基因活性同位素分析实验——人生长激素的放射免疫分析法

实验材料hGH表达质粒试剂、试剂盒洗涤液亲和素包被珠仪器、耗材试管γ计数仪实验步骤1. 取转染了hGH表达质粒的哺乳动物细胞的培养液100~500 μl。2. 加100 μl 培养液或标准品至12 mm×75 mm 圆底试管中。加入100 μl 125I-标记的抗体溶液,混合。加入1颗亲和素包被珠,盖上试管盖或用Parafilm膜封口,室温下在一水平旋转器上以约170 r/min 摇动下温育90 min。3. 加2 ml 冼涤液洗磁珠两次。完全吸干洗涤液。 图一、人生长激素表达载体 4. 将试管置于γ计数仪上计数1 min。 5. 用试剂盒中的hGH标准品测得的数据绘制标准曲线。用这个标准曲线来计算未知样品的hGH含量。......阅读全文

使用-TAQMAN-分析法的高通量基因分型实验

实验材料 基因组DNA试剂、试剂盒 PCR 混合液仪器、耗材 96孔透明板和盖子水平离心机ABI PRISM 7700 测序系统热循环仪统计软件包实验步骤 1.96孔透明板B到H行每孔加2ul (30ng)基因组DNA,保留A行作对照—其中4孔只加2ul缓冲液作为「无 DNA」对照,余下8孔每孔加2

使用-TAQMAN-分析法的高通量基因分型实验

实验材料基因组DNA试剂、试剂盒PCR 混合液仪器、耗材96孔透明板和盖子水平离心机ABI PRISM 7700 测序系统热循环仪统计软件包实验步骤1.96孔透明板B到H行每孔加2ul (30ng)基因组DNA,保留A行作对照—其中4孔只加2ul缓冲液作为「无 DNA」对照,余下8孔每孔加24基因组

同位素质谱分析法的特点和应用领域

同位素质谱分析法的特点是测试速度快,结果,样品用量少(微克量级)。能测定元素的同位素比值。广泛用于核科学,地质年代测定,同位素稀释质谱分析,同位素示踪分析。

质谱分析法术语同位素示踪法

同位素示踪法(isotope tracer method)用同位素作为示踪剂来观察和研究生命体,或物体中某一物质行为的方法。

质谱分析法术语同位素丰度比

同位素丰度比(isotope abundance ratio)指某元素的任一同位素丰度与元素中的其他同位素丰度的比值。

NK细胞活性测定:同位素法原理和实验步骤

一、原理 将用同位素3H-TdR标记的靶细胞与淋巴细胞共同培养时,靶细胞可被NK细胞杀伤。同位素便从被杀伤的靶细胞中释放出来,其释放的量与NK细胞活性成正比。通过测定靶细胞3H-TdR的释放率即可反应NK细胞的活性。 二、仪器和材料 液体闪烁仪、多头细胞取集器、二氧化碳培养箱、3H-TdR、RPMI

同位素分析法诠释苯的微生物降解

苯,是存在于自然界中最简单的芳香类化合物,也是一种致癌物质。被苯污染的地下水可能会带来多种风险,所以探明苯的生物降解过程对于风险的评估和控制是非常有意义的。   有氧状态下,微生物可以很快的把苯分解掉。深层地下水中溶解的氧气会由于苯的降解而被消耗殆尽,导致深层地下水的缺氧状态。但在无氧

质谱分析法术语离气体稳定同位素质谱法

气体稳定同位素质谱法( gas stable isotope ratio mass spectrometry, GSIRMS)该法因测量气体稳定同位素比值而得名,如测量碳、氧、氮、硫等元素的稳定性同位素,测量结果的品位通常以δ表示,在同位素地球化学、同位素地质学、石油勘探与开采、同位素宇宙学、海洋学

酶活性分析法检定蛋白质的方法步骤

表现出來的酶GUS可以水解其基质衍生物pNPG,所产生的黄色生成物p-nitrophenol,可供活性测定 (Jefferson et al, 1986);仪器用具:ELISA光度计 (Dynatech);微量滴定盘 (microtiter plate, Nunc F96 Maxisorb 4424

放射免疫分析的实验方法及测定

(一)抗原抗体反应将未标记抗原(标准品和待测样品)、标记抗原和特异性抗体加入反应试管中,在一定条件(温度、时间及介质pH)下进行竞争抑制反应。先加待测样品(或标准品)和抗血清,使非标记抗原与抗体达到结合平衡,然后再加入标记抗原竞争与抗体结合。(二)分离结合与游离标记物RIA反应平衡后,标记抗原与试剂

