流式细胞仪检测技术实验

流式细胞仪(flow cytometer)是一种能够探测和计数以单细胞液体流形式穿过激光束的细胞检测装置,由于在检测中使用的细胞标志示踪物质为荧光标记物,因此,用来分离、鉴定细胞的流式细胞仪有被称为荧光激活细胞分类仪,是分离和鉴定细胞群及亚群的一种强而有力的应用工具。流式细胞仪实验方法原理流式细胞仪的使用一般分为三个步骤。第一,是仪器前阶段,包括试剂的准备,细胞制备、细胞的荧光染色;第二,是流式细胞仪阶段,主要是仪器的操作;第三,是结果分析阶段。实验材料淋巴细胞外周血的白细胞试剂、试剂盒FACS缓冲液PBS叠氮钠溶液仪器缓冲液FACS清洁液FACS洗净液仪器、耗材流式细胞仪实验步骤一、 细胞和试剂的准备1. 细胞样品:来源淋巴细胞或外周血的白细胞。2. 荧光标记单克隆抗体:常用的有FITC(fluorescein -isothiocyanate)和PE(phycoerythrin)标记的单克隆抗体。3. ......阅读全文

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

流式细胞仪技术专辑

 最方便的实验干货查询工具微信扫码进入「丁香实验」小程序编辑: 呜咽分享到:      Flow Cytometry Analysis (Springer Lab, Harvard University)Flow cytometry employs instrumentation that scan

流式细胞仪技术(FCM)

流式细胞术(FCM)简述流式细胞术 (Flow Cytometry)是70年代发展起来的一种利用流式细胞仪对细胞等生物粒子的理化及生物学特性(细胞大小、DNA/RNA含量、细胞表面抗原表达等)进行定量、快速、客观多参数相关检测分析的新技术。它借鉴了荧光显微镜技术与血球计数原理,同时利用荧光染料,激光

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

流式细胞仪技术专辑

Flow Cytometry Analysis (Springer Lab, Harvard University) Flow cytometry employs instrumentation that scans single cells flowing past excitation sour

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

流式细胞仪技术概述

  流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进

流式细胞仪检测原理

流式细胞仪检测原理如下:流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指

流式细胞仪检测原理

流式细胞仪检测原理如下:流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指

流式细胞仪检测原理

流式细胞仪检测原理如下:流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指

流式细胞仪检测原理

流式细胞仪检测原理如下:流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指

流式细胞仪检测实验用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞

实验材料要分析的细胞试剂、试剂盒 PBS95%乙醇(不是100%乙醇)冰冷多聚甲醛固定液TdT反应液TdT 生物素-dUTP混合液异硫氰酸荧光素(FITC)-链霉亲和素(streptavidin)结合物仪器、耗材12 mm×75 mm圆底离心管配有269模型转子的IEC 6R6000离心机(或相当的

流式细胞仪检测实验_用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞

实验材料要分析的细胞试剂、试剂盒 PBS95%乙醇(不是100%乙醇)冰冷多聚甲醛固定液TdT反应液TdT 生物素-dUTP混合液异硫氰酸荧光素(FITC)-链霉亲和素(streptavidin)结合物仪器、耗材12 mm×75 mm圆底离心管配有269模型转子的IEC 6R6000离心机(或相当的

流式细胞仪实验方法

一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA 四、血小板1.活化2.活化检测3.网织血小板 五、红细胞1.网织红细胞2.PNH3.胎儿红

流式细胞仪技术参数

  指标  为了表征仪器性能,往往根据使用目的和要求而提出几个技术参数或指标来定量说明。对于流式细胞仪常用的技术指标有荧光 分辨率、荧光灵敏度、适用样品浓度、分选纯度、可分析测量参数等。  荧光分辨率  强度一定的荧光在测量时是在一定道址上的一个 正态分布的峰,荧光 分辨率是指两相邻的峰可分辨的最小

JAM检测技术检测原理和实验方法

JAM检测技术是用于测定细胞死亡或凋亡的方法,如51Cr稀放法事基于细胞死亡往往伴随有细胞膜破裂及细胞质的释放,用51Cr或125I标记相关的靶细胞,与效应细胞共培养一定时间后,测定一定体积的培养上清中的放射性计数,以反映细胞损伤情况。而人们发现,细胞死亡的早期反应,细胞内DNA被酶裂解成180kb

