研究发现染转录辅助因子FACT的独特双重功能
两句耳熟能详的俗语“龙生龙,凤生凤”和“龙生九子各不相同”道出了生物遗传现象中两个关键的特点:相似性和特异性。人类基因组精确测序显示人类基因的差异很小(<0.3%),这解释了遗传相似性的来源;另一方面,基因被一类称为组蛋白的生物大分子通过层层组装形成高度有序的染色质结构,受重塑因子、组装因子、组蛋白和DNA的化学修饰以及组蛋白变体等多种因素影响,导致了遗传的特异性。单分子操纵技术是研究染色质动态调控的强有力手段。 中国科学院物理研究所/北京凝聚态物理国家研究中心软物质物理重点实验室从2002年开始逐步建立起以磁镊力谱和荧光光谱为主的单分子研究体系,在DNA凝聚(JACS 2006,PRL 2012)、DNA与抗癌药物作用(NAR 2009, PRE 2015)、端粒四联体DNA折叠(JACS 2013)以及DNA解旋酶分子机理(EMBOJ 2008,NAR 2015,PRL 2016)等多个课题中取得了系列进展。最近......阅读全文
PCR-产物电泳银染实验
实验方法原理聚丙烯酰胺凝胶(PAG)是由丙烯酰胺单体和交联剂亚甲基双丙烯酰胺,在引发剂过硫酸胺(AP)提供自由基和催化剂四甲基乙二胺(TEMED)的作用下聚合而成。丙烯酰胺可由天然光线诱发聚合,所以其水溶液应贮藏在棕色瓶中,置低温 4℃ 更佳。由于其水溶液稳定性
细胞凋亡检测(单染法)
实验概要本实验介绍了细胞凋亡检测(Annexin-V-FITC 单染法)(Assay of Cell Apoptosis)的原理及操作流程。实验原理细胞凋亡或称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death,PCD)是细胞的生命现象之一,它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴
PCR-产物电泳银染实验
常用的核酸电泳法有两种。①水平电泳:琼脂糖凝胶,紫外光下判断条带。此法经济省时,但分辨率较低。②垂直电泳:聚丙烯酰胺凝胶,可见光下判断条带。此法相对费力,但分辨率较高。分辨率高是聚丙烯酰胺电泳法被优先用于克隆性基因重排条带判断的关键。在聚丙烯酰胺凝胶上较宽弥散被判断为假阳性(阴性)的条带,在琼脂糖胶
PCR-产物电泳银染实验
实验方法原理 聚丙烯酰胺凝胶(PAG)是由丙烯酰胺单体和交联剂亚甲基双丙烯酰胺,在引发剂过硫酸胺(AP)提供自由基和催化剂四甲基乙二胺(TEMED)的作用下聚合而成。丙烯酰胺可由天然光线诱发聚合,所以其水溶液应贮藏在棕色瓶中,置低温 4℃ 更佳。由于其水溶液稳定性较差,通常 2 个月内用完为好。
皮肤巩膜黄染的检查
1、皮肤、巩膜等组织的黄染,黄疸加深时,尿、痰、泪液及汗液也被黄染,唾液一般不变色。 2、尿和粪的色泽改变。 3、消化道症状,常有腹胀、腹痛、食欲不振、恶心、呕吐、腹泄或便秘等症状。 4、胆盐血症的表现,主要症状有:皮肤瘙痒、心动过缓、腹胀、脂肪泄、夜盲症、乏力、精神萎靡和头痛等。
皮肤巩膜黄染的原因
1、黄疸引发者特点:A,黄疸首先出现于巩膜,硬腭后部及软腭黏膜上,随着血中胆红素浓度的继续增高,黏膜黄染更明显时,才会出现皮肤黄染。B,巩膜黄染湿连续的,近角巩膜缘处黄染轻,黄色淡,远角巩膜缘处黄染重,黄色深。 2、胡萝卜素增高引发:A,黄染首先出现于手掌,足底,前额以及鼻部皮肤。B,一般不出
竟用工业染料染牛肉
9月19日,西安市工商局又在沙井村捣毁了一个往牛肉里添加布匹染料的黑窝点。 这个黑窝点在西安市沙井村一居民生活区内,极其隐蔽。记者昨日一踏近窝点,就闻到一股恶臭,地面上满是血色的杂秽,院内有几个大盆,盆中泡着膨大的牛皮,在灰暗的作坊内放着已经切好的牛下水和香肠,菜刀上粘着牛油等东西,
特染:-结缔组织染色
一、Mallory三色染色法1. 试剂配制(1)重铬酸钾液 重铬酸钾2.5g,醋酸5ml,蒸馏水95ml(2)苯胺蓝桔黄G液 苯胺蓝0.5g,桔黄G2g,磷钨酸1g,蒸馏水100ml(3)酸性复红液 酸性复红0.5g,蒸馏水100ml2.染色步骤(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。(2
银染实验的操作流程
实验目的检测聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质。实验原理在碱性条件下,用甲醛将蛋白带上的硝酸银(银离子)还原成金属银,以使银颗粒沉积在蛋白带上。染色的程度与蛋白中的一些特殊的基团有关,不含或者很少含半胱氨酸残基的蛋白质有时候呈负染。银染的详细机制还不是非常清楚。试剂:乙醇、冰醋酸(纯乙酸)、乙酸钠、硫代硫酸钠
胰酶会染菌吗?
