纤维细胞，培养时能与瘤细胞同时生长，并常压过
关于NK细胞的分泌细胞因子的介绍
活化的NK细胞可合成和分泌多种细胞因子，发挥调节免疫和造血作用以及直接杀伤靶细胞的作用。 此外，NK细胞可抑制PWM体外诱导B细胞的 分化及抗体应答， 其机理可能通过直接抑制B 细胞或抑制辅佐细胞的抗原提呈作用。NK细胞通过自然杀伤和ADCC发挥的细胞毒作用，在机体抗病毒感染、免疫监视中起重要
细胞技术专题：肿瘤细胞原代培养实验
肿瘤细胞原代培养可以：（1）研究癌变机理；（2）研究抗癌药检测；（3）研究癌分子生物学；（4）用于阐明和解决癌症。详细 实验方法实验方法原理肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基，10%血清浓度即可，在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物，或原患者血清
NK细胞因子活化的杀伤作用
NK细胞的杀伤活性可通过某些细胞因子的诱导而显著增强，这样的细胞称为淋巴因子活化的杀伤细胞。外周血单个核细胞在含IL-2的培养基中孵育便可得到LAK细胞，NK细胞是其主要成分。用LAK细胞治疗肿瘤是颇有潜力的一种生物疗法。
培养基NK细胞的制备研究
NK细胞的制备方法，即通过联合细胞因子和饲养细胞的刺激作用，提高NK细胞的增殖速度和纯度。本发明的主要特点是：NCR3LG1和m?IL-15同时转染到K562细胞，m?IL-15可以调节NK细胞的活化和增殖，而NCR3LG1作为NK细胞表面主要的活化受体之一NKp30的配体，可以有效的刺激NK细胞
NK细胞免疫疗法肿瘤治疗新方向
俗话说得好，没有所谓的“一针见效，药到病除”，人类疾病都是长期积累的，随着年龄的增长，人体免疫系统抵抗癌症病毒的能力显著衰退，NK细胞增殖能力也下降。然而，由于NK细胞作为人体抵抗癌细胞和病毒感染的第一道防线，用于治疗癌症的种类也愈发多样化，本文小编简单讲一讲基于NK细胞的肿瘤免疫疗法，一起来
肿瘤细胞培养
肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置，首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性肿瘤细胞与体内正
肿瘤细胞培养
食管癌细胞株表达MMP－2：1.细胞种类：食管癌细胞株；2.培养的天数：2d;细胞倍增时间--24h左右；3.放大倍速：倒置荧光显微镜，100倍；4.培养基种类：1640+10%胎牛血清；5.细胞状态与特征简述:细胞贴壁生长；6.图片目的：鉴定食管癌细胞表达MMP-2，胞浆中绿色荧光为MMP-2，细
肿瘤细胞诱导血管生成模型实验——细胞培养技术
肿瘤细胞诱导血管生成实验模型可以用于：(1)建立体外实验模型，方便进一步研究；（2）观察肿瘤的生长特点以及其特殊性。实验方法原理无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤，一旦生长直径超过1~2 mm，都会有血管生成。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子，诱导血管生成。实验材料肿瘤细胞试剂、试剂盒DEM藻酸钠N
为什么人们不愿再用滋养层细胞的形式培养NK细胞？
NK细胞培养一直存在两种培养方式。一种是滋养层细胞培养方式，首先获得具有不分裂不增殖但仍保持代谢活性的滋养层细胞。该细胞通过基因工程技术进行改造，再经过钴60辐照，细胞膜表面稳定表达多种细胞因子，在多种细胞因子协同作用下，外周血单个核细胞中的自然杀伤细胞得到定向激活和扩增，该种培养方式的价格相对便宜
纯上皮细胞的培养方法
因此培养在有胶原的底物上可能利于生长，另外人或小鼠表皮在以3T3细胞为饲养层（用射线照射后）时，细胞易生长并可发生一定程度的分化现象。降低PH、Ca2 含量和温度，向培养基中加入表皮生长因子，均有利于表皮细胞生长。以表皮细胞为例，用皮肤表皮和分离培养法可获得纯上皮细胞，方法如下：1、 取材：外
NK细胞培养存在的问题与解决方法
自然杀伤细胞(natural killer cell，NK)是机体重要的免疫细胞，不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和免疫调节有关，而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。目前，NK细胞培养存在两种培养方式：1、滋养层细胞（人肿瘤细胞，即人白血病K562细胞）培养方式。首先获得具有不分裂不增殖但
NK细胞免疫疗法—肿瘤治疗新方向（一）
俗话说得好，没有所谓的“一针见效，药到病除”，人类疾病都是长期积累的，随着年龄的增长，人体免疫系统抵抗癌症病毒的能力显著衰退，NK细胞增殖能力也下降。然而，由于NK细胞作为人体抵抗癌细胞和病毒感染的第一道防线，用于治疗癌症的种类也愈发多样化，本文小编简单讲一讲基于NK细胞的肿瘤免疫疗法，一起来涨涨
NK细胞免疫疗法—肿瘤治疗新方向（二）
利用免疫检查点抑制剂来增强 NK 细胞的杀伤能力并应用于治疗也是目前研究的方向之一。某些激活的NK细胞表达PD-1，且 PD-1 信号介导抑制 NK 细胞发挥细胞毒作用。实验证实PD-1单抗（CT-011）增强 NK 细胞对多发性骨髓瘤患者自体骨髓瘤细胞的杀伤能力[6]；NK细胞与MHC-I
关于肿瘤细胞培养技术要点的介绍
