结肠直肠肿瘤细胞的培养
实验方法原理 通常用酶消化腺瘤,用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞,可用酶消化方法分离。实验材料 用于传代培养的Dispase试剂、试剂盒 生长培养液洗液消化液仪器、耗材 培养瓶实验步骤 一、酶消化1. 用洗液(洗液:添加 5% FBS、200 U/ml 青霉素、200 μg/ml 链霉素和 50 μg/ml 庆大霉素。在原代培养时,庆大霉素的作用至少维持一周,然后除去。)清洗肿瘤标本 4 次。2. 将组织块放入小量洗液中,洗液恰好浸没组织块(避免组织干)。用交叉的手术刀片或锋利手术剪将组织块剖成约 1 mm3 小块。3. 通过用台式离心机离心(300 g,3 min),将组织块清洗 4 次。清洗次数以经验而定,并根据细胞污染情况。4. 将组织块放入消化液(消化液:DMEM,添加的抗菌素同洗液,并添加 1.5 mg/ml 胶原蛋白酶( IV型,Worthington)、0.25 mg......阅读全文
结肠直肠肿瘤细胞的培养
实验方法原理 通常用酶消化腺瘤,用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞,可用酶消化方法分离。 实验材料 用于传代培养的D
结肠直肠肿瘤细胞的培养
通常用酶消化腺瘤,用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞,可用酶消化方法分离。实验方法原理通常用酶消化腺瘤,用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞,可用酶消化方法分离。实验材料用于传代培养的Dispase试剂、试剂盒生长培养液洗液消
结肠直肠肿瘤细胞的培养
实验方法原理 通常用酶消化腺瘤,用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞,可用酶消化方法分离。 实验材料 用于传代培养的D
结肠直肠肿瘤细胞的培养
实验方法原理 通常用酶消化腺瘤,用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞,可用酶消化方法分离。实验材料 用于传代培养的Dispase试剂、试剂盒 生长培养液洗液消化液仪器、耗材 培养瓶实验步骤 一、酶消化1. 用洗液(洗液:添加 5% FBS、200 U/ml 青霉素
直肠肿瘤的简介
直肠肿瘤是我们常见的一种恶性肿瘤,它严重的危害着我们的身体健康,在癌肿局限于直肠粘膜时便血作为唯一的早期症状占85%,可惜往往未被病人所重视。当时作肛指检查,多可触及肿块,中、晚期直肠癌患者除一般常见的食欲不振、体重减轻、贫血等全身症状外,尚有排便次数增多,排便不尽、便意频繁、里急后重等癌肿局部
肿瘤细胞的培养(四)
四、提高肿瘤细胞培养存活率和生长率措施 根据人们的经验,肿瘤细胞在体外不易培养,建立能传代的肿瘤细胞系更为困难。当肿瘤组织或细胞初代接种培养后,常出现以下几种情况: 完全无细胞游出或移动; 有细胞移动和游出,但无细胞增殖,细胞长时间处于停滞状态以致难以传代; 有细胞增殖,传若干代后停止生长或衰退死亡
肿瘤细胞的培养(一)
肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。 一、组织培养肿瘤细胞生物学特性 肿瘤细胞与体
肿瘤细胞的培养(三)
三、成纤维细胞排除法 1.机械刮除法: 是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头(用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝)、或裹少许脱脂棉制成,装入试管中高压灭菌后备用(也可用特制电热烧灼器刮除)。刮除程序为: (1)标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位; (2)刮除:弃掉培养液,把无菌胶刮伸
肿瘤细胞的培养方法
肿瘤细胞培养成功关键在于:取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面,肿瘤细胞培养与正常组织细胞培养并无原则差别,初代培养应用组织块和消化培养法均可。1.取材:人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要,体积较大的肿瘤组织中有退变或坏死区,取材时尽量避
肿瘤细胞的培养(二)
二、培养方法 肿瘤细胞培养成功关键在于:取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面,肿瘤细胞培养与正常组织细胞培养并无原则差别,初代培养应用组织块和消化培养法均可。 1.取材: 人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要,体积较大的肿瘤组织中有退变或坏
肿瘤细胞培养
食管癌细胞株表达MMP-2:1.细胞种类:食管癌细胞株;2.培养的天数:2d;细胞倍增时间--24h左右;3.放大倍速:倒置荧光显微镜,100倍;4.培养基种类:1640+10%胎牛血清;5.细胞状态与特征简述:细胞贴壁生长;6.图片目的:鉴定食管癌细胞表达MMP-2,胞浆中绿色荧光为MMP-2,细
肿瘤细胞培养
肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性肿瘤细胞与体内正
肿瘤细胞培养实验
肿瘤细胞培养实验可用于:(1)研究肿瘤的发生机理;(2)研究生物学行为;(3)研究抗肿瘤药物。实验方法原理肿瘤组织及细胞在模拟体内生长环境的条件下、与一般组织细胞一样、也能够生长发育乃至繁殖、为研究癌变机理、抗癌药检测、肿瘤分子生物学提供大量的实验材料。实验材料肿瘤组织试剂、试剂盒培养液Hanks胰
肿瘤细胞培养实验
肿瘤细胞培养实验 提高肿瘤细胞培养存活率和生长率的实验 实验方法原理 肿瘤组织及细胞在模拟体内生长环境的条件下、与一般组织细胞一样、也能够生长发育乃
肿瘤细胞培养方法
肿瘤细胞培养成功关键在于:取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面,肿瘤细胞培养与正常组织细胞培养并无原则差别,初代培养应用组织块和消化培养法均可。1、取材:人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要,体积较大的肿瘤组织中有退变或坏死区,取材时尽量避
肿瘤细胞培养实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 培养液Hanks胰蛋白酶EDTA胶原酶仪器、耗材 培养瓶离心管实验步骤 一、成纤维细胞排除法1. 机械刮除法 是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头(用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝),或裹少许脱脂棉制成,装入试管中高压灭菌后备用(也可用特制电热烧灼器刮除)。刮除程序为(1)标记镜下
原代培养结肠平滑肌细胞(HCSMC)
实验步骤:(一)、取SD 大鼠一只,实验时断椎处死。(二)、在无菌条件下快速自肛门上2 cm 取结肠10 cm 左右,生理盐水中反复灌肠冲洗。(三)、移入含300 U/ml青霉素、300 U/ml 链霉素的HepesRinger缓冲液中浸泡,肠段内外各15 min。(四)、将经抗生素浸泡过的肠段移入
培养肿瘤细胞用什么培养基
肿瘤细胞最好培养了,M199,RPMI-1640,DMEM都可以。我常用的是1640.
