水生所构建出能标示肝脏全程发育的转基因鱼

脊椎动物的器官形成是一个复杂而又难以看到的发育过程。然而,依赖于转基因技术发展起来的细胞命运追踪和组织特异呈像就像黑暗中的灯光,可以照亮器官发生难以观察到的细节。就肝脏器官发育研究来说,本世纪以来虽已获得过几个标示肝脏发育的转基因斑马鱼品系,但迄今还没有报道过能标示肝脏全程发生特别是前期发育的转基因鱼。 最近,中国科学院水生生物研究所桂建芳研究员主持的实验室在对银鲫和石斑鱼14kDa阿朴脂蛋白(Apo-14)进行了分子和表达特征研究的基础上,进一步分析了Apo-14在斑马鱼胚胎发育中的时空表达图式,分离出斑马鱼Apo-14的启动子序列,构建出由Apo-14启动子序列驱动绿色荧光蛋白报告基因表达的转基因斑马鱼Tg(Apo14: GFP),并观察到其母源表达和受精后转位。 用该转基因鱼雄鱼与野生型雌鱼交配,在其杂合胚胎中可以追踪绿色荧光蛋白起始表达的细胞及其详细的发育行为。有意思的是,当胚胎发育至10小时尾芽刚刚显现时,Ap......阅读全文

斑马鱼胚胎DNA的制备

材料和试剂1.        蛋白酶K(罗氏03115836001)2.        1M的Tris,pH值8.33.        氯化钾4.        吐温20(10%,EMD4 biosciences,655207)5.        NP40(10%,Merck,492018)设备1.

斑马鱼胚胎细胞的培养

成纤维细胞饲养层 原代培养 细胞系             实验方法原理 通过用链酶蛋白酶除去绒毛膜、用添加成分的 FGF 培养液培养细胞和采用不同的胰蛋白酶消化

以斑马鱼胚胎为模型-研究胚胎发育早期的自我保护机制

  当生物体遇到药物或化学污染物入侵时,它会应激性地提高自身转化及外排能力,从而尽快将外源物降解或排出体外,从而实现自我保护,这一作用也被称作生物体的外源物抵御作用。由于该作用决定了药物或污染物在体内的停留时间,从而影响了药物药效或化学污染物毒性的发生,因而受到药物学及环境毒理学研究的广泛关注。  

转基因斑马鱼的构建

实验概要本实验对斑马鱼导入含 EGFP的质粒,观察其在动物体内的表达情况,在斑马鱼体内,绿色荧光蛋白从原肠胚到出苗期均能在荧光显微镜下观察到绿色荧光。主要试剂EGFP、绿色荧光蛋白基因、pEGFP-N2载体、E.coli主要设备试管、试管架、可调式微量加样器、电泳仪、电泳槽、染色缸、42℃恒温水浴箱

斑马鱼之后,CRISPR再探哺乳动物胚胎发育史

Researchers have used gene-editing to track the cell-by-cell development of a mouse embryo.Credit: Agnieszka Jedrusik and Magdalena Zernicka-Goetz

水生所构建出能标示肝脏全程发育的转基因鱼

  脊椎动物的器官形成是一个复杂而又难以看到的发育过程。然而,依赖于转基因技术发展起来的细胞命运追踪和组织特异呈像就像黑暗中的灯光,可以照亮器官发生难以观察到的细节。就肝脏器官发育研究来说,本世纪以来虽已获得过几个标示肝脏发育的转基因斑马鱼品系,但迄今还没有报道过能标示肝脏全程发生特别是前期发育的转

方案27.6-斑马鱼胚胎细胞的培养

成纤维细胞饲养层 原代培养 细胞系             实验方法原理 通过用链酶蛋白酶除去绒毛膜、用添加成分的 FGF 培养液培养细胞和采用不同的胰蛋白酶消化

chiron在斑马鱼胚胎发育和适应性演化中的作用

  自达尔文时代以来,生物学家一直关注一个重要问题——生物是如何从共同的祖先演化成为丰富多样的物种的?新基因的产生是生物演化和物种多样性形成的重要源泉。研究新基因的起源机制实质上是在探究生命演化的根源,但在分子水平上,新基因是如何被保留下来的、又是如何整合到已有的网络通路中的、对生物的适应性演化做出

斑马鱼胚胎细胞的培养——原代培养

实验方法原理收集胚胎,除去绒毛膜,用胰蛋白酶分散胚胎细胞,然后在胚胎成纤维细胞饲养层上培养从斑马鱼囊胚和原肠期胚获得的原代细胞。实验材料链酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTA胚胎成纤维细胞饲养层人重组白血病抑制因子试剂、试剂盒LDF基础培养液LDF原代培养液LDF维持培

