基因活性同位素分析实验——人生长激素的放射免疫分析法
实验材料hGH表达质粒试剂、试剂盒洗涤液亲和素包被珠仪器、耗材试管γ计数仪实验步骤1. 取转染了hGH表达质粒的哺乳动物细胞的培养液100~500 μl。2. 加100 μl 培养液或标准品至12 mm×75 mm 圆底试管中。加入100 μl 125I-标记的抗体溶液，混合。加入1颗亲和素包被珠，盖上试管盖或用Parafilm膜封口，室温下在一水平旋转器上以约170 r/min 摇动下温育90 min。3. 加2 ml 冼涤液洗磁珠两次。完全吸干洗涤液。 图一、人生长激素表达载体 4. 将试管置于γ计数仪上计数1 min。 5. 用试剂盒中的hGH标准品测得的数据绘制标准曲线。用这个标准曲线来计算未知样品的hGH含量。......阅读全文
脂肪酶的测定实验——荧光分析法
实验方法原理此实验同样适用于胰凝乳蛋白、胆碱酯酶和酰基转移酶。可以用作底物的并非只是联丁酰荧光素，乙酰胆碱酯酶荧光素亦可。联丁酰荧光素 → 荧光素（无荧光性） （有荧光性）实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HCl联丁酰荧光素仪器、耗材荧光光度计实验步骤0.1 mol/L Tris-HCl，pH 8
化学发光技术
放射免疫分析法有很高的灵敏度，但存在着放射性防护和同位素污染等问题。近年来，许多非放射性同位素标记的免疫分析方法相继出现。其中，在化学发光反应及抗原-抗体特异性识别基础上建立起来的一种新的非放射免疫分析技术--化学发光免疫分析法，由于这种方法具有灵敏度高，特异性强，精密度好，线性范围宽，仪器设备简单
放射免疫分析试剂
1、标准品 标准品是放射免疫分析法定量的依据，由于以标准品的量用来表示被涮物质的量，故标准品与被测物质应当化学结构一致并具有相同免疫活性。标准品作为定量的基准。应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外，还应具备稳定性，即在合理的贮存条件下保持原来的特性。 按实验要求，将标准品用缓冲
IDMS法测定血清中的生长激素
图1. 生长激素的IDMS测定法示意图：将“指纹碎片”T6以胰蛋白酶进行蛋白质水解，并对分析溶质予以富集后，借助于RP-LC-MS/MS进行定量测定。 在医学上，为了进行早期诊断以及对疾病进行医疗控制，经常需要对血清中的所谓标记蛋白质进行量化。这些蛋白质分子尺寸微小，结构复杂，血清
实验室分析方法气相色谱顶空分析法的静态顶空分析法
静态顶空分析法是顶空分析法发展中所出现的最早形态，其原理的示意图见图1。它是在一定的温度条件下，样品中挥发性物质在气液（或气固）两相间分配，达到平衡时，取液（固）上蒸气相进行分析，被测组分的浓度遵循c2＝co（K＋β）。图1静态顶空示意静态顶空分析法在仪器模式上可以分为三类：顶空气体直接进样模式、平
实验室分析方法气相色谱顶空分析法的动态顶空分析法
动态顶空分析法是一种连续的顶空技术，该方法是利用气体把样品中挥发性物质吹扫出来，通过固体吸附柱或冷冻捕集等方法将吹扫出来的组分进行分离富集，然后用反吹法把吸附的化合物吹脱出来直接进入色谱仪进行分析。这种分析方法不仅适用于复杂基质中挥发性较高的组分，对较难挥发及浓度较低的组分也同样有效。动态顶空分析可
实验室分析方法同位素质谱法
质谱技术成为分析科学的重要组成部分是从同位素的发现开始的，并伴随同位素分析、研究和应用而发展。英国著名物理学家汤姆逊在1913年用简陋的抛物线装置发现惰性气体氖的两个稳定性同位素，标志着质谱技术的开始，而汤姆逊的抛物线装置被后人公认为是现代质谱仪的雏形。 汤姆逊的学生和助手阿斯顿（Aston），不但
实验室分析方法热分析法分类
最常用的热分析法有：差(示)热分析(DTA)、热重量法(TG)、导数热重量法(DTG)、差示扫描量热法(DSC)、热机械分析(TMA)和动态热机械分析(DMA)。此外还有：逸气检测(EGD)、逸气分析(EGA)、 扭辫热分析(TBA)、射气热分析、热微粒分析、热膨胀法、热发声法、热光学法、热电学法、
实验分析技术光谱分析法仪器概述
