流式细胞仪检测技术实验
流式细胞仪（flow cytometer）是一种能够探测和计数以单细胞液体流形式穿过激光束的细胞检测装置，由于在检测中使用的细胞标志示踪物质为荧光标记物，因此，用来分离、鉴定细胞的流式细胞仪有被称为荧光激活细胞分类仪，是分离和鉴定细胞群及亚群的一种强而有力的应用工具。流式细胞仪实验方法原理流式细胞仪的使用一般分为三个步骤。第一，是仪器前阶段，包括试剂的准备，细胞制备、细胞的荧光染色；第二，是流式细胞仪阶段，主要是仪器的操作；第三，是结果分析阶段。实验材料淋巴细胞外周血的白细胞试剂、试剂盒FACS缓冲液PBS叠氮钠溶液仪器缓冲液FACS清洁液FACS洗净液仪器、耗材流式细胞仪实验步骤一、 细胞和试剂的准备1. 细胞样品：来源淋巴细胞或外周血的白细胞。2. 荧光标记单克隆抗体：常用的有FITC（fluorescein -isothiocyanate）和PE（phycoerythrin）标记的单克隆抗体。3. ......阅读全文
流式细胞仪检测技术实验
流式细胞仪（flow cytometer）是一种能够探测和计数以单细胞液体流形式穿过激光束的细胞检测装置，由于在检测中使用的细胞标志示踪物质为荧光标记物，因此，用来分离、鉴定细胞的流式细胞仪有被称为荧光激活细胞分类仪，是分离和鉴定细胞群及亚群的一种强而有力的应用工具。流式细胞仪实验方法原理流式细胞仪
流式细胞仪检测技术实验
流式细胞仪检测技术可应用于：（1）分离和鉴定细胞群及亚群；（2）分析肿瘤细胞的DNA、RNA含量；（3）分析细胞内抗原物质。实验方法原理流式细胞仪的使用一般分为三个步骤。第一，是仪器前阶段，包括试剂的准备，细胞制备、细胞的荧光染色；第二，是流式细胞仪阶段，主要是仪器的操作；第三，是结果分析阶段。实验
流式细胞仪检测技术实验
流式细胞仪检测技术可应用于：（1）分离和鉴定细胞群及亚群；（2）分析肿瘤细胞的DNA、RNA含量；（3）分析细胞内抗原物质。实验方法原理流式细胞仪的使用一般分为三个步骤。第一，是仪器前阶段，包括试剂的准备，细胞制备、细胞的荧光染色；第二，是流式细胞仪阶段，主要是仪器的操作；第三，是结果分析阶段。实验
流式细胞仪检测技术实验
实验方法原理 流式细胞仪的使用一般分为三个步骤。*，是仪器前阶段，包括试剂的准备，细胞制备、细胞的荧光染色；第二，是流式细胞仪阶段，主要是仪器的操作；第三，是结果分析阶段。实验材料 淋巴细胞外周血的白细胞试剂、试剂盒 FACS缓冲液PBS叠氮钠溶液仪器缓冲液FACS清洁液FACS洗
流式细胞仪检测技术的实验
实验方法原理 流式细胞仪的使用一般分为三个步骤。*，是仪器前阶段，包括试剂的准备，细胞制备、细胞的荧光染色；第二，是流式细胞仪阶段，主要是仪器的操作；第三，是结果分析阶段。实验材料 淋巴细胞外周血的白细胞试剂、试剂盒 FACS缓冲液PBS叠氮钠溶液仪器缓冲液FACS清洁液FACS洗
流式细胞仪检测技术
实验方法原理 流式细胞仪的使用一般分为三个步骤。第一，是仪器前阶段，包括试剂的准备，细胞制备、细胞的荧光染色；第二，是流式细胞仪阶段，主要是仪器的操作；第三，是结果分析阶段。实验材料 淋巴细胞外周血的白细胞试剂、试剂盒 FACS缓冲液PBS叠氮钠溶液仪器缓冲液FACS清洁液FACS洗净液仪器、耗材
细胞凋亡检测流式细胞仪检测技术
一、固定细胞的染色方法 1）PI单染色法 方法一 1．收集细胞（1～5）×106个，500～1000r/min离心5min，弃去培养液。 2．3ml PBS洗一次。 3．离心去PBS，加入冰预冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。 4．离心弃去固定液，3ml PBS重悬5min。 5．400目的筛网过滤
细胞凋亡检测：流式细胞仪检测技术
细胞调亡的流式细胞仪检测技术 一、固定细胞的染色方法 1 ） PI 单染色法 方法一1． 收集细胞（ 1 ～ 5 ）× 106 个， 500 ～ 1000r/min 离心 5min ，弃去培养液。2． 3ml PBS 洗一次。3． 离心去 PBS ，加入冰预冷的 70 ％的乙醇固定， 4 ℃， 1h
细胞凋亡检测流式细胞仪检测技术
一、固定细胞的染色方法 1）PI单染色法 方法一 1．收集细胞（1～5）×106个，500～1000r/min离心5min，弃去培养液。 2．3ml PBS洗一次。 3．离心去PBS，加入冰预冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。 4．离心弃去固定液，3ml PBS重悬5min。 5．400目的筛网过滤
细胞凋亡检测：流式细胞仪检测技术
细胞调亡的流式细胞仪检测技术一、固定细胞的染色方法1）PI单染色法方法一1．收集细胞（1～5）×106个，500～1000r/min离心5min，弃去培养液。2．3ml PBS洗一次。3．离心去PBS，加入冰预冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。4．离心弃去固定液，3ml PBS重悬5min。5．40
免疫组化专题：流式细胞仪检测技术实验（二）
⑤主机设定：一般是已设定好的适合测定淋巴细胞的条件，包括探测器的电压。探测器的电压是调空光电倍增管所能检测荧光密度的范围。⑥选择检测的波长和表达方式（plot）：如果用一种荧光抗体，一般选直方图（histogram）；如果用两种荧光抗体，常选点状二维图（dot plot）或轮廓线图（contour
免疫组化专题：流式细胞仪检测技术实验（一）
标签： 流式 细胞仪流式细胞仪（flow cytometer）是一种能够探测和计数以单细胞液体流形式穿过激光束的细胞检测装置，由于在检测中使用的细胞标志示踪物质为荧光标记物，因此，用来分离、鉴定细胞的流式细胞仪有被称为荧光激活细胞分类仪，是分离和鉴定细胞群及亚群的一种强而有力的应用工具。实验方法
实验时间_流式细胞仪检测细胞凋亡实验
流式细胞仪检测细胞凋亡可以：鉴定细胞凋亡形态；可以准确的进行凋亡细胞的计数；可以进行特异的定性分析和定量分析。实验原理细胞凋亡时，在细胞、亚细胞和分子水平上会发生的特征性改变，这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性。通过流式细胞仪检测这
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
