重组病毒噬斑筛选实验

实验材料转染细胞溶解产物BS-C-1/HuTK-143B/BHK-21/CEF 贴壁生长汇片的细胞试剂、试剂盒完全 2 × 噬斑培养基-5完全MEM-2.5培养基筛选试剂LMP 琼脂糖溶液5-溴脱氧尿苷溶液中性红溶液X-gal溶液X-gluc溶液干冰/乙醇仪器、耗材6孔 35 mm 组织培养板杯状超声仪45℃水浴锅无菌巴斯德吸管(带棉花滤芯)实验步骤实验试剂准备详见「其他」。1. 胰酶消化单层培养的细胞,用适当的完全培养基悬浮细胞。1.1 对 XGPRT 筛选、噬斑选择或颜色筛选,用 BS-C-1 细胞。1.2 对 TK 筛选,用 HuTK-143B 细胞。1.3 对于 MVA,用 BHK-21 或 CEF 细胞。2. 用血球计数器对细胞计数(附录 3F)。3. 按 5 ×105 细胞/孔将细胞加到 6 孔培养板中(最终 2 ml/孔),培养生长至汇片(所需时间少于 24 h)。4. 按以下方法制备细胞。4.1 对于 ......阅读全文

重组病毒噬斑筛选实验

            实验材料 转染细胞溶解产物 BS-C-1/HuTK-143B/BHK-21/CEF 贴壁生长汇片的细胞 试剂、试剂盒

重组病毒噬斑筛选实验

实验材料 转染细胞溶解产物BS-C-1/HuTK-143B/BHK-21/CEF 贴壁生长汇片的细胞试剂、试剂盒 完全 2 × 噬斑培养基-5完全MEM-2.5培养基筛选试剂LMP 琼脂糖溶液5-溴脱氧尿苷溶液中性红溶液X-gal溶液X-gluc溶液干冰/乙醇仪器、耗材 6孔 35 mm 组织培养板

重组病毒噬斑筛选实验

实验材料转染细胞溶解产物BS-C-1/HuTK-143B/BHK-21/CEF 贴壁生长汇片的细胞试剂、试剂盒完全 2 × 噬斑培养基-5完全MEM-2.5培养基筛选试剂LMP 琼脂糖溶液5-溴脱氧尿苷溶液中性红溶液X-gal溶液X-gluc溶液干冰/乙醇仪器、耗材6孔 35 mm 组织培养板杯状超

重组系统腺相关病毒产品说明

一.Cre-loxP重组系统作用原理Cre重组酶和loxP位点Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码,是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能够特异性识别loxP位点。LoxP(l

重组杆状病毒的纯化实验

实验材料 杆状病毒试剂、试剂盒 琼脂牛血清仪器、耗材 培养瓶冻存管实验步骤 1.  制备病毒上清的系列稀释液,该病毒上清获得自在无血清完全培养液中转染 pAC360β-gal DNA的细胞。在含150 μg/ml X-gal 的琼脂糖顶层覆盖物下病毒形成蚀斑。 2.  当蚀斑形成后,用灭菌巴斯德吸管

重组病毒的蛋白质分析实验

实验材料 Sf细胞试剂、试剂盒 胎牛血清PBSSDS蛋白酶抑制剂裂解缓冲液仪器、耗材 培养瓶培养箱离心机转子水浴锅实验步骤 1.  接种2.5×108 Sf9细胞于含5 ml 完全培养液/10%胎牛血清的25 cm2 培养瓶中,27℃温育≥ 2 h。从含无血清完全培养液和重组蚀斑的1 ml

基因重组疱疹病毒专杀癌细胞

  意大利博洛尼亚大学研究人员日前通过生物基因技术,重组出一种专门杀死恶性肿瘤细胞而不伤害健康细胞的疱疹病毒。动物实验证实,用这种病毒治癌有一定效果。   据意大利《共和国报》报道,这种疱疹病毒在经过部分基因重组后,可“辨认”恶性肿瘤细胞内一种名为HER-2的致癌基因,直接定位并杀死肿瘤细胞,避免

什么叫重组腺病毒质粒

就是序列数据经过拼接后得到了完整的质粒全序列

裸眼筛选重组杆状病毒实验

实验材料 杆状病毒试剂、试剂盒 琼脂糖仪器、耗材 解剖显微镜倒置显微镜实验步骤 解剖显微镜下筛选 1.  倒转蚀斑平皿,使其处于显微镜的黑色背景下,以锐角向平皿照射一束亮光。2.  检查野生型病毒感染的细胞中含有包涵体的蚀斑,这种蚀斑看上去折光性强,带有轻微的黄色。3.  检查β-gal 重组病毒感

