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“我们现在不仅看到了时钟的表面，而且也看到了内部机械运作，”UCLA化学和生物化学教授Juli Feigon说。“我们不断放大端粒酶以观察越来越多细节。如今，我们终于有能力开始推断这种酶如何发挥作用了。”Juli Feigon 文章报道了迄今所见的最高水平端粒酶催化核心结构，下图首次展示了在生成DNA链过程中研究人员捕获的端粒酶。主要研究手段是冷冻电子显微术（cryo-electron microscopy），再利用计算机模型解析数据。研究小组成员在生物化学、分子生物学、计算生物学和生物物理学等领域各有专长。 “这是我们创建的第一个端粒酶框架，”文章一作、Feigon实验室的博后学者Lukas Susac说。“过去，我们知道端粒酶突变会使人患病，但我们除了知道患者的端粒酶不起作用以外，并不知道出了什么差错。但是，为了治疗疾病，我们必须知道究竟发生了什么。” 端粒酶的主要作用是维持端粒DNA（人类染色体末端结构）。当端粒......阅读全文
一、知识背景：1、基因表达：DNA RNA Protein单拷贝基因表达存在逐步放大机制，如一个蚕丝心蛋白基因 104个丝心蛋白mRNA（每个mRNA存活4d，可以合成105个丝心蛋白） 共合成109个丝心蛋白 。因此单拷贝基因的mRNA表达水平对于其功能水平的调控是非常重要的。2、PCR技术(ol
专题一：RNA干扰技术（RNAi）1995年，康奈尔大学的Su Guo博士用反义RNA阻断线虫基因表达的试验中发现，反义和正义RNA都阻断了基因的表达，他们对这个结果百思不得其解。直到1998年， Andrew Fire的研究证明，在正义RNA也阻断了基因表达的试验中，真正起作用的是双链RNA。这些
30多年前，加州大学伯克利分校的研究人员发现了端粒酶（telomerase），这是一种可以延长染色体末端并防止它们磨损的酶，推测其在抗衰老和癌症中可能有用，从此，全球掀起了一场激活或阻断端粒酶活性的药物研发热潮。 至今为止，还未出现以端粒酶为基础的抗衰老药物（青春之泉）和抗癌药物，直到今天，加
一、知识背景：1. 基因表达：DNA——RNA——Protein单拷贝基因表达存在逐步放大机制，如一个蚕丝心蛋白基因——104个丝心蛋白mRNA（每个mRNA存活4d，可以合成105个丝心蛋白）——共合成109个丝心蛋白 。因此单拷贝基因的mRNA表达水平对于其功能水平的调控是非常重要的。2.&nb
端粒酶是一个RNA-蛋白复合物（RNP），负责使用其端粒酶逆转录酶（TERT）和包含模板的端粒酶RNA（TER）在染色体3’末端延长端粒DNA。它的活性是人类健康的关键决定因素，影响着衰老、癌症以及干细胞更新。但是由于缺乏端粒酶、尤其是结合着端粒DNA的端粒酶的原子模型，我们对端粒DNA反复合成
（2） 苯丙酮尿症 苯丙酮尿症（PKU）的病因是患者肝细胞缺乏苯丙氨酸羟化酶，使体内的苯丙氨酸不能正常代谢为酪氨酸，导致血清中苯丙酮酸浓度升高。现已知苯丙氨酸羟化酶基因定位于12q24.1，此基因全长约90kb，含13个外显子，在中国人中已发现10余种点突变，这是造成酶活性缺乏的原因。 2．
对于所有多次分裂的细胞来说，维持染色体两端端粒(telomere)的长度是至关重要的。一种称作端粒酶(telomerase)的酶可使两端得以延长，以抵消每次染色体拷贝所发生染色体缩短。端粒酶是细胞生存的必要条件，端粒酶功能丧失可导致干细胞自我更新障碍，从而引起诸如先天性角化不良、再生障碍性贫血和
端粒是染色体末端一段特殊的重复核苷酸结构, 可防止染色体降解或融合. 端粒功能异常可导致衰老和癌症等多种疾病. 端粒酶逆转录酶(TERT)是端粒酶的催化亚基, 可有效保持端粒结构完整性. 近期来自深圳大学第一附属医院/深圳市第二人民医院，河北师范大学的研究人员发表综述，指出在黑色素瘤、神经胶质瘤
加利福尼亚大学洛杉矶分校的生化学家近日绘制出合成端粒酶(核糖体蛋白酶)的主要蛋白质及RNA(核糖核酸)的结构，从而揭示了这种对于医治癌症与衰老具有十分重要意义的酶的合成机理。研究成果刊登在7月13日出版的《分子细胞》杂志上。 长期以来，由于端粒酶与癌症及衰老有很大关系，所以一直吸引着科学家
分子生物学是在生物化学基础上发展起来的，以研究核酸和蛋白质结构、功能等生命本质的学科，在核酸、蛋白质分子水平研究发病、诊断、治疗和预后的机制。其中基因工程（基因技术，基因重组）是目前分子生物学研究热点，这些技术可以改造或扩增基因和基因产物，使微量的研究对象达到分析水平，是研究基因调控和表达的方法，也
衰老是个古老而神秘的话题，长生不老是人类一直追求的目标，而生物体的衰老却是一个必然的过程，是随着时间的推移，机体从构成物质、组织结构到生理功能的丧失退化的过程。 近日，《实验医学杂志》刊发的一项研究表明我们的染色体会随着机体的变老而一起变老。那么我们能不能通过改变染色体来延缓衰老、保持健康长寿
衰老是个古老而神秘的话题，长生不老是人类一直追求的目标，而生物体的衰老却是一个必然的过程，是随着时间的推移，机体从构成物质、组织结构到生理功能的丧失退化的过程。 近日，《实验医学杂志》刊发的一项研究表明我们的染色体会随着机体的变老而一起变老。那么我们能不能通过改变染色体来延缓衰老、保持健康长寿
