miR124a通过沉默FOXA2导致细胞内脂质积聚异常的机制探讨
参考文献:Mesenchyma stem cells as natural bio-factories for exosomes carrying miR-124a in the treatment of gliomas. Neuro-Oncology（IF7.786）关键技术：1. 重组病毒包装：慢病毒包装、稳转株；2. 分子生物学：Cre-loxP位点特异性重组酶系统；3. 检测分析：WST-1、Transwell、qRT-PCR、Western blot、纳米颗粒跟踪分析技术；4. 动物实验：裸鼠颅内移植瘤模型miR-124a通过沉默FOXA2导致细胞内脂质积聚异常从而引起细胞凋亡 胶质母细胞瘤是星形细胞肿瘤中恶性程度最高的胶质瘤，已有研究表明microRNAs（miRs）有希望成为胶质母细胞瘤的新型治疗方法。然而，何种miRs对抗胶质母细胞瘤的效果最佳，以及如何将miRs递送至胶质母细胞瘤是目前尚未......阅读全文
慢病毒包装实验
慢病毒载体包装之后成为假病毒颗粒后，可用于：（1）感染原代培养细胞；（2）制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株；（3）in vivo的基因操作、转基因动物，特别是转基因大鼠的制备。实验方法原理慢病毒是反转录病毒的一种，具有反转录病毒的基本结构和特性：整合入宿主细胞基因组，长期表达，可用于转基因动
慢病毒包装实验
实验材料 病毒试剂、试剂盒 无血清培养基脂质体胰酶含血清的培养基DMEM仪器、耗材 EP管6孔板CO2培养箱高速离心机-80°C冰箱实验步骤 以六孔板中的1孔为例，每个样品需要1×106个293T细胞。 1. 取1.5ml灭菌EP管，加入1.5μg包装混合质粒和0.5μg表达质粒以及250μl的无血
慢病毒包装实验
慢病毒包装实验 实验方法原理 慢病毒是反转录病毒的一种，具有反转录病毒的基本结构和特性：整合入宿主细胞基因组，长期表达，可用于转基因动物制备；但也有不同于反转
神秘的外泌体
随着测序技术的不断发展，癌症的体液活检技术逐渐壮大。体液活检，顾名思义，是通过人体的体液（血液、尿液等）检测诊断疾病的一种技术。由于体液活检便捷而不失精准，被《麻省理工大学科技评论》评选为"2015十大突破"之一。摩根大通甚至认为癌症的体液活检是一个千亿美元级的大市场。 体液活检目前检测的
什么是外泌体
什么是外泌体人到中年，最难以启齿的矛盾便是脸上越来越多的皱纹和内心与日俱增的“抗老需求”之间的矛盾。为了今天的容颜不被明天改变，什么玻尿酸、水光针甚至是干细胞美容，我都勇于“尝鲜”。而作为美容界的后起之秀——“外泌体”，我更是不愿错过。毕竟它虽然是近两年兴起的美容模式，但其发展历史也已经有40多年了
什么是外泌体？
什么是外泌体人到中年，最难以启齿的矛盾便是脸上越来越多的皱纹和内心与日俱增的“抗老需求”之间的矛盾。为了今天的容颜不被明天改变，什么玻尿酸、水光针甚至是干细胞美容，我都勇于“尝鲜”。而作为美容界的后起之秀——“外泌体”，我更是不愿错过。毕竟它虽然是近两年兴起的美容模式，但其发展历史也已经有40多年了
外泌体是什么
外泌体于1983年首次被发现，是由于细胞膜内吞形成内体，内体限制膜发生多处凹陷，向内出芽形成微囊泡，从而形成的具有动态亚细胞结构的多囊泡体。大多数类型的细胞均可分泌外泌体。构成外泌体的主要成分为蛋白质、核酸和脂质。外泌体有多种分泌途径，对细胞间通信、疾病的传播及组织修复具有重要的调节作用。外泌体与受
外泌体来自哪里
外泌体是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (30-150nm)，现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年，外泌体首次于绵羊网织红细胞中被发现， 1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形
什么是外泌体
什么是外泌体人到中年，最难以启齿的矛盾便是脸上越来越多的皱纹和内心与日俱增的“抗老需求”之间的矛盾。为了今天的容颜不被明天改变，什么玻尿酸、水光针甚至是干细胞美容，我都勇于“尝鲜”。而作为美容界的后起之秀——“外泌体”，我更是不愿错过。毕竟它虽然是近两年兴起的美容模式，但其发展历史也已经有40多年了
