化学合成虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ的色谱行为及分离纯化
摘要:利用反相高效液相色谱(RP2HPLC) 和离子交换色谱( IEC) 比较研究了固相化学合成的多肽类神经毒素虎纹捕鸟蛛毒素2 Ⅰ(HWTX2 Ⅰ) 与其对应的天然产物的色谱行为差异及分离纯化方法。发现在完全相同的实验条件下,复性处理后的合成HWTX2 Ⅰ的谱峰有别于还原变性后又复性的天然HWTX2 Ⅰ的谱峰,主要表现为扩散度较大,对称性较差,说明合成产物存在更大分子构象的不均一性。推测除了在合成HWTX2 Ⅰ复性过程中有少数分子发生二硫键错配外,还有部分分子在固相合成中发生了消旋作用,需要交替采取多种色谱法才能完全分离纯化复性后的合成多肽产物。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文
多肽的固相合成、切割及纯化_固相肽合成技术
实验材料huBPP试剂、试剂盒氩气二甲基甲酰胺(DMF)哌啶二异丙基乙胺甲醇TFA(三氟乙酸)茚三酮甘氨酸聚乙二醇乙腈仪器、耗材Pioneer肽合成仪树脂Waters 650半制备色谱仪色谱柱Beckman gold system试管固相肽合成技术是现代蛋白质化学的一项关键技术,也是对现代分子生物学
固相多肽合成的应用——多肽合成仪
多肽固相合成技术的发明同时促进了多肽合成的自动化。世界上第一台真正意义上的多肽合成仪出现在1980年代初期,它是利用氮气鼓泡来对反应物进行搅拌,用计算机程序控制来实现有限度的自动合成。虽然在各项功能方面有着明显的缺陷,但是它毕竟把人从实验室里解放出来,极大地提高了工作效率。随着多肽科学的发展,科学家
多肽的固相合成、切割及纯化
固相肽合成技术 实验材料 huBPP 试剂、试剂盒 氩气 二甲基甲
多肽的固相合成、切割及纯化(二)
(五)合成结束后处理小心卸一柱子,倒出肽合成树脂。若切割时,可按切割程序进入,否则将合成肽树脂冷冻干燥后保存。 (六)合成过程的检测报告1,,资源报告;2,脱保护图谱;3,合成过程UV检测图谱 a,脱N端的Fmoc紫外吸收; b,去Fmoc,洗柱紫外吸收; c,溶解待合成接上去氨基酸的紫外吸收
多肽的固相合成、切割及纯化(一)
固相肽合成(solid phase peptide synthesis, SPPS)技术是现代蛋白质化学的一项关键技术,也是对现代分子生物学和基因工程研究具有重大影响和重要意义的技术。它的基本过程为:1、偶联保护氨基,即将第一个保护氨基以共价键偶联外固相载体上(在合成过程中始终不能脱落)。2、脱
多肽固相合成简介
R.Bruce Merrifield在肽合成的技术方面发明了一种突破性技术,并将其命名为多肽固相合成(solid-phase peptide synthesis, SPPS), 1984年Merrifield因此获得了诺贝尔奖。固相合成顺序一般从C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。首先,将C段的氨
多肽固相合成法
多肽固相合成法——英文解释: solid phase peptide synthesis 简写为SPPS。在肽合成的技术方面取得了突破性进展的是R.Bruce Merrifield,他设计了一种肽的合成途径并定名为固相合成途径。由于R.BruceMerrifield在肽合成方面的贡献,1984年获得
固相多肽合成树脂的特征和进展
前言自从1963年MERRIFIELD发展成功了固相多肽合成(SPPS)方法以来,经过不断的改进和完善,到今天这个方法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术,表现出了经典液相合成法无法比拟的优点。固相合成的主要设计思想是:先将所要合成肽链的羟未端氨基酸的羟基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂相连
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来,分
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法
1、纯化的一般目标和方法 首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱(capturechromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量,常采用高载
多肽快速固相合成技术
多肽快速固相合成技术是美国PTI(protein technonogy Inc.科学家Christina.Hood等人发展的,利用这种方法,合成多肽的速度比传统的固相合成方法提高了10倍以上,而且合成的纯度有所提高,对以往难合成的氨基酸也有突破。现在只需要14-17分钟就可以完成一个氨基酸从偶联
固相多肽合成的特点及主要问题分析
固相合成法对于多肽合成的显著的优点:简化并加速了多步骤的合成;因反应在一简单反应器皿中便可进行,可避免因手工操作和物料重复转移而产生的损失;固相载体共价相联的肽链处于适宜的物理状态,可通过快速的抽滤、洗涤未完成中间的纯化,避免了液相肽合成中冗长的重结晶或分柱步骤,可避免中间体分离纯化时大量的损失;使
PE433A固相多肽合成仪操作规程
1.接通电源,确认电压为220V,高纯氮钢瓶高压>10公斤,低压为4.55公斤,特别注意避免虚假低压。2.系统、9#瓶、10#瓶、活化腔、反应腔、装药空瓶检漏,下阀压力为11psi,上阀压力为3psi。关闭阀门后压力下降应