斑马鱼胚胎细胞的培养——细胞系

实验材料链酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTAZEM-2细胞(或等同物)试剂、试剂盒LDF基础培养液LDF原代培养液LDF维持培养液D培养液Holtfreter缓冲液实验步骤鳟鱼胚胎提取物:(a)收集胚胎(受精后 28 天的 Shasta Rainbow 或其他鳟鱼种系

斑马鱼的胚胎原位杂交试验实录

收集斑马鱼的胚胎,在Holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小时后用50%甲醇2%多聚甲醛溶液洗,然后换成甲醇,在-20C 保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用双氧水处理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成)原位

斑马鱼

一、概述斑马鱼是生长在印度、巴基斯坦淡水河流中的一种硬骨鱼(鲤鱼),成年鱼全身仅长4-5厘米,因全身横向分布着一道一道褐色的斑马线而得名。斑马鱼很容易在实验室饲养,一般3个月就可以达到生殖成熟期,雌鱼每次产卵200枚左右,一生可产卵数千枚,斑马鱼所产之卵经24小时即可胚胎发育成熟,仔鱼期只有1个月。

Dev-Cell:转基因斑马鱼的彩色皮肤

  美国杜克大学的研究人员,利用基因工程改造的方法,造成单个的皮肤细胞可以产生70种不同颜色的荧光。该研究发表在最近的《Developmental Cell》上。  该团队并非是为了好玩才做成这样五彩斑斓的斑马鱼,实际上,他们希望通过颜色标记来研究斑马鱼皮肤的愈合。利用颜色来标记细胞,可以让斑马鱼皮

Science:为何有些细胞永远不会癌变

  许多细胞都包含有癌症相关的基因,但是它们却永远不会变成肿瘤,这到底是为什么呢?近期来自波士顿儿童医院的研究人员利用一种荧光报告基因解析了为何细胞会被激活进入类似干细胞的基因表达模式,这种新型可视化技术为了解癌症的起源提供了新工具。  发表期刊:这一研究成果公布在1月29日的Science杂志上。

Science:为何有些细胞永远不会癌变

  许多细胞都包含有癌症相关的基因,但是它们却永远不会变成肿瘤,这到底是为什么呢?近期来自波士顿儿童医院的研究人员利用一种荧光报告基因解析了为何细胞会被激活进入类似干细胞的基因表达模式,这种新型可视化技术为了解癌症的起源提供了新工具。这一研究成果公布在1月29日的Science杂志上。  简介与评论

健康所造血干/祖细胞生存和自我更新能力研究获新成果

  中国科学院上海生命科学研究院/上海交通大学医学院健康科学研究所,中国科学院干细胞生物学重点实验室发育与疾病研究组于近日在国际著名学术期刊Blood在线发表了最新研究成果Dominant-Negative C/ebpα and Polycomb Group Protein Bmi1

胚胎和成年斑马鱼眼情的组织学准备

INTRODUCTIONThis protocol describes the histological preparation of embryonic and adult zebrafish eyes. The methods described here can be easily adapt

组织靶向性胚胎嵌合体—斑马鱼囊胚细胞移植

真核生物的基因调控比原核生物复杂得多。这是因为这两类生物在三个不同水平上存在着重大的差别:①在遗传物质的分子水平上,真核细胞基因组的DNA含量和基因的总数都远高于原核生物,而且 DNA不是染色体中的唯一成分,DNA和蛋白质以及少量的RNA构成以核小体为基本单位的染色质;②在细胞水平上,真核细胞的染色

斑马鱼胚胎细胞的培养——成纤维细胞饲养层

实验方法原理通过用链酶蛋白酶除去绒毛膜、用添加成分的 FGF 培养液培养细胞和采用不同的胰蛋白酶消化筛选成纤维细胞,用原肠胚期斑马龟的胚胎成纤维细胞制备饲养层 [ Sun et al., 1995a ]。实验材料链酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTA受精后8h的胚胎FB

MSHOT体视荧光显微镜应用于斑马鱼观察

斑马鱼体型小,易于养殖,体外受精和发育,且早期胚胎透明,易于观察及操作,受精后24小时主要的组织器官原基已形成,是理想的实验动物。MSHOT明美体视荧光显微镜应用于斑马鱼观察。斑马鱼胚胎可以靠被动扩散供氧生存相当长时间,因而具有心血管发育缺陷的胚胎能够在早期发育中存活。这些优点使斑马鱼成为研究脊椎动

