武汉植物园倍半萜内酯生物合成研究取得进展
愈创木烷型内酯具有诸多药用活性,很多这类化合物具有较强抗癌功效,该类化合物在植物中通常只有万分之几的含量,如此低含量的合成限制了该类化合物的开发利用,但由于其显著药用价值,部分该类化合物仍被用于临床抗癌实验,比如人们从地中海地区的毒胡萝卜中分离出毒胡萝卜素(Thapsigargin),其衍生物已被开发成治疗前列腺癌的药物。 该类化合物分子结构中的内酯基团是其活性基团,也决定了其药用价值。按照内酯结构可将这类化合物分为两类即:C12,6以及C12,8内酯。目前,科学家已解析了C12,6内酯基团形成机制,但对于C12,8内酯基团形成的认识尚是一片空白。为了解析C12,8内酯基团的形成机制,中国科学院武汉植物园的科研人员利用菊科植物旋复花为研究材料,借助转录组测序技术揭开了C12,8内酯基团形成的神秘面纱,发现该种活性基团形成是利用吉马烷型化合物大根香叶烯A酸为底物,在特种细胞色素P450酶CYP71BL6的作用下在其C8位置形......阅读全文
人工构建酵母工程菌能够自动合成内酯化合物
愈创木烷型内酯具有诸多药用活性,很多这类化合物具有较强抗癌功效,此类化合物分子结构中的内酯基团是其活性基团。中国科学院武汉植物园科研人员近日揭开了内酯基团形成的神秘面纱,发现人工构建的酵母工程菌能够自动化合成内酯化合物。 愈创木烷型内酯类化合物在植物中通常只有万分之几的含量,如此低含量的合成限
武汉植物园倍半萜内酯生物合成研究取得进展
愈创木烷型内酯具有诸多药用活性,很多这类化合物具有较强抗癌功效,该类化合物在植物中通常只有万分之几的含量,如此低含量的合成限制了该类化合物的开发利用,但由于其显著药用价值,部分该类化合物仍被用于临床抗癌实验,比如人们从地中海地区的毒胡萝卜中分离出毒胡萝卜素(Thapsigargin),其衍生物已
生物细胞分子的常见基团
(一)羟基-OH 很多有机分子上含有羟基-OH,如醇、糖、核酸、蛋白质等。“羟”的字和音都由“氢氧”二字拼合而成。羟基与水有某些相似的性质,羟基是典型的极性基团,与水可形成氢键,因此,分子上羟基越多,亲水性就越大。羟基与电负性大的原子如-NH中的氮能形成氢键,氢键在维持蛋白质、核酸等大分子的空
荧光基团淬灭基团的类型
常见类型有:6-羧基荧光素、四氯-6-羧基荧光素、2,7-二甲基-4,5-二氯-6-羧基荧光素、六氯-6-甲基荧光素、CY3、6-羧基四甲基若丹明、ROX、LC RED640等。原理:当荧光物质浓度过大,荧光物质的分子和熄灭剂分子碰撞而损失能量,二者相互作用生成了本身不发光的的配位化合物。而且溶解氧
酵母活细胞染色
实验步骤展
酵母细胞破碎实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 玻璃珠破菌缓冲液仪器、耗材 玻璃珠拍打器实验步骤 1. 培养并收集酵母菌细胞,在酵母消解酶缓冲液重悬菌体沉淀之前,测定压紧细胞的体积,以下所有步骤均在4℃进行。2. 用1体积的玻璃珠破菌缓冲液重悬细胞。3. 用2体积的玻璃珠破菌缓沖液与细胞混合,加4体积冰冷的酸洗
酵母细胞质粒提取步骤和酵母细胞破壁方法
酵母细胞的细胞壁比较厚,不容易破壁,不如大肠杆菌的质粒 容易提取,最近做了些酿酒酵母的实验,从酿酒酵母中提取质粒,现在就总结下实验的方法和步骤。酵母细胞质粒提取 步骤1. 接种单菌落(待检测酵母细胞)于25mLYNB(补加氨基酸 营养物)培养基中,30℃振荡培养过夜。2.第二天取一滴菌液于进行显微镜
酵母细胞中质粒的加工实验——从酵母细胞中分离质粒