光谱分析法基于六种现象，即吸收、荧光、磷光，散射，发射和化学发光，其测量仪器的组成虽略有不同，但大部分的基本元件十分相似，典型光谱分析仪包合5个组件:①松定的辐射源:②样品池；③波长选择器或频率调制器；④辐射检测器；⑤信号处理显示成录仪。5个组件的3种不同搭配方式构成了6种光谱测量的分析仪器(见图1
实验室分析方法－差热分析法概述
差热分析法是以某种在一定实验温度下不发生任何化学反应和物理变化的稳定物质（参比物）与等量的未知物在相同环境中等速变温的情况下相比较，未知物的任何化学和物理上的变化，与和它处于同一环境中的标准物的温度相比较，都要出现暂时的增高或降低。降低表现为吸热反应，增高表现为放热反应。
人羟脯氨酸(Hyp)酶联免疫分析（ELISA）分析法
人羟脯氨酸(Hyp)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，尿及相关液体样本中羟脯氨酸(Hyp)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人羟脯氨酸(Hyp)水平。用纯化的人羟脯氨酸(Hyp)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包
DNA酶I足迹分析法实验2
实验材料含有DNA结合位点的质粒DNA试剂、试剂盒适当的限制性内切核酸酶100%乙醇及冰冷的70%乙醇TE缓冲液[α-32P] dNTP (3000〜6000 Ci mmol)水溶液1O× Klenow片段缓冲液E. coli DNA聚合酶1的Klenow片段5 mmol L 4dNTP 混合液脱氧
化学发光免疫分析
化学发光免疫分析放射免疫分析法有很高的灵敏度，但存在着放射性防护和同位素污染等问题。近年来，许多非放射性同位素标记的免疫分析方法相继出现。其中，在化学发光反应及抗原 -抗体特异性识别基础上建立起来的一种新的非放射免疫分析技术--化学发光免疫分析法，由于这种方法具有灵敏度高，特异性强，精密度好
Nature发布重大成果：首张人基因活性图谱
报道：由大型国际性协会研究人员组成的一个研究组今日公布了人体内主要细胞和组织中基因作用方式的第一个全面，详细的图谱。这一发现描绘了调控基因活性的复杂网络，也提供了在疾病中扮演重要作用的基因的新信息。 “我们第一次能够确定基因组中哪些区域在发生疾病的时候会被激活，哪些区域在正常情况下被激活了
报告基因分类及优缺点
报告基因（reporter gene）是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，其表达产物非常容易被鉴定。把它的编码序列和基因调节序列相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。作为报告基因必须具备的条件：（1）全序列已测定（2）表达产物在手提细胞中不存在，即无背景，
实验室分析方法差热分析法的详细内容
当给予被测物和参比物同等热量时，因二者对热的性质不同，其升温情况必然不同，通过测定二者的温度差达到分析目的。以参比物与样品间温度差为纵坐标，以温度为横坐标所得的曲线，称为DTA曲线。在差热分析中，为反映这种微小的温差变化，用的是温差热电偶。它是由两种不同的金属丝制成。通常用镍铬合金或铂铑合金的适当一
放射免疫分析的常用方法
（1）液相法：将待检标本（例如含胰岛素抗原）与定时的同位素标记的胰岛素（抗原）和定时的抗胰岛素抗体混合，经一定作用时间后，分离收集抗原抗体复合物及游离的抗原，测定这两部分的放射活性，计算结合率。医学/教育网搜集整理在反应系统中，待检标本的胰岛素抗原与同位素标记的胰岛素竞争夺战 性与胰岛素抗体
放射免疫分析的标记方法
125I 标记化合物的制备方法可分为直接标记和间接标记两类方法。(1)直接标记法最常用于肽类、蛋白质和酶的碘化标记,其原理是采用化学或酶促氧化反应直接将125I结合于被标记物分子中酪氨酸残基或组胺残基上。其特点是标记方法操作简便,容易将较多的125I结合到被标记分子上,得到比放射性较高的标记物。但该
放射免疫分析的原理（三）