放射免疫分析的实验方法及测定

  (一)抗原抗体反应  将未标记抗原(标准品和待测样品)、标记抗原和特异性抗体加入反应试管中,在一定条件(温度、时间及介质pH)下进行竞争抑制反应。  先加待测样品(或标准品)和抗血清,使非标记抗原与抗体达到结合平衡,然后再加入标记抗原竞争与抗体结合。  (二)分离结合与游离标记物  RIA反应平

放射免疫分析法测定重组人白细胞介素2

白细胞介素-2(interleukin rhlL-2,IL-2)主要由活化的T淋巴细胞分泌的一种糖蛋白,是调节机体免疫功能最主要的淋巴因子之一。天然IL-2含有糖基,基因重组IL-2不含糖基,由133个氨基酸组成,相对分子质量为15KD。IL-2在机体应答,免疫调节和抗肿瘤免疫中具有十分重要的作

稳定同位素分析法诠释苯的微生物降解

苯,是存在于自然界中最简单的芳香类化合物,也是一种致癌物质。被苯污染的地下水可能会带来多种风险,所以探明苯的生物降解过程对于风险的评估和控制是非常有意义的。 有氧状态下,微生物可以很快的把苯分解掉。深层地下水中溶解的氧气会由于苯的降解而被消耗殆尽,导致深层地下水的缺氧状态。但在无氧条件下,

基因测定方法系谱分析法

在早期的人类遗传学研究中,基因所属染色体的测定一般都通过系谱分析进行。由于女子有两个X染色体,男子有一个X染色体和一个Y染色体,Y染色体上不存在和X染色体相应的等位基因(也就是说对于 X连锁基因来讲,男子是半合体)。因此男性患者的X连锁致病基因必然来自母亲,以后又必定传给女儿。这种遗传方式称为交叉遗

基因测定方法系谱分析法

非整倍体测交法可以用来测定基因属于哪一个常染色体。用常染色体隐性突变型纯合体(a/a)和野生型二倍体(+/+)杂交,再用子一代杂合体(a/+)和隐性亲本回交,在它们的子代中表型是野生型的和表型是突变型的各占50%(见孟德尔定律)。杂交 a/a × +/+↓回交 a/+  ×  a/a↓回交子代 a/

DNA酶I足迹分析法实验——NA酶I足迹分析法

本分析方法用来检测DNA上特异的蛋白质结合位点。位点上结合的蛋白质可保护 D N A 的 磷 酸 二 酯 键 骨 架 免 于 受 D N A 酶 I 催 化 的 水 解 。 水 解 后 D N A 片 段 在 变 性DNA测序胶上分离,通过放射自显影可使结合位点显示出来。足迹法已进一步发展成为确定D

化学发光免疫分析技术的简介

  上世纪70年代中期Arakawe首先报道CLIA ,发展至今已经成为一种成熟的、先进的超微量活性物质检测技术,应用范围广泛,近10年发展迅猛,是目前发展和推广应用最快的免疫分析方法,也是目前最先进的标记免疫测定技术,灵敏度和精确度比酶免法、荧光法高几个数量级,可以完全替代放射免疫分析、彻底淘汰酶

化学发光免疫分析技术的简介

  上世纪70年代中期Arakawe首先报道CLIA ,发展至今已经成为一种成熟的、先进的超微量活性物质检测技术,应用范围广泛,近10年发展迅猛,是目前发展和推广应用最快的免疫分析方法,也是目前最先进的标记免疫测定技术,灵敏度和精确度比酶免法、荧光法高几个数量级,可以完全替代放射免疫分析、彻底淘汰酶

关于实验中-比色分析法的简介

  比色分析法是利用被测溶液本身的颜色,或加入试剂后呈现的颜色,用眼睛(或目测比色计)观察、比较溶液颜色深度,或用光电比色计进行测量以确定溶液中被测物质浓度的方法。比色法包括目视比色法和光电比色法。  物质的颜色与光的关系  光是一种电磁波,自然是由不同波长(400~700nm)的电磁波按一定比例组

