NK细胞滋养层培养技术，前路何在？
NK细胞培养吸引了众多目光。培养技术一直有两种：一种是便宜的滋养层培养技术，一种是昂贵的纯因子培养技术。两种培养技术各有粉丝，原本相安无事，但在生物谷举办的2017（第八届）细胞治疗国际研讨会上，北京一家专注于无血清培养基研发与生产的公司打破了其中的平衡，推出了3000+的纯因子培养方案，让NK细胞培养产品市场更有看头。 NK细胞的培养，一直吸引着众多研究资源。 NK细胞培养一直存在两种培养方式。一种是滋养层细胞培养方式，首先获得具有不分裂不增殖但仍保持代谢活性的滋养层细胞。该细胞通过基因工程技术进行改造，再经过钴60辐照，细胞膜表面稳定表达多种细胞因子，在多种细胞因子协同作用下，外周血单个核细胞中的自然杀伤细胞得到定向激活和扩增.该种培养方式的价格相对便宜，仅有3000元左右。从培养结果来看，细胞收获量可达到20亿/L的水平，NK表型阳性率达到80%-90%左右。价格便宜加上效果稳定，这种滋养层细胞培养方式在国内......阅读全文
NK细胞的来源
NK细胞确切的来源还不十分清楚，一般变人直接从骨髓中衍生，其安育成熟信赖于骨髓的微环境。小鼠和人的体外实验表明，胸腺细胞在体外IL-2等细胞因子存在条件下培养也可诱导出NK细胞。小鼠脾脏在体内IL-3诱导下可促进NK细胞的分化。NK细胞主要分布于外周血中，占PBMC5-10%，淋巴结和骨髓中也
细胞生物基本方法：肿瘤细胞培养
肿瘤细胞培养特殊之处在于成纤维细胞的排除（成纤维细胞常与肿瘤细胞同时混杂生长，致难以纯化肿瘤组织）。有以下一些方法：1．机械刮除法2．反复帖壁法3．消化排除法4．胶原酶消化法 1） 机械刮除法1．标记：镜下观察，用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。2．刮除：弃掉培养液，把无菌胶刮伸入
体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验_细胞培养技术
实验方法原理体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验采取长时间药物处理、诱导抗性，最终筛选出具有一定抗性的细胞克隆。实验材料小鼠试剂、试剂盒小牛血清DMEMDOX仪器、耗材CO2培养箱无菌钢圈实验步骤一、培养条件用含10%小牛血清的DMEM培养液，5%CO2，37℃培养。二、实验步骤1. 将CHO细胞培养在
关于NK细胞的细胞表型介绍
与T细胞、B细胞相比，NK细胞表面标志的特异性是相对的。人NK细胞mIg-，部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性，表达IL-2受体β链 （P75,CD122），CD11b/CD18阳性。常用检测NK细胞的标记有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。 一种稳
NK细胞培养一直存在两种培养方式。
一种是滋养层细胞培养方式，首先获得具有不分裂不增殖但仍保持代谢活性的滋养层细胞。该细胞通过基因工程技术进行改造，再经过钴60辐照，细胞膜表面稳定表达多种细胞因子，在多种细胞因子协同作用下，外周血单个核细胞中的自然杀伤细胞得到定向激活和扩增，该种培养方式的价格相对便宜，仅有3000元左右。从培养结果来
抗癌新技术——CARML－NK细胞疗法
免疫疗法能提升患者免疫系统攻击癌细胞的能力，癌症治疗中一些最有希望的进展都集中在这一疗法上。但免疫疗法并非对所有患者都有效，研究人员一直在寻找提高免疫疗法有效性的方法。7月2日，在Blood杂志发表的一篇新研究中，华盛顿大学医学院的研究人员将免疫疗法的两种策略CAR（嵌合抗原受体）工程化和记忆样（m
肿瘤细胞原代培养实验——脱落细胞法
实验方法原理脱落细胞法是指采集人体各部位，特别是管腔器官表面的脱落细胞进行培养。实验材料肿瘤组织试剂、试剂盒完全培养基洗涤液仪器、耗材刀片培养箱培养皿实验步骤一、将新鲜的肿瘤组织去除脂肪和结缔组织。二、洗液洗2次后，用刀片将肿瘤组织切成细薄片。三、在切割的同时有许多上皮细胞脱落下来，脱落细胞经洗涤后