外泌体microRNA1290促进子宫内膜与胚胎相互作用
母体子宫和胚胎之间的信息交流对成功怀孕至关重要。外泌体，细胞外囊泡的亚型，包括许多生物活性因子，调节怀孕早期阶段，特别是在胚胎着床期间。然而，来自胎盘滋养细胞的外泌体microRNAs (miRNAs)调节胚胎着床的机制仍不清楚。作者分离并鉴定了来自胎盘滋养细胞(HTR8/ SVneo)的外泌体
慢病毒包装的原理
病毒包装的原理，就是有遗传物质有外壳蛋白，在细胞内可以指导二者包成病毒。腺病毒扩增，也只能在293A里扩增，其他的细胞不行.慢病毒载体多是由HIV改造的，野生型的慢病毒载体是可以复制的，但是用于实验室就只能通过改造使其变为复制缺陷型的。简单来说，就是把相应的涉及相应功能的元件进行替换或者删除。慢病毒
外泌体是什么？外泌体(Exosome)研究正确打开方式
外泌体曾经被认为是细胞卸载废物的一种方式，在过去的十年中，我们对外泌体的看法发生了巨大变化。我们已经开始认识到，外泌体是从细胞中释放出来的，通过其RNA，蛋白质，脂质和DNA的载体充当信号载体和组织重塑者。参与癌症，炎症，免疫，中枢神经系统功能，心脏细胞功能。外泌体在这些基本生物过程中的作用，它们作
从外泌体角度探讨病毒感染研究思路
一场突如其来的疫情使得这个2020年开局显得异常不同。在这场没有硝烟的战役面前，我们广大一线医务工作者及千千万万的广大人民群众万众一心，全力抗疫，相信在不久的将来定能彻底战胜它。 自打人类出现以来，人类和病毒的战争就没有停止过。这次战役的直接敌人是新型冠状病毒，作为一个新的RNA
病毒包装技术——慢病毒载体构建及包装流程
一、实验流程（1和2为并列步骤）慢病毒过表达质粒载体的构建设计上下游特异性扩增引物，同时引入酶切位点，PCR(采用高保真KOD酶，3K内突变率为0%)从模板中（CDNA质粒或者文库）调取目的基因CDS区（coding sequence）连入T载体。将CDS区从T载体上切下，装入慢病毒过表达质粒载体。
外泌体研究深度剖析
一申请国自然没保障，外泌体来助攻 2018年国自然申请马上就要展开，科研界一年一度的压轴大戏又要上演。中了国自然，新的一年安安心心搞科研，舒舒服服过大年；没有中，那可能意味着接下来又是紧衣缩食的一年。在这里云序小编先衷心的祝福各位老师2018新年快乐，开春申请的基金都能中，所有的实验都成功
细胞外泌体是什么
外泌体——是一类有细胞释放的细胞外囊泡。外泌体的特点见正文。细胞外囊泡——简称EV，是由细胞释放的各种具有膜结构的囊泡结构统称，这些囊泡的直径可以从30、40nm到8、9um。细胞外囊泡有不同的亚群，而目前研究最火热的是外泌体这个亚群。然而由于目前很难纯化到非常纯的外泌体亚群，人们纯化到的通常是直径
外泌体速通手册
01 应用 鉴于外泌体介导的疾病发病机制的证据越来越多，至少有四种策略可用于影响外泌体驱动的疾病，涉及抑制外泌体功能的各个方面。这些策略包括它们的产生，释放，细胞摄取或靶向促发疾病的特定外泌体组分。抑制外泌体介导的发病机制在癌症中具有原型相关性，其中外泌体与肿瘤发生和肿瘤相关病理学的许多方面密切相关
cpe外泌体和普通细胞中外泌体的区别
众所周知，所有的细胞中都含有外泌体，外泌体是一种小分子成分，应用于护肤品中可以直接进到皮肤内部进行作用，像对皮肤进行修护、将携带的营养物质输送到每一个细胞处、提升内源细胞的huo力等。而cpe外泌体与普通的外泌体区别在于它具有准确发现受损细胞的能力，大大增快了救援细胞的速度，提高解决皮肤衰老问题的效
外泌体研究深度剖析（一）
一申请国自然没保障，外泌体来助攻2018年国自然申请马上就要展开，科研界一年一度的压轴大戏又要上演。中了国自然，新的一年安安心心搞科研，舒舒服服过大年；没有中，那可能意味着接下来又是紧衣缩食的一年。在这里云序小编先衷心的祝福各位老师2018新年快乐，开春申请的基金都能中，所有的实验都成功，想发的文章
高效分离外泌体的方法
关于分离外泌体的最佳方法，仍然众说纷纭，尚无定论。在诸多方法中，尺寸排除色谱法（size exclusion chromatography，SEC)因可分离得到高纯度和浓缩的样本，被广泛用来分离生物液体样本。SEC可通过离心或重力流进行。在重力流的作用下，一个样本可以收集到多组分离组分，并可
