PCR技术迈入第三代微滴式数字PCR

你说世界变化快不快,PCR已经迈入第三代!近日,一种称为微滴式数字PCR(ddPCR™)的新技术出现在《Analytical Chemistry》杂志上,它能够确定样品中待测靶分子的绝对数目。 第一代PCR就是我们目前最常用的终点PCR技术,通过凝胶电泳获得定性的结果。风靡全球的实时定量PCR技术为第二代,它利用荧光试剂监控扩增,来实现相对定量。在开展基因表达分析时,需要标准曲线或参考基因来协助定量。 微滴式数字PCR则为第三代PCR,它不再依赖Cq值或内参基因,即可确定低至单拷贝的待检靶分子的绝对数目。微滴技术让数字PCR更低成本,且更实用。 文章的第一作者为Bio-Rad公司的Ben Hindson博士。Bio-Rad公司在不久前推出了QX100™ 微滴式数字PCR系统,带来了ddPCR技术。此系统能够确定核酸分子的绝对数目,让研究人员无比精确地研究生物学。Hindson博士表示,ddPCR ......阅读全文

PCR技术迈入第三代-微滴式数字PCR

  你说世界变化快不快,PCR已经迈入第三代!近日,一种称为微滴式数字PCR(ddPCR™)的新技术出现在《Analytical Chemistry》杂志上,它能够确定样品中待测靶分子的绝对数目。   第一代PCR就是我们目前最常用的终点PCR技术,通过凝胶电泳获得定性的结果。风靡全球的实时定

预防癌症新手段:微滴式数字PCR(ddPCR)技术

  “预防就是治疗”--《众病之王:癌症传》  战胜癌症,早期预防、早期发现是关键。癌症患者如果在晚期被发现,90%的患者都会死亡,而肿瘤在早期发现,5年的存活率是90%。早期发现恶变细胞踪迹,可以通过干预手段,提高自身免疫力,也可以完整切除,结合化疗,治疗疾病。  微滴式数字PCR(Droplet

百人杜文斌团队成功研制第三代微滴数字PCR

  数字PCR是一种用于绝对核酸定量检测方法,具有前所未有的准确度和精确度,是继实时荧光定量PCR技术之后的第三代核酸定量扩增检测技术,在液体活检、肿瘤伴随诊断、无创产前筛查、病原载量监测等方面具有重要应用前景,是科研和临床领域的平台级新技术。数字PCR市场主流产品主要为欧美跨国公司的高端仪器,在科

您是否知道伯乐生命医学DDPCR即微滴式数字PCR

  伯乐生命医学DDPCR即微滴式数字PCR的优点   PCR就是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称,是一种分子生物学技术,可以用来放大特定的DNA片段,可以看作是生物体外的特殊DNA复制。   伯乐生命医学DDPCR即微滴式数字PCR的优点:   最精

NaicaTM-crystal-微滴芯片式数字PCR系统

   导语:数字PCR技术是基于PCR技术发展起来的核酸检测和定量的最新技术,在众多应用中,在精准医疗方面的应用尤为突出。法国Stilla Technologies公司专注于开发新一代核酸绝对定量技术,其旗下品牌Naica TM Crystal全自动微滴芯片数字PCR仪系统具有高灵敏度、高精

微滴芯片数字PCR技术在检测新冠病毒的应用

国家卫健委发布了《新型冠状病毒肺炎防控方案(第五版)》,其中在实验室检测技术指南中明确提出,核酸检测结果阴性不能排除新型冠状病毒感染。3月4日,国家卫健委发布的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)》 中提到了以下两点:对疑似病例要尽可能采取包括快速抗原检测和多重PCR核酸检测等方法对呼吸道病

液滴微流控:液滴制备系统

成功制备稳定、均一的液滴需同时具备三大关键要素:稳定的压力输出,精确的流量控制和合适的芯片设计。本文以十字型液滴芯片为例,介绍一种可靠的液滴制备系统,其示意图见下。液滴制备系统概览此液滴制备系统组成部分有:2个FLOW EZ压力泵,2个储液池,2个过滤器,2个流量传感器,1个芯片夹具,1个十字型液滴

液滴微流控:液滴制备方法

基于液滴的微流控系统,因其提供了方便处理微流体(μL,pL)的混合、封装、分选等多种操控的可行性,并适合高通量实验,在近几十年期间,得到高速发展。什么是液滴?液滴微流控有哪些应用?如何搭建液滴制备系统?有关液滴的诸多问题,将会是我们近期所要分享的内容。 什么是液滴?微流控里的液滴,可以理解为两种互不

