研究发现染转录辅助因子FACT的独特双重功能

两句耳熟能详的俗语“龙生龙,凤生凤”和“龙生九子各不相同”道出了生物遗传现象中两个关键的特点:相似性和特异性。人类基因组精确测序显示人类基因的差异很小(<0.3%),这解释了遗传相似性的来源;另一方面,基因被一类称为组蛋白的生物大分子通过层层组装形成高度有序的染色质结构,受重塑因子、组装因子、组蛋白和DNA的化学修饰以及组蛋白变体等多种因素影响,导致了遗传的特异性。单分子操纵技术是研究染色质动态调控的强有力手段。 中国科学院物理研究所/北京凝聚态物理国家研究中心软物质物理重点实验室从2002年开始逐步建立起以磁镊力谱和荧光光谱为主的单分子研究体系,在DNA凝聚(JACS 2006,PRL 2012)、DNA与抗癌药物作用(NAR 2009, PRE 2015)、端粒四联体DNA折叠(JACS 2013)以及DNA解旋酶分子机理(EMBOJ 2008,NAR 2015,PRL 2016)等多个课题中取得了系列进展。最近......阅读全文

研究发现染转录辅助因子FACT的独特双重功能

  两句耳熟能详的俗语“龙生龙,凤生凤”和“龙生九子各不相同”道出了生物遗传现象中两个关键的特点:相似性和特异性。人类基因组精确测序显示人类基因的差异很小(

RNase-and-DEPC-Treatment:-Fact-or-Laboratory-Myth

Researchers are usually trained in RNA isolation and analysis methods by one another or by technical manuals. Experimental procedures are often not qu

什么是有机辅助因子?

有机辅助因子是指双成分酶中相对分子质量较小的有机化合物。它们在酶催化过程中起着传递电子、原子或基团的作用。(1)烟酰胺核苷酸(NAD+和NADP+) 烟酰胺是B族维生素的一员,烟酰胺核苷酸是许多脱氢酶的辅助因子,如乳酸脱氢酶、醇脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶等。起辅助因子作用的烟酰胺核苷酸主要

什么是无机辅助因子?

无机辅助因子主要是指各种金属离子,尤其是各种二价金属离子。(1)镁离子 镁离子是多种酶的辅助因子,在酶的催化中起重要作用。例如,各种激酶、柠檬酸裂合酶、异柠檬酸脱氢酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、各种自我剪接的核酸类酶等都需要镁离子作为辅助因子。(2)锌离子 锌离子是各种金属蛋白酶,如木瓜蛋白酶、菠萝蛋

酶催化的辅助因子介绍

有些酶类的活性仅由它们的蛋白质结构所决定,而另一些酶类还需要一种或多种的非蛋白质组分,称为辅助因子。辅助因子可以是金属离子或金属络合物,也可以是被称为辅酶的有机分子;有些酶类两者都需要。

什么是酶的辅助因子?

从酶的组成来看,有些酶仅由蛋白质或核糖核酸组成,这种酶称为单成分酶。而有些酶除了蛋白质或核糖核酸以外,还需要有其他非生物大分子成分,这种酶称为双成分酶。蛋白类酶中的纯蛋白质部分称为酶蛋白。核酸类酶中的核糖核酸部分称为酶RNA。其他非生物大分子部分称为酶的辅助因子。双成分酶需要有辅助因子存在才具有催化

Nature:研究者揭示FACT蛋白操纵核小体机制

  众所周知,包装DNA的组蛋白(H2A、H2B、H3和H4)需要分子伴侣。FACT(Facilitates Chromatin Transcription)蛋白是一类至关重要的组蛋白伴侣(histone chaperone)。将基因组DNA组装成核小体深刻地影响了真核生物中所有DNA相关过程。FA

银染

1.将固定液中的凝胶摇动过夜或至少1小时。2.将保温液中的凝胶轻微振荡2小时。3.去离子水清洗凝胶3次,每次20分钟。4.将硝酸银溶液中凝胶轻微振荡30分钟。5.用去离子水快速洗胶30秒。6.将定影液中凝胶摇动5~30分钟,时间由所加的蛋白质量决定。7.如果已经达到所需的颜色深度,将凝胶放到定影液中

