MassARRAY核酸质谱实验操作方法与技巧
一、赢在起步——DNA样品的挑选 实验总是从样品开始,完善的样品质控和挑选是整体测试成功的关键。MassARRAY平台适合多种来源样本的检测,比如血液,口腔拭子,显微切割和新鲜冰冻组织、毛囊等等,总共仅需10ng DNA即可完成数十个位点的检测。提取的DNA可在4℃保存24小时,如需要放置超过24小时,则需将DNA样品保存于-20℃条件下,A260/A280应在1.7-2.0之间。二、延伸引物UEP的检查 对于不同分子量的片段,质谱仪的检测效率不同,为了使各个位点的检测效率达到较一致的水平,需要将体系中的延伸引物UEP调整到适当的浓度。具体方法如下:将2µL UEP mix用超纯水稀释到50µL,按照通用流程进行质谱检测,比较每一条UEP的峰高。根据每一条UEP的加样量和峰高,按照正比计算,补加或者调整对应的UEP。通过浓度调整,达到最低峰高度为最高峰......阅读全文
质谱介绍及质谱图的解析
质谱法是将被测物质离子化,按离子的质荷比分离,测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。质量是物质的固有特征之一,不同的物质有不同的质量谱——质谱,利用这一性质,可以进行定性分析(包括分子质量和相关结构信息);谱峰强度也与它代表的化合物含量有关,可以用于定量分析。质谱仪一般由四部分组成:进
质谱介绍及质谱图的解析
质谱法是将被测物质离子化,按离子的质荷比分离,测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。质量是物质的固有特征之一,不同的物质有不同的质量谱——质谱,利用这一性质,可以进行定性分析(包括分子质量和相关结构信息);谱峰强度也与它代表的化合物含量有关,可以用于定量分析。 质谱仪一般由四部分
质谱介绍及质谱图的解析
质谱法是将被测物质离子化,按离子的质荷比分离,测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。质量是物质的固有特征之一,不同的物质有不同的质量谱——质谱,利用这一性质,可以进行定性分析(包括分子质量和相关结构信息);谱峰强度也与它代表的化合物含量有关,可以用于定量分析。 质谱仪一般由四部分组成:
液质联用中的质谱——串联质谱篇(上)
在连接了前面的离子源、离子传输后,质谱的质量分析器还可以空间或时间的方式进行串联分析(MS/MS或MSn)。此时,第一个质量分析器用于选择与分离母离子(Parent Ion,又称前体离子Precursor Ion),被选择的母离子碎裂后产生子离子(Daughter Ion,又称产物离子Produ
液质联用中的质谱——串联质谱篇(中)
本文举几例常见的串联质谱仪,篇幅较长分为上、中、下三篇。 线性离子阱LIT/FTICR和LIT/Orbitrap QqQ和QTOF都是串联两个“离子束”型分析器,近年来还有一种趋势是串联两个离子捕获型分析器,线性离子阱LIT/FTICR是此类最早的类型,由于维护困难,近年来慢慢被LIT/Or
液质联用中的质谱——串联质谱篇(下)
本文举几例常见的串联质谱仪,篇幅较长分为上、中、下三篇。 串联质谱扫描方式 串联质谱的扫描方式包括以下几种: 1、子离子扫描/产物离子扫描/碎片离子扫描(Product Ion Scan/Fragment Ion Scan): 选择某一质量的母离子进入碰撞室,与碰撞室内的碰撞气体发生解离
质谱原理
在过去15年,液相色谱串联质谱仪(LC-MS/MS)已作为常规检测技术广泛应用于许多临床检验室。在小分子量化合物的检测方面,LC-MS/MS比常规的免疫分析法或高效液相法(HPLC)更具有特异性,比气相色谱法(GC-MS)更高效。LC-MS/MS作为一种高效高质的分析技术,广泛应用于临床检测,包括治
质谱入门
今天我们继续了解学习有关质谱的其他问题,让我们共同学习,共同进步,希望对大家有所帮助。 常见的样品分离方法和样品递送方法1.气相色谱(GC)可能对很多人来说,第一次接触质谱是将其作为气相色谱的检测器。GC/MS联用仪类型的范围已大大扩展,超越早期仪器设计的范围,在使用中满足日渐严格的法规要求,像环境
质谱入门