微滴培养的定义

中文名称微滴培养英文名称microdroplet culture定  义一种将原生质体悬浮液通过稀释机械地分成单个原生质体,放在有许多小培养池的培养容器中,密封后进行培养的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

液滴微流控

加拿大液滴微流控和芯片实验室研究会主席,滑铁卢大学(University of Waterloo)机械与机电工程系教授Carolyn Ren博士,将在会议上发表关于一种高通量筛选分析使能技术——液滴微流控的主题演讲。她将描述几个运用纳升尺寸液滴进行高通量筛选的应用案例。Ren博士的实验室评估了气-液

液滴微流控(一):液滴制备方法

  基于液滴的微流控系统,因其提供了方便处理微流体(μL,pL)的混合、封装、分选等多种操控的可行性,并适合高通量实验,在近几十年期间,得到高速发展。   什么是液滴?液滴微流控有哪些应用?如何搭建液滴制备系统?有关液滴的诸多问题,将会是我们近期所要分享的内容。   什么是液滴?   微流

液滴微流控(一):液滴制备方法

  基于液滴的微流控系统,因其提供了方便处理微流体(μL,pL)的混合、封装、分选等多种操控的可行性,并适合高通量实验,在近几十年期间,得到高速发展。   什么是液滴?液滴微流控有哪些应用?如何搭建液滴制备系统?有关液滴的诸多问题,将会是我们近期所要分享的内容。   什么是液滴?   微流

Naica自动化微滴芯片数字PCR系统在HPV检测的应用

人类DNA中HPV16和HPV18的灵敏度和特异性检测 全世界有超过5%的癌症是因人乳头瘤病毒(HPV)导致的,它主要通过性传播的方式感染[1]。十多种HPV亚型由于其在细胞转化中的作用以及宫颈癌和口咽癌发病率的增加而被认为是高风险的。在这些亚型中,HPV16和HPV18是最普遍的,在大约70%的宫

液滴微流控芯片原理

在微流控芯片中,液滴是两相界面处的表面张力和剪切力共同作用形成的,根据分散相和连续相的不同,液滴可分为两种:油相中的水相微液滴(W/O)和水相中的油相微液滴(O/W)。形成液滴的方法可分为被动法和主动法两种。被动法是指通过控制微管结构和两相流速比来控制液滴的生成。主动法一般通过外加力来驱动和控制液滴

液滴微流控:如何保证液滴的稳定性

液滴,因其微型化及高通量的特性,已成为一种用于微生物培养的有力工具,但在液滴中进行微生物的长期培养时,微生物的生长(生长速度及形态)及其分泌的各种代谢物,均会对液滴的稳定性造成一定的影响,可能会出现液滴“破裂”或者液滴互相融合现象,此外,部分微生物的生长对微环境特别敏感,液滴失去稳定性,便意味着我们

科学家解释微液滴秘密

特立尼达和多巴哥的拉布雷亚沥青湖是世界上最大的天然沥青湖。  沥青湖内极小的水滴中也会蕴含着丰富的生态系统,例如细菌和甲烷生成菌,如果以科学的方法利用该特性将有助减少漏油事故。  研究者调查了特立尼达和多巴哥境内的拉布雷亚沥青湖,发现只需极少量的水便能够支撑以石油为食的生物体的生存。研究者将这一发现

浅析IVD最成熟的技术领域蕴藏的机遇

IVD增速最快的细分行业当属分子诊断,而分子诊断主要包括核酸诊断和生物芯片技术。核酸诊断主要分为聚合酶链式反应(PCR)和荧光原位夹杂(FISH)。PCR目前在分子诊断细分技术中最为成熟且应用最广。在这一技术红海的最远处,数字化PCR技术因为其先进性尚处于蓝海竞争市场,国内外企业积极参战,让这一领域

液滴微流控:在液滴中培养大肠杆菌

已有研究表明,使用氟化油进行油包水液滴制备,可用于长期细胞培养[1],相较矿物油,氟化油表现出更好的生物相容性[2],但要找到一种有效稳定液滴的表面活性剂,仍是一个挑战。本研究的目的是:通过在液滴中培养大肠杆菌(Escherichia coli),说明新型表面活性剂dSURF的生物相容性及液滴稳定表