利用一个假定的突变通过互补作用克隆酵母菌基因的一般方法。该突变为cdc101-1,它对酵母菌的生长来说既是隐性的又是温度敏感的。它使酵母可以很正常地在30°C生长,而不能在37°C形成菌落。如果用一个酵母菌基因组文库转化cdc101-1菌株,通过分离温度不敏感菌落,那么就可能分离到一个可以互补这种突
酵母细胞的观察实验
酵母细胞的直径大约 5 pm,它们的很多重要特征在光学显微镜下都能够观察到。 在实验室中,最好定期在相差显微镜下观察酵母培养物,以掌握细胞的生理状态以及污染情况。很多现代酵母细胞生物学研究采用复杂检测方法,用蛋白质特异抗体或特异结合某些细胞器的荧光染料对酵母细胞染色,近来,开始使用绿色荧光蛋白(GF
酵母细胞的观察实验
酵母细胞的直径大约 5 pm,它们的很多重要特征在光学显微镜下都能够观察到。在实验室中,最好定期在相差显微镜下观察酵母培养物,以掌握细胞的生理状态以及污染情况。很多现代酵母细胞生物学研究采用复杂检测方法,用蛋白质特异抗体或特异结合某些细胞器的荧光染料对酵母细胞染色,近来,开始使用绿色荧光蛋白(G
酵母菌细胞密度检测
实验材料 酵母菌仪器、耗材 分光光度计离心机实验步骤 1. 在培养基中细胞的密度可以通过分光光度计测定的菌液在600 nm 波长的光密度OD600值来放映。2. 要得到可靠的测量结果,菌液最好稀释到OD600值1以下,在这个范围内,毎0.1OD600相对于约3×105细胞/ml。如此推算,1OD
酵母细胞核制备
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 细胞核缓冲液Ficoll缓冲液仪器、耗材 匀浆机实验步骤 1. 将酵母菌接种于YPD培养基(100 ml 到20 L),剧烈摇动或强制通气条件下培养至对数中期(OD600≈1~5)。培养物在预称重的离心瓶中于4℃, 1 500 g 离心5 min。 2. 确定酵母细
荧光探针的荧光基团怎么确定,识别基团怎么确定
荧光探针的荧光基团是探针分子中负责发光的部分。荧光基团的种类通常是已知的,因此可以通过观察探针的化学结构,预测探针分子中可能存在的荧光基团。荧光基团通常具有类似于苯环、萘环、吡啶环等共轭系统,这些共轭系统可以吸收光能,并在激发态下发生内部跃迁,释放出荧光。为了确定荧光基团的存在,可以使用各种分析技术
Taqman探针常用的报告基团和猝灭基团是什么
比较常用的是5-FAM +3-TAMRA
螺内酯
鉴别(1)取本品约10mg,加硫酸2ml,摇匀,溶液显橙黄色,有强烈黄绿色荧光,缓缓加热,溶液即变为深红色,并有硫化氢气体产生,遇湿润的醋酸铅试纸显暗黑色;将此溶液倾入约10ml的水中,成为黄绿色的乳状液2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。(3
螺内酯
鉴别(1)取本品约10mg,加硫酸2ml,摇匀,溶液显橙黄色,有强烈黄绿色荧光,缓缓加热,溶液即变为深红色,并有硫化氢气体产生,遇湿润的醋酸铅试纸显暗黑色;将此溶液倾入约10ml的水中,成为黄绿色的乳状液2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。(3
酵母细胞质粒分离实验
实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD仪器、耗材 接种针培养瓶摇床实验步骤 1. 挑取几个含质粒的酵母宿主菌菌落,接种于10 ml 非选择性培养基,于30℃培养过夜。 2. 在非选择性平板上于30℃培养2天以得到单菌落,大多数情况下,可以得到约200~300个单菌落(约每平板100个菌落)。 3.