胚胎干细胞中ERV的一个新的调控机制

内源性逆转录病毒(endogenous retrovirus, ERV)属于反转座子的一种,其中MERVL是2细胞胚胎与胚胎干细胞中2细胞样细胞亚群的标志性ERV。之前的发现多集中于研究H3组蛋白变体、修饰及对应的分子伴侣对ERV的表达调控,但是其他组蛋白分子伴侣是否参与调控ERV的表达仍然未知。此

Nature:解析核小体的重塑机制

  在细胞核中,基因组DNA紧紧包裹在核小体上形成染色质,但基因在如此紧密的包装中是无法表达的。现在德国慕尼黑大学LMU的研究团队,揭示了局部释放核小体DNA的分子机制,正是这一机制使染色体DNA得以转录。文章发表在本期的Nature杂志上。   高等生物的细胞核负责储存基因组DNA,这些DNA环

银染实验

试剂、试剂盒 甲醇(50% 和5%v v)二硫苏糖醇 AgNO3柠檬酸(固态)显影液实验步骤 试剂甲醇(50% 和5%v/v)10umol/L二硫苏糖醇(DTT)AgNO3(0.1%w/v)柠檬酸(固态)显影液操作程序此操作程序是根据Merril(1987)的方法修改而成。室温下,凝胶在旋转平台上缓

银染实验

银染实验             试剂、试剂盒 甲醇(50% 和5%v v) 二硫苏糖醇 AgNO3

银染实验

试剂、试剂盒甲醇(50% 和5%v v)二硫苏糖醇AgNO3柠檬酸(固态)显影液实验步骤试剂甲醇(50% 和5%v/v)10umol/L二硫苏糖醇(DTT)AgNO3(0.1%w/v)柠檬酸(固态)显影液操作程序此操作程序是根据Merril(1987)的方法修改而成。室温下,凝胶在旋转平台上缓慢摇动

浅谈预染蛋白Marker与未预染蛋白Marker

在Western实验中,蛋白Marker可以监控蛋白质在SDS-PAGE中的迁移,监控蛋白的转膜效率,确定蛋白分子量大小。选择正确的蛋白Marker是western blot实验成功的必备条件之一。蛋白Marker分为两种:一种是未预染的Marker,即宽分子量蛋白标准,高分子量蛋白标准及低分子量蛋

维生素与酶的辅助因子的关系

从酶的组成来看,有些酶仅由蛋白质或核糖核酸组成,这种酶称为单成分酶。而有些酶除了蛋白质或核糖核酸以外,还需要有其他非生物大分子成分,这种酶称为双成分酶。蛋白类酶中的纯蛋白质部分称为酶蛋白。核酸类酶中的核糖核酸部分称为酶RNA。其他非生物大分子部分称为酶的辅助因子。双成分酶需要有辅助因子存在才具有催化

SSR银染方法

SSR银染方法(轻轻震荡)1、固定10%乙醇+0.5%冰乙酸 6min×2次2、染色0.2% AgNO3 12min3、漂洗(1)蒸馏水 1-2min(2)0.002% Na2S2O3 1-2min(3)显色1.5%NaOH + 0.4%甲醛(4)保存0.75%Na2CO3

异染性染料

中文名称异染性染料英文名称metachromatic dye定  义使细胞或组织染色后显示出颜色差异的染料。如甲苯氨蓝、天青A等,它们可用于显示肥大细胞硫酸黏多糖(肝素)的含量。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

银染的应用

主要是用于垂直凝胶电泳中低丰度蛋白的检测,如内源性GST-Pulldown、Co-IP等实验中相互作用蛋白的研究 。

酶催化的相互转化和辅助因子的简介

  相互转化  已知有将近2000种不同的酶,其中至少已有 200种已制出结晶物质,并已证明酶都是蛋白质,其分子量范围约从10000到1000000以上。通常按照酶所催化的反应来分类和定名。如氧化还原酶可催化电子传递反应,在细胞呼吸和能量产生中起着重要的作用;转移酶可催化一种化学基团,从一个底物转移

梅特勒托利多ABS/FACT经典系列先进型分析天平

产品简介:仪器简介:精确、操作简便、性能可靠、经久耐用——这是对梅特勒-托利多经典系列天平最恰当的评价。AB-S/FACT经典系列先进型分析天平列表:AB104-S/FACT可读性0.…                                   一、仪器简介:精确、操作简便、性能可

什么是异染性?