重组水泡型口炎病毒疫苗的简介

  通过反向遗传操作,将 EBOV GP蛋白替换VSV的G蛋白获得的重组VSV,免疫1次, 即可保护小鼠、豚鼠和非人灵长类免遭病毒的攻击。在非人灵长类感染病毒后,此疫苗也可保护 机体,说明其有暴露后预防治疗的可能性。

裸眼筛选重组杆状病毒实验

杆状病毒是一类在自然界中专一性感染节肢动物的DNA病毒,病毒粒子呈杆状,基因组为双链环状DNA分子,DNA以超螺旋形式压缩包装在杆状衣壳内,大小在90~180 Kb 之间。目前杆状病毒作为高效、安全的无公害生物虫剂广泛应用于害虫防治。实验材料杆状病毒试剂、试剂盒琼脂糖仪器、耗材解剖显微镜倒置显微镜实

重组腺相关病毒载体的生产实验

瞬时转染 293 细胞制备无腺病毒重组腺相关病毒载体实验材料293组织培养细胞系pSub201质粒pXX2质粒pXX6质粒试剂、试剂盒完全DMEM 10%FBS培养基完全IMDM 10%FBS培养基CaCl2纯DMEM 2%FBS 培养基干冰 乙醇浴硫酸铵饱和硫酸铵乙醇PBS仪器、耗材组织培养板—次

重组狂犬病病毒疫苗的介绍

  将表达 GP 的重组 RABV 免疫 1次可保护部分小鼠, 免疫2次可保护100%的非人灵长类。尽管重组 RABV疫苗效果比重组 VSV 低,但将表达GP 的重组 RABV 灭活后,可部分保护非人灵长类,提示可考虑 将此类疫苗以灭活形式应用,这样对人类更为安全。

关于重组副粘病毒疫苗的基本介绍

  除了以弹状病毒(例如 VSV 和 RABV)为载体外,以重组副粘病毒为载体 也被用于 EDV 疫苗研发。单独表达 EBOV GP 蛋白 或同时表达 GP 和 NP 蛋白的重组人副流感病毒 3 型(human parainfluenza virus 3, HPIV3)免疫 1 次, 可对豚鼠提供保

重组病毒的蛋白质分析实验

实验材料Sf细胞试剂、试剂盒胎牛血清PBSSDS蛋白酶抑制剂裂解缓冲液仪器、耗材培养瓶培养箱离心机转子水浴锅实验步骤1.  接种2.5x108 Sf9细胞于含5 ml 完全培养液/10%胎牛血清的25 cm2 培养瓶中,27℃温育≥2 h。从含无血清完全培养液和重组蚀斑的1 ml 病毒贮液中取0.5

重组埃博拉病毒病疫苗的简介

  重组埃博拉病毒病疫苗是用于预防埃博拉病毒的注射用疫苗。康希诺生物股份公司自主研发的一种5型腺病毒载体埃博拉病毒病疫苗,该疫苗通过利用重组复制缺陷人5型腺病毒载体引发免疫应答以预防埃博拉病毒。康希诺生物完成了该疫苗在塞拉利昂的II期临床研究,开创了我国自主研发创新疫苗走进国际的新篇章。

诺如病毒重组蛋白解决方案

冬季以来,多地区出现轻度呕吐、腹泻症状,经检测,与诺如病毒关系匪浅。那么诺如病毒是什么呢?它的传播方式和症状如何?一起来看看吧 一、诺如病毒 诺如病毒,又称诺瓦克病毒(Norwalk Viruses, NV  )是人类杯状病毒科(Human Calicivirus, HuCV)中诺如病毒(Norov

重组新冠疫苗(腺病毒载体)的介绍

  重组新冠疫苗(腺病毒载体)是一种表达SARS-CoV-2刺突糖蛋白(S蛋白)的复制缺陷Ad5载体疫苗。疫苗使用一种减毒的普通感冒病毒(腺病毒,易感染人类细胞,但不致病)将编码SARS-CoV-2刺突(S)蛋白的遗传物质传递给细胞。随后这些细胞会产生S蛋白,并到达淋巴结,免疫系统产生抗体,识别S蛋

关于重组-5-型腺病毒疫苗的介绍

  重组Ad5疫苗是最早被研究的重组活载体疫苗,也可能是 EDV 疫苗平台中最为领先的疫苗, 被证明在非人灵长类中可提供有效保护。早期研究 中,对非人灵长类首次免疫可表达 EBOV GP的DNA 疫苗,再加强免疫可表达 GP 的人 Ad5疫苗, 可保护机体免遭致死性 EBOV 的攻击,首次证明了通过

关于重组新型冠状病毒疫苗(5型腺病毒载体)的简介

  重组新型冠状病毒疫苗(5型腺病毒载体)是由康希诺生物和中国人民解放军军事科学院军事医学研究院生物工程研究所陈薇院士团队合作研发的新型冠状病毒疫苗。  2021年2月25日,疫苗获得国家药品监督管理局批准在国内附条件上市 [1] [7]。5月13日起,上海市各区已陆续开始供应重组新型冠状病毒疫苗(