Blood:斑马鱼造血干细胞发育新的调控机制

  人和动物的血液形成是一个有序而复杂的动态过程,造血干细胞的发生、分化与成熟受多种调控因子的精细调控。造血干细胞的发育和分化缺陷可引起多种疾病,包括贫血、免疫异常以及白血病等。近年来国外一个课题组应用全外显子组测序技术,发现一些剪接因子基因突变与骨髓增生异常综合征(MDS)以及继发性急性髓系白血病

应用CRISPRCas9实现斑马鱼组织特异性基因敲除

  近日,来自美国哈佛大学的研究人员在国际学术期刊Development cell发表了他们的最新研究进展,他们利用基于CRISPR-Cas9技术开发的载体系统在斑马鱼上实现了组织特异性基因敲除,这对于以斑马鱼为主要研究工具的科学家们无疑是一个好消息。  斑马鱼具有养殖方便、繁殖周期短、产卵量大、胚

斑马鱼出生就识数!

  意大利科学家发现,斑马鱼幼鱼在孵化后96小时里可以识别不同数量的黑条,研究者表示这一发现表明数字能力可能在新生斑马鱼中是与生俱来的。相关研究3月24日发表于《通讯—生物学》。  过去的研究表明,人类新生儿和新孵化的孔雀鱼、小鸡(孵化时脑已经高度发育的物种)具有数学能力。但在此之前,人们对新生时处

斑马鱼基础研究

近期,我们收到了很多小伙伴提交的文献奖励申请,其中,有2篇成功吸引了小编的注意,这2篇文章的内容都是斑马鱼研究相关的。我们都知道,斑马鱼是一种常见的模式生物,但是市面上针对斑马鱼的抗体却非常少,我们不仅有一百多种斑马鱼抗体,而且还可以根据客户需求来进行定制生产。下面来看看这2篇文章吧。01标题:Sa

斑马鱼显微CT实验

斑马鱼作为传统的脊椎动物模型已经广泛应用于人类疾病和胚胎发育过程的研究,斑马鱼全基因已经完全清楚,与人类基因组有85%同源性,这意味着在斑马鱼身上进行的实验,其结果很多都适用于人类。斑马鱼与其他实验常用动物相比,具有较高的繁殖率和生长速率,并且其胚胎发育过程是在体外进行的,科研人员通过显微镜直接观察

同济大学研究揭示胚胎早期核小体重排规律

  在封面设计中,DNA缠绕在灯笼上象征着核小体,斑马鱼胚胎发育过程也以艺术的形式呈现。   2月25日,记者从同济大学获悉,该校生命科学与技术学院张勇课题组与刘小乐课题组,在国际上首次揭示了脊椎动物在胚胎早期发育过程中的核小体重排规律,并对核小体定位的表观遗传预编程作用进行了探讨。相关成果已作为

解析Cu2+通过表观调控影响斑马鱼肌原纤维分化机制

  近日,华中农业大学水产学院鱼类逆境发育遗传学团队通过研究,发现了Cu2+通过表观调控影响斑马鱼肌原纤维分化机制。相关研究论文以 “Copper ions impair zebrafish skeletal myofibrillogenesis via epigenetic regulation”

水生所关于斑马鱼基因捕获与插入突变的研究取得突破

  脊椎动物后基因组时代的主要任务是解读基因的功能,而基因捕获和插入突变是揭示基因功能的重要手段。斑马鱼具有易于饲养、繁育周期短、产卵量大、体外受精与发育等优点,已成为发育和遗传学研究的理想模式动物,但尚缺乏胚胎干细胞和基于胚胎干细胞的基因敲除技术。转座子介导的基因捕获和突变研究为大规模筛选斑马鱼突

水生所在鱼类诱导型原始生殖细胞理论和技术方面获进展

  原始生殖细胞(primordial germ cell,PGC)是精子和卵子在胚胎期的祖先细胞(progenitor cell),是遗传物质代际传递的细胞载体。因此,PGC是开展基因编辑和转基因等遗传操作的理想靶细胞。将遗传操作后的PGC移植入内源PGC剔除的受体胚,利用受体高效产生遗传操作的供

通过流式细胞仪研究斑马鱼胚胎中细胞周期分析

[精华提要]结合绿色荧光蛋白表达的细胞周期分析广泛的用于研究绿色荧光蛋白标记的细胞的细胞周期分布。这个方案是一种用绿色荧光蛋白标记的斑马鱼胚胎来分析细胞周期的方法。材料与试剂1.        PBS(Invitrogen公司14040)2.        胎牛血清3.        乙醇4.