①增加限制酶的用量，平均每微克底物DNA可高达10单位甚至更多。②增加酶反应体系的体积，以使潜在的抑制物被相应的稀释。③延长酶解反应的保温时间。④向反应体系中添加亚精胺（spermidine）（终浓度为1~2.5mmol/L），亚精胺与负电性的杂质结合。注意，亚精胺在4℃时会沉淀DNA，因此最好在反
从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工等一系列问题。总之
实验方法原理 制备特异性的单链 RNA 探针不仅比 DNA 探针更容易，在杂交反应中一般也比具相同比活性的 DNA 探针产生更强的信号，这可能是由于含有 RNA 的杂合链固有的更高稳定性的缘故（Casey and Davidson 1977)。虽然 DNA 探针仍普遍地应用于 No
PCR技术自1985年建立以来，发展之迅速、应用之广泛，表明其具有强大的生命力.近些年来，基于PCR的基本原理，许多学者充分发挥创造性思维，对PCR技术进行研究和改进，使PCR技术得到了进上步地完善，并在此基础上派生出了许多新的用途. 原位PCR技术 原位PCR就是在组织
PCR技术自1985年建立以来，发展之迅速、应用之广泛，表明其具有强大的生命力.近些年来，基于PCR的基本原理，许多学者充分发挥创造性思维，对PCR技术进行研究和改进，使PCR技术得到了进上步地完善，并在此基础上派生出了许多新的用途. 原位PCR技术 原位PCR就是在组织细胞里进行PCR
来自中科院动物研究所、武汉大学的研究人员在新研究中发现了一种新型端粒和端粒酶相互作用蛋白，证实其具有解开端粒G-quadruplex，促进哺乳动物细胞中端粒延伸的功能。研究成果发表在11月26日的《美国科学院院刊》(PNAS)杂志上。 中科院动物研究所的谭铮(Zheng Tan)研究员和武
来自山东大学医学院，瑞典卡罗林斯卡大学医院等处的研究人员发现了端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase)的一种新功能――这种与维持端粒长度与功能有关的酶在癌症发展过程中扮演了重要角色，通过靶向这种酶，也许能防止癌症的发展。相关成果公布在On
核酶（ribozyme ) 是一类具有酶特性的 RNA 分子，通过催化靶位点 RNA 链中磷酸二酯键的断裂，特异性地剪切底物 RNA 分子，从而阻断基因的表达。核酶广泛存在于从低等到高等的多种生物中，参细胞内 RNA 及其前体的加工和成熟过程。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法
第一节 概 述 从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了
在每次DNA复制完成后，染色体末端都会有轻微的缩短，这个末端重复序列也就是我们熟悉的端粒保护编码DNA区域。在干细胞中，端粒酶能延长端粒结构，因此细胞分裂能不断进行，而在体细胞中，由于编码端粒酶基因的催化亚基：端粒酶逆转录酶（telomerase reverse transcriptase，TE
RNA酶保护法是近十年发展起来的一种全新的mRNA定量分析方法。其基本原理是将标记的特异RNA探针（32P或生物素）与待测的RNA样品液相杂交，标记的特异RNA探针按碱基互补的原则与目的基因特异性结合，形成双链RNA；未结合的单链RNA经RNA酶A或RNA酶T1消化形成寡核糖核酸，而待测目的基因与特
实验方法原理 制备特异性的单链 RNA 探针不仅比 DNA 探针更容易，在杂交反应中一般也比具相同比活性的 DNA 探针产生更强的信号，这可能是由于含有 RNA 的杂合链固有的更
近日，美国一家名为Libella的基因治疗公司正式开始返老还童临床试验，通过基因治疗手段，使用AAV病毒导入人端粒酶逆转录酶基因，延长端粒长度，从而希望让人类逆转衰老20年。 2008年，上映了一个叫做《返老还童》的电影，也翻译做《本杰明·巴顿奇事》，电影中出现了一个很奇怪的时钟，它总是倒着走
近日，“上海科技大学—清华大学抗新冠病毒联合攻关团队”率先在国际上成功解析新型冠状病毒“RdRp（RNA依赖的RNA聚合酶）-nsp7-nsp8复合物”近原子分辨率的三维空间结构，揭示了该病毒遗传物质转录复制机器核心“引擎”的结构特征，为开发针对新冠肺炎的药物奠定了重要基础。新型冠状病毒RdRp
利用 DNA 聚合酶 I 的大片段（Klenow 酶）的 3＇— 5＇外切酶活性将 3＇黏性末端转化成平末端。具体方法是在体外转录体系尚未加入核苷酸和 RNA 聚合酶时，加入 Klenoow 片段 (终浓度为 5U/ug)，于 22℃ 孵育 15mim, 然后再加入核苷酸混合物和RNA 聚合酶实验材
锤头型核酶实验 发夹型核酶实验 其他类型的核酶 实验方法原理 锤头型核酶是最简
实验方法原理 RNA 足迹和修饰干扰分析（RNA footprinting and modification interference analysis）是用来研究 RNA 与蛋
胶质瘤（Glioblastoma, GBM)）是一种严重威胁人类健康的脑部恶性肿瘤，目前尚缺乏有效的防治手段，以往的研究报道83%原发性胶质瘤携带端粒酶基因（TERT）启动子区域的致癌突变（Killela PJ, et al.PNAS 2013, PMID: 23530248），该突变重新激活端