胰酶会被污染,而且细菌真菌都有可能感染,我有胰酶细菌感染的经历,同行有真菌感染的经历。胰蛋白酶能裂解细菌表面蛋白,所以对细菌有一定的杀伤作用,但是有细菌及真菌能够抵抗胰酶,和细菌及真菌的抗药性是一样的。所以无菌操作及按需分装是必要的。
转录因子的转录调控区的介绍
同一家族的转录因子之间的区别主要在转录调控区。 转录调控区包括转录激活区(transcription activation domain)和转录抑制区(transcription repression domain)二种。近年来,转录的激活区被深入研究。它们一般包含DNA结合区之外的30-10
关于体外转录的转录条件介绍
转录模板必须满足: 1. 在基因组全长克隆过程中,在正向引物5‘末端添加T7启动子序列; 2. 以T7启动子作为体外转录启动子,在启动子后面靶位序列连续带有3个G,转录效率最 高; 3. 在正向引物5/端添加一个帽子G,有利于提高体外转录RNA分子的侵染活性。
染-性-疾-病-动-物-模-型——弓-形-虫-感-染-动-物-模-型
实验步骤 基本方案 1 诱导小鼠急性弓形虫 T. gondii感染材 料T. gondii弓形虫 M E 4 9 株 慢 性 感 染(1 个月以上)的 雌 性 小 鼠(C 57B L /6、 C B A /Ca 或 Swiss-Webster) (见辅助方案 2)。7 0 % (v/V ) 乙醇P
关于转录因子的转录抑制区的介绍
也是转录因子调控表达的重要位点,但是对其作用机理研究尚不深入。可能的作用方式有三种:1)与启动子的调控位点结合,阻止其它转录因子的结合;2)作用于其它转录因子,抑制其它因子的作用;3)通过改变DNA的高级结构阻止转录的发生。 转录因子必须在核内作用,才能起到调控表达的目的。因此,转录因子上的核
皮肤巩膜黄染的鉴别诊断
出现黄疸时,应检查血清总胆红素和直接胆红素,以区别胆红素升高的类型,另外检查尿胆红素、尿胆原以及肝功能也是必不可少的。 1、间接胆红素升高为主的黄疸。主要见于各类溶血性疾病、新生儿黄疸等疾病。直接胆红素与总胆红素比值小于35%。 除上述检查外,还应进行一些有关溶血性疾病的辅助检查,如红细胞脆
Annexin-VPI双染法
Annexin V-PI 双染法在细胞凋亡的早期就有细胞膜表面破损发生。破损时凋亡细胞表面的磷脂腺丝氨酸(PS)可以从细胞内膜翻转至细胞的外膜。该过程发生在DNA片段化之前,因而检测PS的表达,能反映早期凋亡。AnnexinV是相对分子质量为35 000大小的Ca2+依赖的磷脂结合蛋白,对PS有很高
异染性染料的功能介绍
中文名称异染性染料英文名称metachromatic dye定 义使细胞或组织染色后显示出颜色差异的染料。如甲苯氨蓝、天青A等,它们可用于显示肥大细胞硫酸黏多糖(肝素)的含量。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
异染性染料的功能特点
异染性染料有甲苯胺蓝、天青B、硫堇(碱性染料)和刚果红系染料(酸性染料)等。如单指异染性时,通常是指由碱性染料染色的。异染性与染料溶液的浓度有关,也可由于混杂了其他物质而引起。例如某些组织成分如结缔组织和软骨基质中的氨基聚糖经甲苯胺蓝(蓝色)染料染色后,呈紫红色,这就叫异染性。
脂染介导的-DNA-转染实验
实验材料 指数生长的哺乳动物细胞培养物 试剂、试剂盒 脂染试剂 NaCl 枸橼酸钠
黑米褪色未必染过色
近日,长安的谢先生在该镇两家大型超市购回黑米后,发现黑米经清水浸泡后有褪色现象。谢先生怀疑其购买的黑米为人工染色而成。昨天上午,记者接投诉后到被投诉的两家超市购得黑米后,同样发现黑米有褪色现象。不过该超市的工作人员介绍,超市出售的黑米都有正规进货渠道,检验合格后才会上架出售。黑米经过清水浸泡后褪
tunel和dapi双染的意义