组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养3
5．其它方法：有人发现聚丙烯酰胺有抑制成纤维细胞生长的作用；也有人用聚蔗糖制备成比重1.025～1.085的密度梯度离心液，加入细胞悬液后，在 23℃中800g离心 10分种。在比重1.025～1.050层为成纤维细胞，在比重1.050～1.085层为上皮细胞，再经过分离进行培养。最近也有人
组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养1
肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置，首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。 一、组织培养肿瘤细胞生物学特性 肿瘤
组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养2
2．培养基： 肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格，一般常用的 RPMIl640、 DMEM、Mc-Coy5A等培养基等皆可用于肿瘤细胞培养。肿瘤细胞对血清的需求比正常细胞低，正常细胞培养不加血清不能生长，肿瘤细胞在低血清培养基中也能生长。肿瘤细胞对培养环境适应性较大，是因肿瘤细胞有自泌（Aut
结肠直肠肿瘤细胞的培养
实验方法原理 通常用酶消化腺瘤，用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞，可用酶消化方法分离。 实验材料 用于传代培养的D
结肠直肠肿瘤细胞的培养
通常用酶消化腺瘤，用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞，可用酶消化方法分离。实验方法原理通常用酶消化腺瘤，用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞，可用酶消化方法分离。实验材料用于传代培养的Dispase试剂、试剂盒生长培养液洗液消
结肠直肠肿瘤细胞的培养
实验方法原理 通常用酶消化腺瘤，用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞，可用酶消化方法分离。 实验材料 用于传代培养的D
肿瘤细胞原代培养实验
组织块法 酶消化法 脱落细胞法 实验方法原理 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基，10%血
肿瘤细胞原代培养实验
组织块法 酶消化法 脱落细胞法 实验方法原理 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基，10%血
肿瘤细胞原代培养实验
实验方法原理 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基，10%血清浓度即可，在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物，或原患者血清（1%-2%）以利细胞生长。用细胞生长因子如胰岛素、氢化可的松、雌激素等等。也可以考虑动物媒介培养。根据细胞种类不同选用
结肠直肠肿瘤细胞的培养
实验方法原理 通常用酶消化腺瘤，用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞，可用酶消化方法分离。实验材料 用于传代培养的Dispase试剂、试剂盒 生长培养液洗液消化液仪器、耗材 培养瓶实验步骤 一、酶消化1. 用洗液（洗液：添加 5% FBS、200 U/ml 青霉素
培养肿瘤细胞用什么培养基
肿瘤细胞最好培养了，M199，RPMI-1640，DMEM都可以。我常用的是1640.