肿瘤细胞的原代培养方法
肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格,一般常用RPMI、DMEM、McCoy-5A等培养基,血清浓度不高,10%即可,建议最好在原代培养时能加入生长因子或原患者血清(1%-2%)以利细胞生长。培养方法很多,主要有组织块法、酶消化法、钽网法、脱落细胞法等。1.组织块法将取得的瘤组织去除脂肪、结缔组织
组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养1
肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。 一、组织培养肿瘤细胞生物学特性 肿瘤
组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养2
2.培养基: 肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格,一般常用的 RPMIl640、 DMEM、Mc-Coy5A等培养基等皆可用于肿瘤细胞培养。肿瘤细胞对血清的需求比正常细胞低,正常细胞培养不加血清不能生长,肿瘤细胞在低血清培养基中也能生长。肿瘤细胞对培养环境适应性较大,是因肿瘤细胞有自泌(Aut
组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养3
5.其它方法:有人发现聚丙烯酰胺有抑制成纤维细胞生长的作用;也有人用聚蔗糖制备成比重1.025~1.085的密度梯度离心液,加入细胞悬液后,在 23℃中800g离心 10分种。在比重1.025~1.050层为成纤维细胞,在比重1.050~1.085层为上皮细胞,再经过分离进行培养。最近也有人
研究发现导致结肠直肠癌的“罪魁祸首”
最近的研究发现,一种细菌可以驱使结肠直肠癌的肿瘤生长,这是癌症相关死亡的第二大原因。 人类肠道通常容纳数万亿种不同的微生物。虽然这些微生物对人类健康至关重要,但研究也显示了一些肠道细菌和不同肠道疾病(包括结肠直肠癌)之间的联系。 结肠直肠癌是美国癌症相关死亡的第二大原因,每年约有14万美国人
研究发现导致结肠直肠癌的“罪魁祸首”
最近的研究发现,一种细菌可以驱使结肠直肠癌的肿瘤生长,这是癌症相关死亡的第二大原因。 人类肠道通常容纳数万亿种不同的微生物。虽然这些微生物对人类健康至关重要,但研究也显示了一些肠道细菌和不同肠道疾病(包括结肠直肠癌)之间的联系。 结肠直肠癌是美国癌症相关死亡的第二大原因,每年约有14
肿瘤细胞原代培养实验
组织块法 酶消化法 脱落细胞法 实验方法原理 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血
肿瘤细胞培养技术要点
取材材料主要来源于外科手术或活检瘤组织,取材时避免用坏死组织,要挑选瘤细胞集中和活力较好的部位,瘤性转移淋巴结或胸腹水是较好的培养材料。取材后尽快培养,因故不能立即培养者,可冻存。其培养方法及冻存方法同前述正常组织。成纤维细胞排除在肿瘤组织中常混杂有一些成纤维细胞,培养时能与瘤细胞同时生长,并常压过
肿瘤细胞原代培养实验
实验方法原理 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血清浓度即可,在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清(1%-2%)以利细胞生长。用细胞生长因子如胰岛素、氢化可的松、雌激素等等。也可以考虑动物媒介培养。根据细胞种类不同选用
肿瘤细胞原代培养实验
组织块法 酶消化法 脱落细胞法 实验方法原理 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血
有救了!抑制结直肠肿瘤细胞的新机制来了
近日,德国维尔茨堡大学的科研人员在Nature Cell Biology上发表了题为“A MYC-GCN2-eIF2α negative feedback loop limits protein synthesis to prevent MYC-dependent apoptosis in co
细胞生物基本方法:肿瘤细胞培养
肿瘤细胞培养特殊之处在于成纤维细胞的排除(成纤维细胞常与肿瘤细胞同时混杂生长,致难以纯化肿瘤组织)。有以下一些方法:1.机械刮除法2.反复帖壁法3.消化排除法4.胶原酶消化法 1) 机械刮除法1.标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。2.刮除:弃掉培养液,把无菌胶刮伸入