定量与校正当已知某种化合物时,如在临床试验中,收集了许多单个样品的统计数据,并且已很好地表征了所给药的药物及其感兴趣的代谢物,则不需要完整的质谱图。但是,在复杂的生理混合物中则需要非常好的灵敏度,因此该仪器就要设置为仅监视特定的m/z值。因为离子连续流过三重或串联四极杆,所以没有必要限制离子流进入质
质谱术语
基峰(Base peak)质谱图中离子强度最大的峰,规定其相对强度(RI)或相对丰度(RA)为100。精确质量(Exactmass)低分辨质谱中离子的质量为仅为整数,而高分辨质谱(HRMS)给出分子离子或碎片离子的精确质量,其有效数字视质谱仪的分辨率而定。基于精确原子量可以确定分子式。CO、N2、C
质谱入门
LC/MS的溶剂及其注意事项通常根据目标化合物的溶解性和与LCMS中使用的各种电离技术的兼容性选择溶剂。在ESI和其它常压电离技术中,溶剂的挥发性和结合质子的能力很重要。使用的主要质子溶剂像甲醇与水的混合物,比如1:1的甲醇水,或1:1的乙腈水,甲醇水混合物粘度超过了水或甲醇,因为在混匀时候发生了放
质谱介绍
质谱分析本是一种物理方法,其基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离,生成不同荷质比的带正电荷的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。在质量分析器中,再利用电场和磁场使发生相反的速度色散,将它们分别聚焦而得到质谱图,从而确定其质量。第一台质谱仪是英国科学家阿斯顿(F.W.Aston,
qtof质谱
全称就是QTOF质谱检测器03030706-01。技术指标:质量范围(m/z) :TOF 部分: m/z 100-10,000;四极杆部分:m/z 50-4,0002.质谱分辨率: 自动调谐正离子模式:>42000 @ 2722 m/z3.*灵敏度:ESI MS正离子模式: 柱1pg 利血平(m/z
质谱临床
表1 小分子含氮物质检验(1项)项目编码项目名称 (中文)项目名称 (英文)项目内涵CEE02001串联质谱肉碱及氨基酸测定Assay of carnitine and amino acidsby tandem mass spectrometry assay样本类型:血液、尿液,包括3-羟基丁酰
某院370万预购核酸飞行质谱——保证医学检验、生物诊疗工作
分析测试百科网讯 2021年11月30日西安交通大学第二附属医院公布政府采购意向,为保证医院检验科、生物诊疗中心正常工作需要,预计花费370万元拟采购一台核酸飞行质谱检测系统,其公告内容具体如下: 西安交通大学第二附属医院2021年11至12月政府采购意向-核酸飞行质谱检测系统 详细情况:
武汉大学中南医院不接受进口400万采购核酸质谱检测系统
分析测试百科网讯 近日,武汉大学中南医院发布采购公告,招标采购核酸质谱检测系统,要求其检测通量达96芯片/384芯片;内置电脑控制机械臂;激光脉冲30 Hz,4纳秒;检测质谱范围<10000 道尔顿(Daltons);质量分辨率在8500 道尔顿(Daltons) 位置,其分辨率大于850。同时
上海精卫中心TDM质谱监测和新冠核酸检测通过CNAS评审
2021年1月15日-17日上海交通大学医学院附属精神卫生中心检验科迎来并顺利通过了中国合格评定国家认可委员会(CNAS)评审组专家的复评审。值得庆贺的是上海市精神卫生中心的临床药物浓度质谱监测和方舱实验室的新冠病毒核酸检测扩项通过了ISO15189认可;精神科临床药物浓度质谱监测是国内首家也是
探索质谱前沿极限:颗粒质谱与成像
分析测试百科网讯 质谱技术的快速发展和应用有目共睹。学物理出身、从事科学研究的质谱学者会做出什么样的选择?数年前在北京质谱年会上,第一次听聂宗秀的报告时就印象深刻,用离子阱质谱测定数百兆分子量的大颗粒的工作让人耳目一新。如果说探索高质量极限的工作还不够引人注意,那么用MALDI测定那些以前不能测
质谱图的质谱中主要离子峰
从有机化合物的质谱图中可以看到许多离子峰,这些峰的m/z和相对强度取决于分子结构,并与仪器类型,实验条件有关。质谱中主要的离子峰有分子离子峰、碎片离子峰、同位素离子峰、重排离子峰及亚稳离子峰等。正是这些离子峰给出了丰富的质谱信息,为质谱分析法提供依据。分子受电子束轰击后失去一个电子而生成的离子M+称
质谱中一级质谱、二级质谱的区别和作用
