单抗糖基化调控之控制参数篇

关键质量参数是单抗仿制药研发的标杆,包括糖基化修饰、聚体、电荷异质性等,其中如糖基化修饰对单抗的生物活性、免疫原性、药物代谢动力学、构象、稳定性及溶解度具有重要的影响。细胞培养过程中细胞所处环境,如pH、温度、渗透压、溶氧等参数会影响到单抗糖基化表现,本文就文献中对渗透压、培养时间和溶氧等培养控制参数,以及温度、剪切力和培养模式对糖基化影响的研究进行了简要总结。 渗透压和培养时间 体系中渗透压的调节可以通过向基础培养基或补料培养基中加入NaCl实现,从而考察渗透压对细胞生长、蛋白产量及质量的影响。Efren Pacis团队将基础培养基渗透压分别配制为300、330、360和400 mOsm/kg,补料培养基的渗透压为750和1250 mOsm/kg,并取不同时间段的样品进行检测,进而就渗透压及培养时间对蛋白糖基化的影响进行研究,实验过程中采用的为CHO细胞。 以渗透压为300 mOsm/kg的基础培养基和750 mOs......阅读全文

单抗糖基化调控之控制参数篇

  关键质量参数是单抗仿制药研发的标杆,包括糖基化修饰、聚体、电荷异质性等,其中如糖基化修饰对单抗的生物活性、免疫原性、药物代谢动力学、构象、稳定性及溶解度具有重要的影响。细胞培养过程中细胞所处环境,如pH、温度、渗透压、溶氧等参数会影响到单抗糖基化表现,本文就文献中对渗透压、培养时间和溶氧等培养控

单抗糖基化调控之参数篇(二)

  关键质量参数是单抗仿制药研发的标杆,包括糖基化修饰、聚体、电荷异质性等,其中如糖基化修饰对单抗的生物活性、免疫原性、药物代谢动力学、构象、稳定性及溶解度具有重要的影响。细胞培养过程中细胞所处环境,如pH、温度、渗透压、溶氧等参数会影响到单抗糖基化表现,本文从pH着手就文献中不同pH设置及调节pH

单抗糖基化调控之参数篇(下)

   关键质量参数是单抗仿制药研发的标杆,包括糖基化修饰、聚体、电荷异质性等,其中如糖基化修饰对单抗的生物活性、免疫原性、药物代谢动力学、构象、稳定性及溶解度具有重要的影响。细胞培养过程中细胞所处环境,如pH、温度、渗透压、溶氧等参数会影响到单抗糖基化表现,本文从pH着手就文献中不同pH设置及调节p

单抗糖基化调控之控制参数篇(上)

   关键质量参数是单抗仿制药研发的标杆,包括糖基化修饰、聚体、电荷异质性等,其中如糖基化修饰对单抗的生物活性、免疫原性、药物代谢动力学、构象、稳定性及溶解度具有重要的影响。细胞培养过程中细胞所处环境,如pH、温度、渗透压、溶氧等参数会影响到单抗糖基化表现,本文就文献中对渗透压、培养时间和溶氧等培养

为何要关注抗体药物的糖基化修饰?

   在众多的蛋白质翻译后修饰中,糖基化修饰是最重要和最复杂的修饰之一,也是评价抗体的关键质量属性之一。单抗药物功能的实现与其糖基化修饰密切相关,糖基化修饰会影响蛋白的性能,如构象、稳定性、溶解度、药物代谢动力学、活性及免疫原性。本文中,笔者就糖基化及其对抗体药物的稳定性/半衰期、安全性及生物活性进

研究抗体药物的糖基化修饰为何重要?

  在众多的蛋白质翻译后修饰中,糖基化修饰是最重要和最复杂的修饰之一,也是评价抗体的关键质量属性之一。单抗药物功能的实现与其糖基化修饰密切相关,糖基化修饰会影响蛋白的性能,如构象、稳定性、溶解度、药物代谢动力学、活性及免疫原性。本文中,笔者就糖基化及其对抗体药物的稳定性/半衰期、安全性及生物活性进行

种康院士团队揭示植物糖基化修饰调控开花新机制

  蛋白质糖基化是一种重要的蛋白质翻译后修饰方式,在复杂的生命活动中扮演重要角色。常见的糖基化,如N-糖基化和O-糖基化,蛋白质一般会被修饰上结构复杂的糖链。  然而,生物体中还存在一种常见但比较特殊的糖基化,它仅在蛋白质上修饰一个单糖。在此修饰中,N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)通过O-糖苷键连

OGlcNAc糖基化修饰SNAP29调控自噬小体的成熟

  中科院生物物理所张宏研究组最近在《Nature Cell Biology》杂志上发表题为O-GlcNAc-modification of ?SNAP-29 regulates autophagosome maturation的文章介绍了他们关于O-GlcNAc糖基化修饰SNAP-29并调控自噬小