酵母细胞质粒分离实验
在非选择性生长条件下,大多数大肠杆菌/酵母菌穿梭载体的丟失频率大约1%,采用本方案不易分离除去的一个质粒是内源性2 μm 质粒,2 μm DNA自发丢失的频率约为每代10-4。实验材料酵母试剂、试剂盒YPD仪器、耗材接种针培养瓶摇床实验步骤1. 挑取几个含质粒的酵母宿主菌菌落,接种于10 ml 非
酵母菌细胞融合实验
实验概要学习酵母菌原生质体制备和再生技术,为了解酵母菌为材料的外源基因转移等技术奠定基础。实验原理酵母菌如酿酒酵母,在遗传学和分子生物学的研究中有很大作用,尤其是近些年来,随着科技的进步,酵母菌的遗传操作如转化、基因克隆和外源基因在酵母受体中的表达等技术都有了突破性的进展。作为受体系统的酵母菌原生质
酵母菌细胞密度检测实验
实验材料酵母菌仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1. 在培养基中细胞的密度可以通过分光光度计测定的菌液在600 nm 波长的光密度OD600值来放映。2. 要得到可靠的测量结果,菌液最好稀释到OD600值1以下,在这个范围内,毎0.1OD600相对于约3×105细胞/ml。如此推算,1OD600
将DNA导入酵母细胞实验
实验方法原理 实验材料 待转化的酵母菌株试剂、试剂盒 YPD培养基YPAD培养基:添加30 mg L腺嘌呤半硫酸的YPD培养基高纯无菌水l0×TE缓冲液pH 7.5无菌10×乙酸锂储液:1 mol L乙酸锂pH 7.5 (用稀乙酸调pH)过滤除菌DNA :高分子质量单链载体DNA和待转化DN
酵母菌细胞的诱变实验
实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD磷酸钠缓冲液甲乙硫醚刀豆氨酸硫代硫酸钠仪器、耗材 试管摇床离心机平板实验步骤 1. 将过夜培养的待诱变酵母菌株转接于5 ml YPD培养基,于30℃继续培养。检查细胞密度,记录并调整到2×108细胞/ml。2. 转移1 ml 的菌悬液到无菌的离心管中。高速离心5
将DNA导入酵母细胞实验
乙酸锂转化 电穿孔转化 单链高分子质量载体DNA的制备 实验方法原理 实验材料
酿酒(芽殖)酵母和非洲粟酒裂殖酵母细胞的培养
实验概要本实验主要进行了了酿酒(芽殖)酵母和非洲粟酒裂殖酵母的培养,目的是掌握酵母细胞的培养方法及学会使用相差和微分干涉显微镜。实验原理酿酒(芽殖)酵母的培养在许多方面可以与大肠杆菌相比较。这种酵母可以用标准的微生物学技术在液体和固体培养基中进行培养。大多数酵母菌株在复合液体培养基中的倍增时间为90
fam荧光基团有毒吗
fam荧光基团有毒。在紫外可见近红外区有特征荧光,其荧光性质可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子对人体是有毒的。
什么是离去基团?
离去基团(leaving group),或称离去基,在化学反应中从一较大分子中脱离的原子或官能基,是亲核取代反应与消除反应中应用的术语。当离去基团共轭酸的pKa越小,离去基团越容易从其他分子中脱离。原因是因为当其共轭酸的pKa越小,相应离去基团不需和其他原子结合,以阴离子(或电中性离去基团)的形式存
极性基团概念及分类
分子中的电子分布产生显著电偶极矩的有机部分。这种基团对极性溶剂呈现亲和性,并决定了分子的亲水特性。介电性是指高聚物在电场作用下,表现出对静电能的储存和损耗的性质。通常用介电常数和介电损耗来表示。 根据高聚物中各种基团的有效偶极距μ,可以把高聚物按极性的大小分成四类:非极性(μ=0):聚乙烯、聚丙烯、
极性基团的亲水性
带有极性基团的分子,对水有大的亲和能力,可以吸引水分子,或溶解于水。这类分子形成的固体材料的表面,易被水所润湿。具有这种特性都是物质的亲水性。亲水性指分子能够透过氢键和水形成短暂键结的物理性质。因为热力学上合适,这种分子不只可以溶解在水里,也可以溶解在其他的极性溶液内。一个亲水性分子,或说分子的亲水
γ丁内酯与丁内酯有什么区别
(一)γ-丁内酯:化学名:α-羟基-β,β-二甲基-γ-丁内酯 化学式:C6H10O3(碳6氢10氧3) 。 适应范围:作为脑代谢的D-泛解酸内酯,主要用于生产泛酸钙。(二)丁内酯:“4-羟基丁酸”自身羧基与羟基缩合(首尾综合)失去一分子水而形成的酯类化合物。【4-羟基丁酸分子式】OⅡHO-(CH2
酵母细胞中质粒的加工实验
定位突变质粒缺口修复技术和等位基因修复技术实验材料酵母菌株试剂、试剂盒带选择标记的YRp或YCp质粒适当的限制性内切核酸酶相应选择标记突变的酵母菌质粒标记的选择培养基平板仪器、耗材培养皿实验步骤1)将目的基因亚克隆到带恰当的选择标记的YRp或YCp质粒上。2) 在基因内部的两个限制酶酶切位点上切割以