重组腺病毒构建,扩增及纯化基本技术操作

重组DNA技术可以用于:(1)据需要选择目的基因(DNA片段)在体外与基因运载体重组,转移至另一细胞或生物体内,以达到改良和创造新的物种和治疗人类疾病的目的;(2)是现代分子生物技术发展中最重要的成就之一,即是基因工程(Gene Engineering)的核心技术。实验方法原理Adeasy系统利用了

重组埃博拉病毒病疫苗的优势介绍

  1.在冷链条件受限的地区仍拥有良好的稳定性  Ad5-EBOV疫苗为冻干粉剂型,可长期储存于 2-8℃,37℃下可稳定储存3周,更适合冷链条件困难的地区使用,而rVSV-ZEBOV疫苗需要储存于-60℃以下。  2.复制缺陷型病毒载体更安全  对于免疫低下者、儿童、孕妇等,复制缺陷型疫苗较复制型

重组腺病毒构建,扩增及纯化基本技术操作

PCR体外扩增法             实验方法原理 Adeasy系统利用了腺病毒具有的高感染能力,可高度浓缩等优点,并破坏了腺病毒基因组中的早期基因E1,使之成为较为安全、高效的

重组巨细胞病毒(cytomegalovirus,-CMV)疫苗的简介

  重组巨细胞病毒(cytomegalovirus, CMV)疫苗 表达EBOV NP蛋白T细胞表位的重组 CMV 疫苗免疫小鼠后可保护小鼠免受病毒攻击。但灵长类 动物体内存在CMV,且CMV有高度的宿主特异性。因 此,进一步研究时,须考虑其有效性和安全性问题。

重组腺病毒构建,扩增及纯化基本技术操作

重组腺病毒构建,扩增及纯化基本技术操作(细菌内同源重组AdEasy System)一 目的基因的克隆(以pshuttle-CMV质粒为例)1.      选择适当酶切位点,进行酶切连接,将目的片段插入pshuttl-CMV质粒多克隆位点。2.      重组质粒鉴定: 酶切鉴定或测序。3.     

病毒载体与埃博拉病毒保护性抗原GP蛋白重组的疫苗

  如重组水泡口腔炎病毒(VSV)疫苗,其表面有一个糖蛋白,作用是识别宿主细胞。这个蛋白就相当于一把钥匙,打开人体细胞那把锁之后,就可长驱直入了。研究者对这种病毒进行了转基因,把它原有的糖蛋白用埃博拉病毒表面的糖蛋白替换。改造之后的VSV疫苗既能让机体产生针对埃博拉病毒的抗体,同时又没有致病性。  

多种新冠病毒重组蛋白表达成功,将加快病毒检测进度

  2019-nCoV新型冠状病毒疫情肆虐,医护人员冲在的抗病救人的第一线,人民群众闭门在家就是对“社会最大的贡献”,但是还有一批人在后方默默的奉献着。这批人就是科研工作者,他们正在夜以继日的研发新型冠状病毒的检测试剂盒、治疗药品及疫苗。  义翘神州作为科研工作者的坚强后盾,在这次疫情面前,勇往直前

首个国产重组新冠病毒蛋白疫苗获批上市

  3月1日,国家药品监督管理局附条件批准安徽智飞龙科马生物制药有限公司的重组新型冠状病毒蛋白疫苗(CHO细胞)上市注册申请。该疫苗是首个获批的国产重组新冠病毒蛋白疫苗,适用于预防新型冠状病毒感染所致的疾病(COVID-19)。  首个国产重组新冠病毒蛋白疫苗获批上市!重组新型冠状病毒蛋白疫苗(CH

基本方案-运用-AdEasy-方法产生重组腺病毒载体

实验材料感兴趣的基因试剂、试剂盒具有卡那霉素抗性的 LB 培养基限制性内切核酸酶穿梭载体 DNA乙酸铵苯酚 氯仿 异戊醇乙醇电促感受态 BJ5183 细胞感受态 DH10B 细胞HBSS 或灭菌的 PBS仪器、耗材铺有卡那霉素抗性的 LB 固体培养基皿琼脂糖凝胶脂质转染 AMINE 试剂Opti-M

首个国产重组新冠病毒蛋白疫苗获批上市

  3月1日,国家药品监督管理局附条件批准安徽智飞龙科马生物制药有限公司的重组新型冠状病毒蛋白疫苗(CHO细胞)上市注册申请。该疫苗是首个获批的国产重组新冠病毒蛋白疫苗,适用于预防新型冠状病毒感染所致的疾病(COVID-19)。  首个国产重组新冠病毒蛋白疫苗获批上市!重组新型冠状病毒蛋白疫苗(CH