我国揭示OGlcNAc糖基化介导表观遗传修饰调控发育新机制

  细胞内蛋白质翻译后O-连N-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)修饰,由O-GlcNAC糖基转移酶催化完成,这种糖基化修饰参与调控细胞内多种重要的生物学过程,并在人类疾病与治疗中得到应用。在植物中,这种动态的蛋白糖基化与磷酸化修饰调节植物春化作用介导的开花过程,而O-GlcNAc信号与组蛋白表观遗

揭示糖基化修饰调控阿尔茨海默beta淀粉样蛋白聚集机制

  在阿尔茨海默病(AD)进展中,存在beta淀粉样蛋白(β-Amyloid,Aβ)的积累。Aβ在受影响的脑组织区域形成病理性聚集,被认为与AD的发生、进展和表型密切相关。多种翻译后修饰(如磷酸化、硝基化、糖基化等)对Aβ的病理性聚集及体内生物活性具有重要且不同的调控作用。在AD患者脑内,多种病理相

糖基化调控MDH1酶活性促进胰腺癌生长的分子机理

2022年7月25日,生命科学学院周如鸿教授团队和易文教授团队合作在生物化学及分子生物学高影响力期刊Nature Chemical Biology上发表了题为“O-GlcNAcylation promotes pancreatic tumor growth by regulating malate

N糖基化治疗性抗体—结构、表征方法和治疗潜力的研究

  自20世纪80年代以来,单克隆抗体作为治疗性药物得到快速的发展。与小分子药物相比,单克隆抗体的优势在于具有较高的靶向特异性、毒副作用小和半衰期长的优势。而不足之处包含复杂的生产、纯化过程,以及翻译后修饰(PTM)导致单克隆抗体结构和功能的异质性。  在这些翻译后修饰的情况中,Fc区域的糖基化是导

N糖基化治疗性抗体结构-表征方法和治疗潜力的研究

  自20世纪80年代以来,单克隆抗体作为治疗性药物得到快速的发展。与小分子药物相比,单克隆抗体的优势在于具有较高的靶向特异性、毒副作用小和半衰期长的优势。而不足之处包含复杂的生产、纯化过程,以及翻译后修饰(PTM)导致单克隆抗体结构和功能的异质性。  在这些翻译后修饰的情况中,Fc区域的糖基化是导

从罗氏无N糖基化的PDL1抗体说起

  Fc融合蛋白一般通过Fc的FcRn 介导的循环提高目标蛋白药物的半衰期,改善药代动力学特征,作用机制不依赖于ADCC/CDC活性。一些非癌适应症抗体药物,以及肿瘤免疫疗法抗体药物如PD-1/PD-L1抗体,其作用机制同样不依赖于ADCC、CDC活性。这时Fc的细胞毒性作用ADCC、CDC可能带来

糖基化修饰调控阿尔茨海默病淀粉样蛋白病理性聚集机制

在阿尔茨海默病(AD)进展中,存在beta淀粉样蛋白(β-Amyloid,Aβ)的积累。Aβ在受影响的脑组织区域形成病理性聚集,被认为与AD的发生、进展和表型密切相关。多种翻译后修饰(如磷酸化、硝基化、糖基化等)对Aβ的病理性聚集及体内生物活性具有重要且不同的调控作用。在AD患者脑内,多种病理相关蛋

研究人员揭示O糖基化修饰调控生物钟周期的分子机制

  生物钟是植物细胞中感知并预测光照和温度等环境因子昼夜周期性变化的精细时间机制,它通过协调代谢与能量状态以适应环境因子的昼夜动态变化,从而为植物的生长发育提供适应性优势。生物钟周期紊乱会严重影响植物多种生理和发育关键过程,如开花时间和胁迫应答等。生物钟核心因子的翻译后修饰如磷酸化和泛素化等,可以精

科学家揭示O糖基化修饰调控生物钟周期的分子机制

  生物钟是植物细胞中感知并预测光照和温度等环境因子昼夜周期性变化的精细时间机制,它通过协调代谢与能量状态以适应环境因子的昼夜动态变化,从而为植物的生长发育提供适应性优势。生物钟周期紊乱会严重影响植物多种生理和发育关键过程,如开花时间和胁迫应答等。生物钟核心因子的翻译后修饰如磷酸化和泛素化等,可以精

糖基化修饰调控阿尔茨海默病beta淀粉样蛋白病理性聚集

  在阿尔茨海默病(AD)进展中,存在beta淀粉样蛋白(β-Amyloid,Aβ)的积累。Aβ在受影响的脑组织区域形成病理性聚集,被认为与AD的发生、进展和表型密切相关。多种翻译后修饰(如磷酸化、硝基化、糖基化等)对Aβ的病理性聚集及体内生物活性具有重要且不同的调控作用。在AD患者脑内,多种病理相

种子发芽室主要的几个调控参数是什么?