PI单染色法 Heochst 33342/PI双染色法 Annexin V/PI双染色法 实验方法原理 主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞
细胞凋亡：流式细胞仪检测实验
实验方法原理 实验材料 要分析的细胞在FACS缓冲液中试剂、试剂盒 FACS缓冲液冰冷的100%乙醇（如果细胞是抗体标记的则用70%乙醇）1 mg ml RNase A含50μg ml 二碘化丙锭（PI)的PBS仪器、耗材 流式细胞仪实验步骤 1)凋亡刺激后，从培养液中沉淀所要分析的细胞，同样沉淀一
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
PI单染色法 Heochst 33342/PI双染色法 Annexin V/PI双染色法 实验方法原理 主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
流式细胞仪检测细胞凋亡可以： 鉴定细胞凋亡形态； 可以准确的进行凋亡细胞的计数； 可以进行特异的定性分析和定量分析。 实验原理 细胞凋亡时，在细胞、亚细胞和分子水平上会发生的特征性改变，这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征
细胞凋亡：流式细胞仪检测实验
用次GoZG1 DNA峰值计算细胞凋亡 用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞 通过TUNEL组织切面中的凋亡细胞的原位杂交 实验方法原理
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
实验方法原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面： 1. 细胞核的改变 由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
实验方法原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变zui具特征性，主要包括以下几个方面：1. 细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性
流式细胞仪检测细胞凋亡实验protocol
40年来，流式细胞术一直由多色流式主导。 尽管Fulwyler发明的初代仪器基于库尔特体积，但荧光在短短几年内成为流式细胞仪主导技术。 从20世纪80年代初到现在，技术开发人员一直致力于构建能够测量更多荧光参数（我们通常将其称为“颜色”）的仪器。 最开始，Göhde在1968年首次发表关于荧光
流式细胞仪检测技术操作方法
一、 细胞和试剂的准备 1. 细胞样品：来源淋巴细胞或外周血的白细胞。 2. 荧光标记单克隆抗体：常用的有FITC（fluorescein -isothiocyanate）和PE（phycoerythrin）标记的单克隆抗体。 3. 封闭抗体：抗Fc受体抗体 4. FACS缓冲液： 1
细胞调亡的流式细胞仪检测技术
一、固定细胞的染色方法1）PI单染色法方法一1．收集细胞（1～5）×106个，500～1000r/min离心5min，弃去培养液。2．3ml PBS洗一次。3．离心去PBS，加入冰预冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。4．离心弃去固定液，3ml PBS重悬5min。5．400目的筛网过滤1次，500～
流式细胞仪技术
利用各种显微镜进行形态学观察通常只能对细胞凋亡进行定性而不能定量。利用荧光素或者免疫组织化学方法标记凋亡细胞，则可以通过在显微镜下分别计数凋亡细胞数和总细胞数，计算两者的比值而进行半定量研究。数100～200个总细胞，既费时又费力；显微镜下视野的不同还会造成结果的变异。流式细胞仪（flow cyto
流式细胞仪技术
测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光，经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞经过焦点时，发出一束散射光/或荧光,经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器，光检测器把散射光定量转化成电信号，经数字转换器进行数字化后而成整数，以调出显示和进行分析。一、样品的制备细
流式细胞仪实验安全
生物学操作技术最重要的就是安全问题，在操作流程中有诸多环节存在各种安全隐患，需要谨慎操作。 （1）电安全问题：偏振板，激光供电等都是高电压，需要特别小心。仪器内部只能由厂家人员及相关工作人员才可操作，实验人员不得冒险操作。 （2）激光安全问题：流式细胞术的激光有相应的cover保护，不得打开
流式细胞仪检测细胞凋亡实验PI单染色法
一、基本原理其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面：1、细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变
流式细胞仪在实验室主要用于哪些检测
流式可以检测的样本很多： 细胞表面的蛋白，通过荧光抗体直接标记 细胞内部的蛋白，细胞固定，通透后再用荧光抗体识别 细胞内部的DNA含量，细胞固定，通透后加DNA染料 细胞内部钙离子浓度，直接加钙离子浓度荧光染料染色 细胞内部线粒体膜电位，比如JC-1，罗丹明染料 使用微球阵列，可以同
流式细胞仪检测细胞凋亡（双染色法）实验步骤
一、基本原理经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞，而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色，且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据
流式细胞仪检测细胞凋亡实验——PI单染色法
实验方法原理主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变，包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等进行检测。实验材料细胞试剂、试剂盒PBSPI蒸馏水乙醇仪器、耗材棕色瓶400目筛网流式细胞仪实验步骤一、收集细胞收集细胞｛数目约（1~ 5）x106个/mL｝