Talanta:高灵敏和防污染的“准共聚焦”微液滴数字PCR阅读仪

  清华大学医学院生物医学工程系郭永实验室在《分析学家》(Analyst)在线以封底(back cover)发表题为《一种双荧光四分类微液滴数字PCR数据的准确、可靠和自动分类方法——密度分水岭算法》(A density-watershed algorithm (DWA) method for ro

微流控漫谈系列之图解液滴微流控技术

图解液滴微流控技术微液滴具有体积小、比表面积大、速度快、通量高、大小均匀、体系封闭、内部稳定等特性,在药物控释、病毒检测、颗粒材料合成、催化剂等领域中均有重要应用。微流控技术的发展为微液滴生成中实现尺寸规格、结构形貌和功能特性等的可控设计和精确操控提供了全新平台。本文还是采用以图片展示为主,结合相关

液滴微流控:单细胞高通量液滴测序(Dropseq)

细胞是生物结构与功能的基本单位,形态类型千差万别。通过细胞基因组学,可以描述细胞特性及功能,本文所介绍的单细胞(single-cell)高通量液滴测序(Drop-seq)技术,是一种快速分析成千上万个单细胞的方法,通过将每个细胞包裹在纳升级微滴中,进行RNA杂交并生成mRNA转录物,制作细胞基因表达

微控视频旋转滴超低界面张力仪

XZD-SP技术指标   1、表面及界面张力测量范围1×10-7~100mN/m; 2、转速范围1000~9000r/min(13000r/min),控制精度±0.1%;高速同步伺服电机直连传动,提高了转速的控制精度,克服了升速电机经常更换皮带的麻烦; 读数范围径向0~6mm,轴向0-50

数字PCR的前世今生:特点、优势和局限性

数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。数字PCR是近年来迅速发展起来的一种定量分析技术。该技术结果判定不依赖于扩增曲线的循环阈值(Ct),不受扩增效率的影响,具有很好的准确度

第三代数字PCR技术应用分享

数字PCR技术即Digital PCR技术真正实现了对目标DNA或RNA分子进行绝对定量,在精密度、准确度和灵敏度方面有无与伦比的优势,同时解除了对Ct值和标准品的依赖,提高了抑制剂的耐受能力,因此被称作第三代PCR技术。 Naica crystal 全自动微滴芯片数字PCR仪系统自动化生成25

西安交大最新综述:第三代PCR技术

  自1985年 Mullis 发明了体外多聚酶链反应(PCR)至今, PCR在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用.今天的第三代PCR技术, 即绝对定量的数字化 PCR也备受关注。来自西安交通大学生命科学与技术学院等处的研究人员近期发表综述,介绍了 PCR 技术的发展

巢式PCR

实验方法原理 由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从而降低了扩增多个靶位点的可能性(因为与两套引物都互补的引物很少)增加了检测的敏感性;又有两对PCR引物与检测模板的配对,增加了检测的可靠性。 由于第二套引物位于第一轮PCR产物内部,而非目的片断包含两套引物结合位点的可能性极小,因此第二套引

巢式PCR

基本方案             实验方法原理 由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从而降低了扩增多个靶位点的可能性(因为与两套引物都互补的引物很少)增加了检测的敏感性;又有两对P

巢式PCR

巢式PCR可应用于:(1)病毒检测;(2)测序分析;(3)低表达基因检测。实验方法原理由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从而降低了扩增多个靶位点的可能性(因为与两套引物都互补的引物很少)增加了检测的敏感性;又有两对PCR引物与检测模板的配对,增加了检测的可靠性。 由于第二套引物位于第一轮PCR产物

数字PCR简介

1985年美国科学家Kary Mullis发明PCR方法以后,PCR已经成为生命科学研究领域中最常规的实验方法之一。PCR是用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,可看作是生物体外的特殊DNA复制。PCR的最大特点,是能将微量DNA大量扩增。最传统的一代PCR采用琼脂糖电泳的方式对PCR产物进

液滴微流体:从概念验证到实际应用?

  液滴微流体技术构成了一个多样化的实用工具集,使化学和生物实验能够在高速和高效率的情况下完成。事实上,近年来,基于液滴的微流控工具在材料合成、单细胞分析、RNA测序、小分子筛选、体外诊断和组织工程等方面都取得了良好的应用效果。  来自苏黎世联邦理工学院 (ETH Zurich)的Andrew J.