微量分析法的实验目的

应用微量分析的目的是,采用少量的被试验材料、试剂和不大容积的溶液的办法,达到提高实验室工作的速度和降低其费用。微量分析是基于应用特殊的微量分析天秤,其灵敏度的大小为10-6克。其所用之样品重——数量极为几十毫克。

基因测定的方法系谱分析法介绍

在早期的人类遗传学研究中,基因所属染色体的测定一般都通过系谱分析进行。由于女子有两个X染色体,男子有一个X染色体和一个Y染色体,Y染色体上不存在和X染色体相应的等位基因(也就是说对于 X连锁基因来讲,男子是半合体)。因此男性患者的X连锁致病基因必然来自母亲,以后又必定传给女儿。这种遗传方式称为交叉遗

人血栓调节素放射免疫分析ELISA试剂盒介绍

人血栓调节素放射免疫分析ELISA试剂盒从健康人尿中纯化了血栓调节素,免疫家兔产生抗血清,125I-血栓调节素用联结标记法制备,采用平衡法建立RIA数据用三次函数数据程序处理。方法的批内和批间CV分别为5.10%和10.94%,平均回收率为105.22%,可测范围为8.1~560μg/L,ED50为

DNA酶I足迹分析法实验

DNA酶I足迹分析法 用光密度及数值分析法决定蛋白质结合的平衡常数 粗制品的DNA酶足迹分析法             实验方法原理

放射免疫分析的实验方法及测定有什么?

  (一)抗原抗体反应  将未标记抗原(标准品和待测样品)、标记抗原和特异性抗体加入反应试管中,在一定条件(温度、时间及介质pH)下进行竞争抑制反应。  先加待测样品(或标准品)和抗血清,使非标记抗原与抗体达到结合平衡,然后再加入标记抗原竞争与抗体结合。  (二)分离结合与游离标记物  RIA反应平

放射免疫分析的原理

  A的基本原理为:放射性同位素标记的抗原(简称“标记抗原”)和非标记抗原(标准抗原或待测抗原)同时与数量有限的特异性抗体之间发生竞争性结合(抗原-抗体反应)。由于标记抗原与待测抗原的免疫活性完全相同,对特异性抗体具有同样的亲和力,当标记抗原和抗体为数量恒定时,待测抗原和标记抗原的总量大于抗体上的有

放射免疫分析的介绍

  放射免疫技术为一种将放射性同位素测量的高度灵敏性、精确性和抗原抗体反应的特异性相结合的体外测定超微量(10-9~10-15g)物质的新技术。广义来说,凡是应用放射性同位素标记的抗原或抗体,通过免疫反应测定的技术,都可称为放射免疫技术,经典的放射免疫技术是标记抗原与未标抗原竞争有限量的抗体,然后通

基因定位方法介绍系谱分析法

系谱分析法基因定位在早期的人类遗传学研究中,基因所属染色体的测定一般都通过系谱分析进行。由于女子有两个X染色体,男子有一个X染色体和一个Y染色体,Y染色体上不存在和X染色体相应的等位基因(也就是说对于 X连锁基因来讲,男子是半合体)。因此男性患者的X连锁致病基因必然来自母亲,以后又必定传给女儿。这种

DNA酶I足迹分析法实验——粗制品的DNA酶足迹分析法

实验方法原理DNA酶足迹分析常用来寻找粗制品中的蛋白质,因而提供了一种在纯化过程中采用的分析方法。通过改变条件,如在反应体系中加入大量的竞争性DNA,或增加反应中盐的浓度,可抑制非特异性的DNA结合蛋白结合到标记的DNA上。实验材料含有DNA结合位点的质粒DNA试剂、试剂盒适当的限制性内切核酸酶10

实验室分析方法热分析法的优点

1. 可在宽广的温度范围内对样品进行研究;2. 可使用各种温度程序(不同的升降温速率);3. 对样品的物理状态无特殊要求;4. 所需样品量很少(0.1μg- 10mg);5. 仪器灵敏度高(质量变化的精确度达10-5);6. 可与其他技术联用;7. 可获取多种信息。

放射免疫测定的实验特点

放射免疫测定(radioimmunoassay,RIA)是利用放射性核素的测量方法与免疫反应的基本原理相结合的一种放射性核素体外检测法。该法有灵敏度高、特异性强、精确度佳及样品用量少等优点,因而发展迅速。这种测试技术不仅普遍用于测定具有抗原性的蛋白质、酶和多肽激素,而且越来越广泛地用于测定许多本身无