质谱中一级质谱,二级质谱的区别和作用,如下:区别:1、显示目标不同。一级质谱主要是给出目标物的分子量,GC-MS一级谱图可以定性分析,LCMS只能用于简单的分子量测定。一级质谱有的时候受仪器的分辨率影响,给出的质荷比不能准确定性,比如相同分子量的不同分子,在仪器分辨率不够足够高的时候很难区分。二级质
实验室分析方法质谱法质谱分类
电子轰击质谱EI-MS,场解吸附质谱FD-MS,快原子轰击质谱FAB-MS,基质辅助激光解吸附飞行时间质谱MALDI-TOFMS,电子喷雾质谱ESI-MS等等,不过能测大分子量的是基质辅助激光解吸附飞行时间质谱MALDI-TOFMS和电子喷雾质谱ESIMS,其中基质辅助激光解吸附飞行时间质谱MALD
核酸电泳实验
琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的标准方法。该技术操作简便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离心法)所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶EB(德元国际Cat# LY5009)染色,在紫外光下至少可以检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。此外
核酸染色实验
实验方法原理 在一般情况下,通过盐酸水解后使 DNA 残基分解碱基,然后从碳键处打断糖苷键而游离出醛基,再与无色复红液(Schiff)进行反应,形成紫红色的复合物(DNA)。常用 Feuhgen-Rossenbeck 染色法(孚尔根染色法)。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 Schiff 试剂染色
核酸免疫实验
基 本 方 案 1 小 鼠 注 射 接 种DNA在免疫前应先阅读动物处理(附 录 2C) 和 接 种 的(附 录 2E) 指导说明。在正式实验之前需先进行肌肉和皮下注射练习; D N A 的精准注射对于免疫成功起关键作用。可以 用 India ink (或相同的染料)来定位注射的部位是否正确。材料2
核酸免疫实验
介绍了用表达抗原的 DNA 增强免疫应答的途径。介绍了核酸免疫的两种方法:①注射含有 DNA 表达载体的生理盐水;② 用 基 因 枪 注 射 DNA。还包括了基因枪方法中使用的 DNA 包被金珠的制备和保存方法。实验步骤基 本 方 案 1 小 鼠 注 射 接 种DNA在免疫前应先阅读动物处理(附 录
2022天津质谱交流会-质谱大咖汇聚-推进质谱发展
——2022年第六届天津市质谱学术技术交流会2022年8月13日至14日,由天津市色谱研究会主办,布鲁克(北京)科技有限公司独家赞助的《2022年第六届天津市质谱学术技术交流会》在天津市蓟州区召开。分析测试百科网作为大会支持媒体为您带来大会的报导。本次学术技术交流会秉承以往各届会议的精神,邀请南开大
高分辨质谱与普通质谱有何区别
普通的MS只有一位sdfrog(站内联系TA)当然是元素分析要求的纯度高了,如果能做元素尽量还是做元素吧。小分子化合物确定结构式有多种方法,NMR,高分辨质谱(由于每个元素的原子量实际都是小数的,通过高分辨质谱可以直接获得化学式!)元素分析是不准的,通常有误差,好像高分子(聚合物)用的多一些,高分辨
高分辨质谱与普通质谱有何区别
普通的MS只有一位sdfrog(站内联系TA)当然是元素分析要求的纯度高了,如果能做元素尽量还是做元素吧。小分子化合物确定结构式有多种方法,NMR,高分辨质谱(由于每个元素的原子量实际都是小数的,通过高分辨质谱可以直接获得化学式!)元素分析是不准的,通常有误差,好像高分子(聚合物)用的多一些,高分辨
高分辨质谱与普通质谱有何区别
普通的MS只有一位sdfrog(站内联系TA)当然是元素分析要求的纯度高了,如果能做元素尽量还是做元素吧。小分子化合物确定结构式有多种方法,NMR,高分辨质谱(由于每个元素的原子量实际都是小数的,通过高分辨质谱可以直接获得化学式!)元素分析是不准的,通常有误差,好像高分子(聚合物)用的多一些,高分辨
高分辨质谱与普通质谱有何区别
普通的MS只有一位sdfrog(站内联系TA)当然是元素分析要求的纯度高了,如果能做元素尽量还是做元素吧。小分子化合物确定结构式有多种方法,NMR,高分辨质谱(由于每个元素的原子量实际都是小数的,通过高分辨质谱可以直接获得化学式!)元素分析是不准的,通常有误差,好像高分子(聚合物)用的多一些,高分辨