为维持内环境稳定,能够与DNA强力结合的荧光染料。1、细胞凋亡是指为维持内环境稳定,生物体内细胞在特定的内源或外源信号诱导下,其死亡途径被激活,并在有关基因的调控下发生的程序性死亡过程。2、DAPI,即4',6-二脒基-2-苯基吲哚,是一种能够与DNA强力结合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测
银染的功能与方法特点
银染是一种检测聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法,其原理是银离子在碱性 pH 环境下被还原成金属银,沉淀在蛋白质的表面上显色。银染的方法种类很多,有文献报道的就有 100 多种。但是其准确的染色机制还不是特别地清楚。由于银染的灵敏度很高,可染出胶上低于 1ng 的蛋白质点,故广泛地用在 2D 凝胶分析上,
发酵过程染菌及其防治(一)
发酵染菌:指在发酵过程中生产菌以外的其他微生物侵入了发酵系统,从而使发酵过程失去真正意义上的纯种培养。染菌对发酵的影响一、染菌对不同发酵过程的影响1、青霉素发酵过程:由于许多杂菌都能产生青霉素酶,因此不管染菌是发生在发酵前期、中期或后期,都会使青霉素迅速分解破坏,使目的产物得率降低,危害十分严重。2
银染(silver-staining)操作规程
实验原理:在碱性条件下,用甲醛将蛋白带上的硝酸银(银离子)还原成金属银,以使银颗粒沉积在蛋白带上。染色的程度与蛋白中的一些特殊的基团有关,不含或者很少含半胱氨酸残基的蛋白质有时候呈负染。银染的详细机制还不是非常清楚。 试剂:乙醇、冰醋酸、乙酸钠、硫代硫酸钠、硝酸银、碳酸钠、甘氨酸或EDTA.Na
发酵过程染菌及其防治(二)
三、发酵染菌原因分析1、染菌的杂菌种类分析杂菌原因耐热的芽胞杆菌培养基或设备灭菌不彻底、设备存在死角等球菌、无芽胞杆菌等种子带菌、空气过滤效率低、除菌不彻底、设备渗漏、操作问题等真菌设备或冷却盘管渗漏、无菌室灭菌不彻底、无菌操作不当、糖液灭菌不彻底(糖液放置时间较长)等2、发酵染菌的规模分析大批量发
皮肤巩膜黄染的缓解方法
1、应以清淡为主,不宜吃辛辣、油腻的食物。多吃易消化吸收的食物。 2、黄疸型肝炎患者以高蛋白低脂肪的摄入为主,如牛肉、鱼等,平时可以多吃黑米、高梁、糯米等有助力于消化吸收的食物,多吃水果等含维生素多的食物。 3、另外,黄疸型肝炎患者要做到不吸烟、不喝酒,日常生活也要有规律,最好不要熬夜,不要
脂染介导的-DNA-转染实验
下述方法是 Mark Evans 所研究的一种方法的改进(Alexion Pharmaceuticals,New Haven,Connecticut)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔。实验材料指数生长的哺乳动物细胞培养物试剂、试剂盒脂染试剂N
染性疾病动物模型_利-什-曼-原-虫-感-染-的-小-鼠-模-型
实验步骤 基 本 方 案 皮 肤 利 什 曼 原 虫 病 小 鼠 模 型材 料寄生虫接种物,无鞭毛体或后发育期前鞭毛体(见辅助方案 1〜3)D M E M 或 H B S S (附录 1),不加CaCl2或MgCl2小 鼠1 9 9 完 全 培 养 基(C-M199)测 径 器(游标 ,标度盘或数字
CCAAT转录因子
中文名称CCAAT转录因子英文名称CCAAT transcription factor定 义可与启动子中的CCAAT元件发生特异性相互作用的转录因子。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞遗传(二级学科)
核转录分析
实验材料 cDNA0.45um 硝酸纤维素 尼龙膜 酵母 tRNA试剂、试剂盒 PBS NP-40 裂解缓: 20XSSC LNaOH 甘油储存缓冲液 10X 转录缓冲液 核苷酸:ATPGTPCTP 200uCi「α32P]-UTP 10XSET 蛋占酶 K 无 RNase 的 DNase