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
1、纯化的一般目标和方法首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量,常采用高载量、快流速
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
1、纯化的一般目标和方法 首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
1、纯化的一般目标和方法首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量,常采用高载量、
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
修饰肽纯化的一般目标和方法 首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
修饰肽纯化的一般目标和方法 首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步zui关心的是流速和载量,常采用
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法简介
1、纯化的一般目标和方法首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量,常采用高载量、快流速凝
通过可控制的微波加热进行快速固相多肽合成
Rapid solid-phase peptide synthesis using thermal and controlled microwave irradiation Abstract: A rapid and efficient microwave-assisted solid-phase
概述多肽合成仪固相合成法的诞生
多肽合成研究已经走过了一百多年的光辉历程。1902年,Emil Fischer首先开始关注多肽合成,由于当时在多肽合成方面的知识太少,进展也相当缓慢,直到1932年,Max Bergmann等人开始使用苄氧羰基(Z)来保护α-氨基,多肽合成才开始有了一定的发展。到了20世纪50年代,有机化学家们
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法介绍(三)
2、纯化前的准备工作 (1)样品稳定性试验 a、测定样品在pH2-9的稳定性;b、测定样品在0-4mol/LNaCl及0-2mol/L硫酸铵中的稳定性;c、测定样品在0-50%乙醇、甲醇中的稳定性;d、测定样品在4-40℃的稳定性;e、室温下静置过夜,测定对蛋白水解酶的稳定性。(2)样品预处理 a、
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法介绍(一)
1、纯化的一般目标和方法 首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱(capturechromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步最关心的是流速和载量,常采用高载量、快流速凝
多肽化学合成中液相和固相两种方法的比较
多肽化学合成的基本介绍多肽化学合成方法,包括液相和固相两种方法。液相合成方法现在主要采用BOC和Z两种保护方法,现在主要应用在短肽合成,如阿斯巴甜,力肽,催产素等,其相对与固相合成,具有保护基选择多,成本低廉,合成规模容易放大的许多优点。与固相合成比较,液相合成主要缺点是,合成范围小,一般都集中在1
奶制品蛋白质、多肽液相色谱纯化方法介绍
1、纯化的一般目标和方法 首先,自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤(例如:匀浆、离心、硫酸铵沉淀等)成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱(capture chromatography),主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质,此步关心的是流速和载量,常采用高载量、快流速
GLP1类多肽药物固相合成载体
摘要:海普提供的固相合成载体可用于多肽药物、核酸药物合成,拥有丰富产品品系,产品整体质量稳定,应用经验丰富。#GLP-1类多肽药物固相合成载体 胰高血糖素样肽(GLP-1)是人在进食过程中由肠黏膜内分泌细胞L细胞分泌的肠源性激素。GLP-1通过刺激胰岛素的合成(胰岛β细胞)和抑制胰高血糖素的分泌(胰
糖肽固相合成的利器——Liberty全自动微波多肽合成系统
糖肽是指糖蛋白和蛋白聚糖中,糖与氨基酸或多肽链以共价键相连而形成的区域。糖链与氨基酸之间的连接称为糖肽键。由于含有糖肽键的物质具有多种重要的生物功能,因此人们对糖肽的合成非常感兴趣,而且,合成的糖肽还可作为研究天然活性糖蛋白结构与功能关系的模型物。 由于糖键氨基酸极易卷曲,活性位点被隐藏,
糖肽固相合成的利器——Liberty全自动微波多肽合成系统
糖肽是指糖蛋白和蛋白聚糖中,糖与氨基酸或多肽链以共价键相连而形成的区域。糖链与氨基酸之间的连接称为糖肽键。由于含有糖肽键的物质具有多种重要的生物功能,因此人们对糖肽的合成非常感兴趣,而且,合成的糖肽还可作为研究天然活性糖蛋白结构与功能关系的模型物。 由于糖键氨基酸极易卷曲,活性位点被隐藏,因此糖肽合