    种子发芽室主要是为种子发芽试验而准备的大型实验设备,因此其工作的过程都是围绕种子发芽试验而展开的,而我们知道,种子只有在合适的温度、湿度和光照条件下,才能够正常健康的发芽,因此种子发芽室主要的几个调控参数就是温度、湿度和光照度。    1.种子发芽的重要参数之一就是温度,因此温度是种子发芽室

糖基化与免疫

   蛋白糖基化是真核生物常见的蛋白质翻译后修饰过程,合成后的或正在合成的蛋白质在糖基转移酶的作用下,将活化的单糖加到肽链上。根据糖与肽链中氨基酸的连接方式不同,可将糖基化修饰分为三种形式:N-糖苷(N-glycan)、O-糖苷(O-gly-can)、糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphat

什么是糖基化?

糖基化是在酶的控制下,蛋白质或脂质附加上糖类的过程,发生于内质网。在糖基转移酶作用下将糖转移至蛋白质,和蛋白质上的氨基酸残基形成糖苷键。蛋白质经过糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是对蛋白的重要的修饰作用,有调节蛋白质功能作用。

蛋白质糖基化的检测实验——化学脱糖基化

实验材料蛋白样品试剂、试剂盒TFMS苯甲醚仪器、耗材玻璃器皿实验步骤1. 在冰上预冷干净、干燥的玻璃器皿。用带有 Teflon-丝帽的玻璃试管混合试剂。2. 打开或混合试剂前,在冰上预冷所有的溶液。从冰冷的原液中,TFMS:苯甲醚 ( Sigma) 以 2:1 (v/v) 的比例混合。缓慢的向试管内

蛋白质糖基化的检测实验——酶脱糖基化

实验方法原理用酶或化学脱糖基化、通过选择性标记或通过凝集素亲和层析法是检测蛋白糖基化常用方法。实验材料蛋白样品试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液蛋白溶液β-巯基乙醇NP-40 溶液仪器、耗材SDS-PAGE玻璃器皿植物凝集素柱实验步骤一、用 PNGaseF(N-多糖酶)处理1. 以 0.1 mol/L 磷酸钠

微生物所在PD1糖基化修饰与抗体药物作用机制中获进展

  近年来,学界在以PD-1/PD-L1为靶点的单克隆抗体治疗在肿瘤免疫治疗中获进展。PD-1是一个高度糖基化的免疫分子,肿瘤的发生发展常伴随糖基化修饰的异常,且PD-1的N-糖基化位点在人群中存在一定多态性。因此,研究PD-1的糖基化修饰及其对抗体药物作用的影响,对于理解以PD-1为靶点的抗体药物

糖基化的分类介绍

根据 糖苷链类型,哺乳动物的蛋白质糖基化可以分为三类,即以Ser、Thr、Hpy和Hly的羟基的氧原子为连接点,形成-0-糖苷键型。以Asn的酰胺基、N一末端氨基酸的 α - 氨基以及Lys或Arg的ω - 氨基为连接点,形成-N-糖苷键型。由乙醇胺磷酸盐、三个甘露糖苷、葡萄糖胺以及纤维醇磷脂组成的

糖基化多肽合成过程

糖基化糖基化是在酶的控制下,蛋白质或脂质附加上糖类的过程,发生于内质网。在糖基转移酶作用下将糖转移至蛋白质,和蛋白质上的氨基酸残基形成糖苷键。蛋白质经过糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是对蛋白的重要的修饰作用,有调节蛋白质功能作用。过程N-连接的糖链合成起始于内质网,完成于高尔基体。在内质网形成的糖蛋

糖基化修饰过程

一、 糖基化修饰蛋白质的糖基化是一种最常见的蛋白翻译后修饰,是在糖基转移酶作用下将糖类转移至蛋白质和蛋白质上特殊的氨基酸残基形成糖苷键的过程。研究表明70%人类蛋白包含一个或多个糖链1%的人类基因组参与了糖链的合成和修饰。二、糖基化修饰功能在参与糖基化形成的过程中,糖基转移酶和糖苷酶扮演了重要的角色

糖基化位点检测

  经常听到糖基化修饰,今天带大家一探究竟。什么是糖基化修饰呢?糖基化是在糖基转移酶的控制下,蛋白质或脂质附加上糖类的过程,发生于内质网和高尔基体。糖基化修饰是一类非常重要的翻译后修饰,大部分膜蛋白和分泌蛋白均为糖蛋白,糖基化修饰不仅影响蛋白质的空间构象、活性、运输和定位,同时在信号转导、分子识别,

糖基化的过程介绍

N-连接的糖链合成起始于内质网,完成于高尔基体。在内质网形成的糖蛋白具有相似的 糖链,由Cis面进入高尔基体后,在各膜囊之间的转运过程中,发生了一系列有序的加工和修饰,原来糖链中的大部分甘露糖被切除,但又被多种 糖基转移酶依次加上了不同类型的糖分子,形成了结构各异的寡糖链。糖链的空间结构决定了它可以

简述糖基化的作用

  糖基化对膜蛋白功能影响常常是很重要的,对特异的生物学功能起介导作用:  1、对细胞具有保护、稳定、组织及屏障等多方面作用;  2、可作为外源性受体的特异性配体,某些糖链可作为各种病毒、细菌及寄生物的特异受体;  3、糖链也可作为内源性受体的特异性配体,参与介导清除、周转及胞内穿行作用;  4、糖