关于NK细胞活性测定(NK)的基本介绍
自然杀伤(NK)细胞是一群异质性多功能的免疫细胞，是与特异性免疫应答无关的自然毒杀伤细胞。它对体内多种细胞，特别是T、B淋巴细胞有调节作用。它所介导的裂解细胞作用不受主要组织相溶性复合体的限制。自然杀伤细胞不仅对癌细胞，对病毒、胞内寄生菌和老化变异细胞也具有极强的清除作用。NK细胞起杀伤作用不需
NK细胞有什么作用？
NK细胞是天然免疫系统中一类十分重要的淋巴细胞，由于其杀伤作用是自发的，无需有抗体存在或预先加以致敏，因此将其命名为自然杀伤细胞。它通过其细胞毒活性和产生淋巴因子，在机体抗感染、抗肿瘤、免疫调节和造血调控等方面发挥重要的免疫功能。 NK细胞和杀伤T细胞在清除病原生物感染靶细胞方面有着相似的功能
癌症中的NK细胞
NK细胞在防御实体瘤及其扩散方面发挥着核心作用。研究表明，外周血中的NK活性与总体癌症风险的降低有关，肿瘤浸润性NK细胞是多种恶性肿瘤的阳性预后标志物。尽管NK细胞对于浸润肿瘤组织和消除实体瘤的能力较差，但NK细胞可能位于间质外围，募集树突状细胞，这些细胞随后迁移到次级淋巴器官，在那里它们加速反应性
NK细胞计数的简介
自然杀伤细胞（natural killer cell，NK）具有本身的形态、表型及功能特征。NK细胞的确切来源还不十分清楚，一般认为直接从骨髓中衍生，其发育成熟依赖于骨髓的微环境。它分布广泛，在外周血及脾脏中较多，淋巴结和骨髓次之。NK细胞绝大部分为大颗粒淋巴细胞，免疫表型为 CD3+、CD4+
NK细胞活性测定实验
实验方法原理 用放射性核素标记靶细胞，当靶细胞受到破坏时，放射性核素被释放出来，通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性，即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。实验材料 靶细胞试剂、试
AntiαFR－NK92细胞抗肿瘤效应的应用
卵巢癌是最常见和最致命的在妇科肿瘤。因缺乏有效的早期诊断方法，>60%的卵巢癌患者确诊时已经发展为中晚期。虽然卵巢癌的治疗方案有所改善，但患者的5年生存率并没有明显提高。大量的研究已经证实, 嵌合抗原受体T细胞免疫疗法（CART）是一种有效的抗肿瘤治疗方法，一些临床试验已经证实了CAR-T细胞对多种
Cell子刊：肿瘤微环境NK细胞代谢失调功能紊乱
越来越多的研究表明，肿瘤生长过程中，肿瘤细胞可以通过多种机制诱导NK细胞功能紊乱，从而逃避NK细胞的监视。肿瘤发生发展是一个漫长的过程，主要包括起始期、促进期和进展期三个阶段。而在这整个过程中，NK细胞与肿瘤细胞如何相互作用仍不得而知。 NK细胞是一种效应淋巴细胞，在机体抵抗肿瘤过程中发挥至关
Nature：科学家首次纯体外培养，干细胞“变”卵细胞
在体外，从胚胎干细胞分化而成的成熟卵细胞（图片来源：Hayashi实验室） 10月17日，《Nature》期刊在线发表一篇重磅文章，揭示日本科学家成功在实验室利用小鼠胚胎干细胞（ESCs）和诱导性多能干细胞（iPSCs）培育出成熟且具有生育能力的卵细胞。 这一研究为卵细胞发育研究提供了范本，且有
外周血自然杀伤细胞（NK）细胞的检测
实验步骤展开
自然杀伤细胞NK细胞的活化途径
通过CD3分子的ζ链NK细胞不表达TCR/CD3复合物，但部分NK细胞表达CD3ζ链，当用CD16抗体刺激NK细胞活化时，ζ链发生酪氨酸磷酸化，引起胞浆内Ca2+ 浓度升高，IP3水平增加，促进细胞因子合成和ADCC作用。通过CD2分子CD2与CD58相互作用或用CD2 McAb刺激可活化NK细胞，
外周血自然杀伤细胞（NK）细胞的检测
外周血自然杀伤细胞（NK）细胞的检测 实验步骤
免疫细胞的NK淋巴细胞介绍
NK细胞（natural killer cell，自然杀伤细胞）是与T、B细胞并列的第三类群淋巴细胞。NK细胞数量较少，在外周血中约占淋巴细胞总数的15%，在脾内约有3%~4%，也可出现在肺脏、肝脏和肠粘膜，但在胸腺、淋巴结和胸导管中罕见。 NK细胞较大，含有胞浆颗粒，故称大颗粒淋巴细胞。NK