流式细胞仪检测细胞凋亡

细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是cas

使用流式细胞仪检测病毒

  流式细胞术是一种通常用于从混合样品中识别和分离特定细胞的技术。这种技术可以应用于大量的样品筛选,这对于进一步的统计分析是非常理想的。流式细胞仪已用于检测病毒,该技术被人们称为“流式病毒仪”。  此外,流式细胞术已被用于根据感染性的不同对病毒颗粒进行分类,以及检测被病毒感染的细胞。  “流式病毒分

流式细胞仪细胞凋亡检测

一 PI单染色法  基本原理   其原理主要是根据细胞 凋亡时在细胞、亚细胞和分子 水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性,主要包括以下几个方面:1. 细胞核的改变:由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料

带你了解流式细胞仪检测

  什么是流式细胞仪?   流式细胞仪(Flowcytometry)是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一

使用流式细胞仪检测病毒

  流式细胞术是一种通常用于从混合样品中识别和分离特定细胞的技术。这种技术可以应用于大量的样品筛选,这对于进一步的统计分析是非常理想的。流式细胞仪已用于检测病毒,该技术被人们称为“流式病毒仪”。   此外,流式细胞术已被用于根据感染性的不同对病毒颗粒进行分类,以及检测被病毒感染的细胞。  “流式病毒

流式细胞仪检测细胞凋亡实验Annexin-V/PI双染色法

实验方法原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。A

流式细胞仪检测细胞凋亡实验——Heochst-33342/PI双染色法

实验方法原理流式细胞仪通常根据细胞膜完整性将细胞分为“活细胞”和“死细胞”,因此正常细胞和凋亡细胞归为活细胞。活细胞染料如Hoechst 33342能少许进入正常细胞膜而对细胞没有太大得细胞毒作用。Hoechst 33342在凋亡细胞中的荧光强度要比正常细胞中要高,Hoechst 33342在凋亡细

流式细胞仪检测细胞凋亡实验Heochst-33342/PI双染色法

实验方法原理流式细胞仪通常根据细胞膜完整性将细胞分为“活细胞”和“死细胞”,因此正常细胞和凋亡细胞归为活细胞。活细胞染料如Hoechst 33342能少许进入正常细胞膜而对细胞没有太大得细胞毒作用。Hoechst 33342在凋亡细胞中的荧光强度要比正常细胞中要高,Hoechst 33342在凋亡细

流式细胞仪检测细胞凋亡实验——Annexin-V/PI双染色法

流式细胞仪检测细胞凋亡可应用于:(1)鉴定细胞凋亡形态;(2)准确的进行凋亡细胞的计数;(3)进行特异的定性分析和定量分析。实验方法原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种

高温实验电炉炉衬厚度检测技术

高温实验电炉炉衬厚度检测技术:高温炉炉衬的使用寿命直接影响了高温炉的整体使用寿命,今天主要谈谈如何检测高温炉炉衬的腐蚀情况,介绍几种切实可行的办法。1、电阻法是在炉衬内部埋设电阻元件,传感器前端与炉衬内表面对齐,通过引线与测量系统相连接,电阻元件的电阻值与其长度相关,随着电阻元件与炉衬同步损耗,电阻

梅毒实验室检测技术评价

梅毒是一种经输血或使用血制品以及性传播的传染病,因此梅毒抗体检测是献血员必不可少的检测项目。梅毒的病原体是梅毒螺旋体(treponema pallidum,TP),其含有表面抗原,能刺激机体产生两类抗体,一类为螺旋体的特异性抗体;另一类为螺旋体的非特异性抗体。根据梅毒螺旋体的生物学及免疫学特性,目前

流式细胞仪实验方法(一)

一、实验准备1.   标本制备:2.   最小化非特异性结合:二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA四、血小板1.活化2.活化检测3.网织血小板五、红细胞1.网织红细胞2.PNH3.胎儿红细胞六、肿瘤学

流式细胞仪实验方法(二)

第二部分 细胞因子 细胞内细胞因子的流式细胞仪检测 一、简介随着研究的进展,仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括:ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制