RIA法的影响因素 pH和离子强度；反应温度，温度一般为37℃，也有45℃，室温，4℃ 冰箱；反应时间，操作中的注意事项：戴手套、防护镜等，将试剂盒从冰箱中取出，室温下放置30 min方可使用。 （1）编号：第一排是标准管：根据标准品浓度由低到高A，B，C，D，E，F，G……；第二排是被测样
单胺氧化酶活性测定_同位素法
实验材料大鼠试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液蒸馏水盐酸苯乙胺甲苯5-羟色胺双草酸盐β-乙基-苯乙胺盐酸盐苯-醋酸乙酯闪烁液仪器、耗材制冰机水浴锅试管试管架计数瓶离心机离心管移液枪漩涡振荡仪单胺氧化酶(monoamine oxidase )为催化单胺氧化脱氨反应的酶。缩写MAO，也有称为含黄素胺氧化酶的。EC
放射免疫测定技术的原理
放射免疫技术是基于竞争性结合反应原理的放射免疫分析。它是以放射核素标记抗原(*Ag)与反应系统中未标记的抗原(Ag)竞争特异性抗体(Ab)的基本原理来测定待检样品中抗原量的一种分析法。用反应式表示为: 式中,*Ag 为同位素标记的抗原,与未标记的抗原 Ag 有相同的免疫活性,两者以竞争性的方式与特
放射免疫分析的正常值及临床意义
正常值 检测范围： 常规免疫：mg~μg(10-3~10-6 g)； 荧光免疫酶免疫： μg~ng(10-6 ~10-9 g)； 放射免疫，发光免疫：ng~pg(10-9 ~10-12 g)； PCRpg~fg(10-12 ~10-15 g)。 临床意义 激素类检测： 1、在垂体
关于更昔洛韦的实验分析法介绍
方法名称： 更昔洛韦原料药—更昔洛韦的测定—非水滴定法 应用范围： 本方法采用滴定法测定更昔洛韦原料药中更昔洛韦的含量。 本方法适用于更昔洛韦原料药。 方法原理： 供试品加冰醋酸溶解后，加结晶紫指示液，用高氯酸滴定液滴定至溶液显绿色，并将滴定的结果用空白试验校正，根据滴定液使用量，计算更昔
滴定分析法的实验配制方法和浓度选择
配制方法 1、分类 （1）直接配制：准确称量一定量的用基准物质，溶解于适量溶剂后定量转入容量瓶中，定容，然后根据称取基准物质的质量和容量瓶的体积即可算出该标准溶液的准确浓度。 （2）间接配制：先配制成近似浓度，然后再用基准物或标准溶液标定。 2、标定 标定法配制标准溶液，是对已经配制成
元素分析法测定样品中的－O－含量实验
实验方法原理 元素分析仪的 O 模式工作原理是：在装有石墨的高温裂解柱中注入氦气，使样品在惰性气体的环境下进行高温裂解，将样品中所含氧完全转换生成 CO，而裂解生成的其他产物在载气氦气的传送下，如酸性气体 H2S、HCN、HCl 等流经装有 NaOH 填充层的干燥管被吸收，中性裂解气体如
元素分析法测定样品中的－O－含量实验
实验方法原理元素分析仪的 O 模式工作原理是：在装有石墨的高温裂解柱中注入氦气，使样品在惰性气体的环境下进行高温裂解，将样品中所含氧完全转换生成 CO，而裂解生成的其他产物在载气氦气的传送下，如酸性气体 H2S、HCN、HCl 等流经装有 NaOH 填充层的干燥管被吸收，中性裂解气体如 N2 和 C
极谱分析法极谱分析法原理及于伏安分析法的比较
极谱分析法(polarography)与伏安分析法( voltammetry)是通过测量电解过程中所得到的电流-电压(或电位-时间)曲线来确定电解液中含被测组分的浓度,从而实现分析测定的电化学分析法,它他们与电解、库仑分析法的区别在于电解池中的两个电极的性质,其中一个电极的电位完全随外加电压的变化而
生长激素测定的的异常结果分析
增高： 1.肢端肥大症、巨人症、严重营养不良。 2.应用某些药物：如胰岛索，精氨酸等。 减低：垂体性侏儒，垂体前叶功能减退。
人发同位素源激发X射线能谱分析技术的建立
本文建立了人发同位素源激发 X 射线能谱分析系统,标定了谱仪系统的相对效率,特别是作了标样与发样以及发样不同厚度的相对效率校正。对数百名儿童头发作了微量元素微测,得到了较好的结果。
基因测定的方法四分体分析法
四分体分析法由于子囊菌减数分裂所形成的四分体包被在一个子囊里，所以判断两个基因是否连锁，只需计算出各种类型的四分体数（即子囊数）。如果其中一个基因所属的连锁群已经知道，便很容易测定另一基因是否属于同一连锁群。四分体有三种，即亲代二型(PD)、非亲代二型(NPD)和四型(T)。如果有关的两个基因是连锁