取材 材料主要来源于外科手术或活检瘤组织，取材时避免用坏死组织，要挑选瘤细胞集中和活力较好的部位，瘤性转移淋巴结或胸腹水是较好的培养材料。取材后尽快培养，因故不能立即培养者，可冻存。其培养方法及冻存方法同前述正常组织。 成纤维细胞排除 在肿瘤组织中常混杂有一些成纤维细胞，培养时能与瘤细胞同
肿瘤细胞的培养（三）
三、成纤维细胞排除法 1．机械刮除法： 是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头（用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝）、或裹少许脱脂棉制成，装入试管中高压灭菌后备用（也可用特制电热烧灼器刮除）。刮除程序为： （1）标记：镜下观察，用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位； （2）刮除：弃掉培养液，把无菌胶刮伸
肿瘤细胞的培养（二）
二、培养方法 肿瘤细胞培养成功关键在于：取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面，肿瘤细胞培养与正常组织细胞培养并无原则差别，初代培养应用组织块和消化培养法均可。 1．取材： 人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要，体积较大的肿瘤组织中有退变或坏
肿瘤细胞培养实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 培养液Hanks胰蛋白酶EDTA胶原酶仪器、耗材 培养瓶离心管实验步骤 一、成纤维细胞排除法1. 机械刮除法 是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头（用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝），或裹少许脱脂棉制成，装入试管中高压灭菌后备用（也可用特制电热烧灼器刮除）。刮除程序为（1）标记镜下
肿瘤细胞的培养（四）
四、提高肿瘤细胞培养存活率和生长率措施 根据人们的经验，肿瘤细胞在体外不易培养，建立能传代的肿瘤细胞系更为困难。当肿瘤组织或细胞初代接种培养后，常出现以下几种情况： 完全无细胞游出或移动； 有细胞移动和游出，但无细胞增殖，细胞长时间处于停滞状态以致难以传代； 有细胞增殖，传若干代后停止生长或衰退死亡
肿瘤细胞培养实验
肿瘤细胞培养实验可用于：（1）研究肿瘤的发生机理；（2）研究生物学行为；（3）研究抗肿瘤药物。实验方法原理肿瘤组织及细胞在模拟体内生长环境的条件下、与一般组织细胞一样、也能够生长发育乃至繁殖、为研究癌变机理、抗癌药检测、肿瘤分子生物学提供大量的实验材料。实验材料肿瘤组织试剂、试剂盒培养液Hanks胰
肿瘤细胞的培养方法
肿瘤细胞培养成功关键在于：取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面，肿瘤细胞培养与正常组织细胞培养并无原则差别，初代培养应用组织块和消化培养法均可。1．取材：人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要，体积较大的肿瘤组织中有退变或坏死区，取材时尽量避
肿瘤细胞的培养（一）
肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置，首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。 一、组织培养肿瘤细胞生物学特性 肿瘤细胞与体
肿瘤细胞培养方法
肿瘤细胞培养成功关键在于：取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面，肿瘤细胞培养与正常组织细胞培养并无原则差别，初代培养应用组织块和消化培养法均可。1、取材：人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要，体积较大的肿瘤组织中有退变或坏死区，取材时尽量避
肿瘤细胞培养实验
肿瘤细胞培养实验 提高肿瘤细胞培养存活率和生长率的实验 实验方法原理 肿瘤组织及细胞在模拟体内生长环境的条件下、与一般组织细胞一样、也能够生长发育乃
自然杀伤细胞NK细胞的细胞表型
与T细胞、B细胞相比，NK细胞表面标志的特异性是相对的。人NK细胞mIg-，部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性，表达IL-2受体β链 （P75,CD122），CD11b/CD18阳性。常用检测NK细胞的标记有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。一种稳定表达在
自然杀伤细胞NK细胞的细胞功能
自然杀伤活性由于NK细胞的杀伤活性无MHC限制，不依赖抗体，因此称为自然杀伤活性。NK细胞胞浆丰富，含有较大的嗜天青颗粒，颗粒的含量与NK细胞的杀伤活性呈正相关。NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早，在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。NK细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞（包括部分细胞系）、病毒