异染性metachromasy 指在用单一染料染细胞和组织时,染色部分被染成与染剂色调不同的颜色。

负染技术及其应用

负染技术是利用重金属盐(常用磷钨酸盐或醋酸铀溶液)沉积到样品四周,样品四周散射电子的能力就较强,因而表现为暗区;样品本身散射电子的能力较弱,则表现为亮区,这样便能把样品的外形与表面结构清楚地衬托出来。是观察微小颗粒状生物材料的外部形状常用的染色方法。主要应用于病毒、支原体、细菌等微生物外部形态的观察

银染实验用水指南

SDS聚丙烯酰胺凝胶染色是蛋白质研究的一个基础方法。染色方法有很多,实际应用中,考马斯亮蓝染色(考染)和银染是运用的最多的方法。考马斯亮蓝G250在游离状态下呈红色,它与蛋白质结合后变为蓝色,结合物在595 nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。银染实验中

核酸的银染方法

核酸硝酸银染色:参考《锌对缺血再灌注大鼠肝脏金属硫蛋白一1基因表达的影响》营养学报2000年第22卷第4期294-297取PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳,所得凝胶进行硝酸银染色.程序如下:(1)于10%乙醇+0.5% 冰醋酸溶液中固定6 min;(2)于10%乙醇+0.5% 冰醋酸溶液

转录图谱的转录图谱的意义

在于它能有效地反应在正常或受控条件中表达的全基因的时空图。通过这张图可以了解某一基因在不同时间不同组织、不同水平的表达;也可以了解一种组织中不同时间、不同基因中不同水平的表达,还可以了解某一特定时间、不同组织中的不同基因不同水平的表达。人类基因组是一个国际合作项目:表征人类基因组,选择的模式生物的D

RNA的转录和逆转录

转录是以DNA为模板合成RNA的过程,经过转录DNA分子中的贮存信息传递到RNA分子中,再由mRNA做为模板合成蛋白质分子。逆转录也是从RNA的一个特定位置开始的,以RNA分子中的一条链为模板,在逆转录酶的作用下,以四种脱氧核苷酸为原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大

RNA复制、转录与逆转录

转录是以DNA为模板合成RNA的过程,经过转录DNA分子中的贮存信息传递到RNA分子中,再由mRNA做为模板合成蛋白质分子。逆转录也是从RNA的一个特定位置开始的,以RNA分子中的一条链为模板,在逆转录酶的作用下,以四种脱氧核苷酸为原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大

转录因子的转录调控区的介绍

  同一家族的转录因子之间的区别主要在转录调控区。  转录调控区包括转录激活区(transcription activation domain)和转录抑制区(transcription repression domain)二种。近年来,转录的激活区被深入研究。它们一般包含DNA结合区之外的30-10

关于体外转录的转录条件介绍

  转录模板必须满足:  1. 在基因组全长克隆过程中,在正向引物5‘末端添加T7启动子序列;  2. 以T7启动子作为体外转录启动子,在启动子后面靶位序列连续带有3个G,转录效率最 高;  3. 在正向引物5/端添加一个帽子G,有利于提高体外转录RNA分子的侵染活性。

皮肤巩膜黄染的检查

  1、皮肤、巩膜等组织的黄染,黄疸加深时,尿、痰、泪液及汗液也被黄染,唾液一般不变色。  2、尿和粪的色泽改变。  3、消化道症状,常有腹胀、腹痛、食欲不振、恶心、呕吐、腹泄或便秘等症状。  4、胆盐血症的表现,主要症状有:皮肤瘙痒、心动过缓、腹胀、脂肪泄、夜盲症、乏力、精神萎靡和头痛等。