外泌体提取技术常见FAQ
1.外泌体鉴定的方法有哪些？1）透射电子显微镜（TEM）。2）Nanosight粒径分析（NTA）。3）Western blot鉴定。2.纳米流式可以提供哪些检测服务？ 1）纳米流式可以作为普通 NTA，检测外泌体的粒径和粒子浓度。 2）可以对外泌体进行标记后，通过激光进行荧光信号的激发，从而进行荧
外泌体exosomes提取方法比较
[EXO]提取方法比较 ——如何获得你所想要的exosomes？外泌体（Exosome）发现于1986年，是一种直径约30~100nm的双层膜囊泡状结构小体，可由机体内多种细胞如免疫细胞、干细胞、心血管细胞、网织红细胞、血小板、神经细胞和肿瘤细胞等主动分泌产生，exosomes广泛分布于外周血、尿液
外泌体研究深度剖析（二）
案例2：外泌体lncRNA促进肾癌肿瘤细胞耐药性肿瘤学顶级期刊Cancer Cell（IF：27.409）发表文章，阐述了疾病相关lncRNA参与肾癌耐药性及通过外泌体传播的生理机制，将外泌体lncRNA的研究又一次带到了大众视野中。首先作者通过高通量手段检测了野生型细胞和耐药型细胞中差异表达的
外泌体干细胞是什么
外泌体（exosome, EXO）是一类直径40-100nm的细微囊泡，能够 将脂质、糖分、蛋白、mRNA、miRNA和DNA等生物分子从一个细胞传送到另一个细胞，进而互换遗传物质、重程序编写寄主细胞，开展细胞间通信。外泌体医治的具体优点包含：抗原性比细胞更低，内容物平稳易储存，可根据更改细胞自然环
外泌体(Exosomes)分离提取方案
外泌体（Exosomes）是细胞经过"内吞-融合-外排"等一系列调控过程而形成的直径在30～100 nm的圆形单层膜结构的细胞外小囊泡。外泌体由机体众多类型细胞释放，并广泛分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液当中，可以携带蛋白，运送RNA，在细胞间物质和信息转导中起重要作用。外泌体可能通过调控免疫
外泌体速通手册（上）
01 概念Exosome，中文名外泌体，是一种能被大多数细胞分泌的微小膜泡，具有脂质双层膜结构，直径大约40-120 nm。尽管外泌体最初在1983年就被发现，但人们一直认为它只是一种细胞的废弃物。然而最近几年，人们发现这种微小膜泡中含有细胞特异的蛋白、脂质和核酸，能作为信号分子传递给其他细
病毒包装技术3——慢病毒载体构建及包装流程介绍
1 菌液的准备 1.1. 取含目的质粒的甘油菌液（-80℃或-20℃冰箱中），待菌液融化后，在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上，37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落，挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液，则需取库存质粒进行转化，然后挑单克隆摇菌。 1.2. 将单
一文了解病毒与外泌体关系研究进展
近期，致命冠状病毒已经引起大家的广泛关注。病毒依赖宿主细胞蛋白进行转录、翻译，不可避免地病毒和细胞代谢进程存在重叠，并相互作用。外泌体生成过程与许多病毒组装和流出通路有相当大的重叠，提示外泌体可能在病毒感染中起作用。目前研究结果也显示，外泌体作为细胞内物质排出和细胞间物质和信息交换的一种途径，在
细胞外囊泡（细胞微粒、外泌体）检测（二）
（2）ZL的折射率校正功能利用流式细胞仪进行细胞外囊泡检测往往需要使用标准微球（microspheres）来校正和设门（Set Gate），常用的微球材料有聚苯乙烯（Polystyrene）和二氧化硅（silica），国际血栓与止血协会和标准化委员会（ISTH SSC）推荐用于循环微粒（微囊
细胞外囊泡（细胞微粒、外泌体）检测（一）
细胞外囊泡细胞外囊泡（Extracellular Vesicles, EVs）是指从细胞膜上脱落或者由细胞分泌的双层膜结构的囊泡状小体，直径从40nm到1000nm不等。胞外囊泡主要由微囊泡（Microvesicles, MVs）和外泌体（Exosomes, Exs）组成，微囊泡是细胞激活