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连接为双标签实验

是对差异显示技术(DD)实验和基因表达系列分析实验中实验方案A和B的补充实验现代神经科学研究技术作者:U.Windhorst & H. Johansson 翻译:赵志奇 陈军试剂、试剂盒溶液与缓冲液LoTEcDNA标签实验步骤实验方案 A1.此实验方案中,两部分补平的 cDNA 标签(源于同一 cDNA 合成反应)结合形成双标签。加入下列物质:2.在 16℃ 下孵育过夜。实验方案 B1.补平标签结合成双标签,需加入下列物质:2.在 16℃ 下孵育过夜。展开......阅读全文

双标记签的PCR扩增

试剂、试剂盒 溶液与缓冲液LoTEcDNA标签实验步骤 实验方案 A 和 B一、连接混合物的 PCR 扩增1.加入 LoTE 使连接混合物的体积增至 20ul。2.按 1% 浓度稀释连接混合物。3.在 50ulPCR 反应中以 Iul 的 1% 稀释后的连接混合物作为模板:4.最后,在 PCR 的反

SCI医学论文写作技巧

  第一版(2010年9月)前言    医学论文设计水平的新颖性和创新性,是决定撰写的医学论文能否被SCI医学杂志编委和主编认同的第一门道;医学论文撰写水平的逻辑性和规范性,则是决定撰写的医学论文能否被SCI医学杂志接受的最终门道。发表SCI期刊医学论文的语言是英语,对于母语是非英语的中国临床医生

人造锌指蛋白的设计和合成实验

在 DNA 结合模体中,(Cys)2(His)2 类型的锌指模体具有大的操控潜力。为新的 DNA 结合蛋白设计,锌指模体提供了有吸引力的框架。特别是为产生新的、具有全新的 DNA 结合特性的,如长 DNA 链识别、DNA 弯折和 AT 富集序列识别——人造锌指蛋白。本实验来源「现代蛋白质工

马丁代尔平磨法和TABER耐磨法的比较与选择

皮革的耐磨性能,是皮革所具有的抵抗磨损的特性。皮革的磨损是造成皮革损坏的重要原因。虽然皮革的磨损牢度目前尚未作为国家标准进行考核,但皮革的耐磨性实验仍是衡量其质量所不可缺少的,它对评定皮革的服用牢度有着极其重要的意义。  根据试验用的不同仪器,常用有两种方法:马丁代尔平磨法和TABER耐磨法  1、

llumina高通量测序平台的应用

  Illumina公司的新一代测序仪Genome Analyzer最早由Solexa公司研发,利用其专利核心技术“DNA簇”和“可逆性末端终结(reversible terminator)”,实现自动化样本制备及基因组数百万个碱基大规模平行测序。Illumina公司于2007年花费6亿美金的巨资收

llumina高通量测序平台的应用

  Illumina公司的新一代测序仪Genome Analyzer最早由Solexa公司研发,利用其专利核心技术“DNA簇”和“可逆性末端终结(reversible terminator)”,实现自动化样本制备及基因组数百万个碱基大规模平行测序。Illumina公司于2007年花费6亿美金的巨资收

基因表达轮廓(gene expressed profile)技术-1

基因表达谱或基因表达轮廓(gene expressed profile)技术就是利用mRNA提取、cDNA合成、酶切、连接、PCR及分子杂交等分子生物学基础操作技术,将某一生物材料在某一特定阶段表达的基因全部展示出来,通过测序及与数据库比较或通过目标和对照样品中所表达基因的比较,可以找出特异表达

知识分享:维真腺病毒系统产品手册

  产品说明书   本产品仅限用于研究,严禁用于疾病诊断。   本产品仅供购买方内部研究使用,未经Vigenebio公司书面许可,严禁转售。   产品有限责任担保   Vigenebio保证您收到的产品符合产品目录上的规格。本担保规定了Vigenebio更换产品的责任。Vigenebio不提

中检院发布二代测序试剂质量评价通用原则

  一.前言  本指导原则主要针对第二代测序(next generation sequencing,NGS)技术检测试剂(以下简称“NGS检测试剂”)产品质量提出指导性要求,涉及基本原则、主要原材料、检测流程及性能评价等方面。  本指导原则是对企业和检验人员的指导性文件,但不包括注册审批所涉及的行政

NGS检测试剂生产应获得《医疗器械生产许可证》

  为加强第二代测序技术检测试剂的规范和指导,进一步保证和提高相关产品的质量,8月8日,中国食品药品检定研究院(中检院)组织制定了《第二代测序技术检测试剂质量评价通用技术指导原则》(下称《指导原则》)。  该文件是中检院发布的首个质量评价技术指导原则,旨在对产品设计、研发及验证的各关键环节进行规范,

知识分享:Vigene Cre-loxP 重组系统腺相关病毒产品说明

  一.Cre-loxP重组系统作用原理   Cre重组酶和loxP位点   Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码,是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能够特异性识别lo

新一代测序技术(下)-SOLiD (ABI)

 【摘要】 2005年454公司首推划时代的新一代测序仪,从而引发了测序市场上454、Illumina、ABI等公司在新一代测序技术上的比拼高潮。也正是这种你追我赶,让绘制人类全基因组图谱由过去的耗费4.37亿美元和13年时间,骤然缩短到如今SOLiD 3运行一次即获得50GB可定位测序数据。新一代

Science:揭示大脑学习区分不同环境刺激机制

  沙沙作响的树叶,摇摇欲坠的树枝:对一只小鼠而言,只要不是一只猫突然从矮树丛蹦出,这些感觉印象起初可能似乎是无害的,但是如果确实是猫出现的话,这些感觉印象就是掩盖威胁生命的危险的信号。如今,在一项新的研究中,来自德国哥廷根市马克斯-普朗克实验医学研究所(Max Planck Institute o

赛默飞世尔科技:为蛋白质组学提供深层次解决方案

  定量蛋白试剂盒  在蛋白分析相关的试剂消耗品方面,Thermo Fisher Scientific都是直接在仪器上开发的。由于试剂和仪器时配套的,从而能够提高分析效率。例如细胞培养氨基酸稳定同位素标记技术(SILAC)和串联质谱标签(tandem mass tag)试剂盒。  细胞培养氨基酸稳定

深度学习在雷达中的研究综述(二)

其中, J(w,b) 为对应自编码器代价函数, β 为控制系数性惩罚因子权重。2.3 DBN基本原理DBN是一个概率生成模型,其建立一个观测数据与标签之间的联合分布。并且DBN由多个受限玻尔兹曼机(Restricted Boltzmann Machine, R

重组系统腺相关病毒产品说明

一.Cre-loxP重组系统作用原理Cre重组酶和loxP位点Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码,是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能够特异性识别loxP位点。LoxP(l

shRNA干扰载体构建

产品技术背景pRI系列载体是基于III类RNA聚合酶启动子:人类H1启动子的专用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始位点和终止信号,H1启动子转录产物精确生成人工设计的shRNA,shRNA经过RISC剪切后形

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成

科学仪器学科与技术进展的研究报告

  2.蛋白质组学技术与仪器   (1)以高准确度质谱技术为核心的规模化蛋白质鉴定技术与仪器   为了适应蛋白质组研究的需要,从高分辨率、高灵敏度的蛋白质分离与鉴定的线性离子阱-质谱仪(LTQ)到2005年刚推出的LTQ-Orbitrap质谱仪,以及具有小于2ppm的准确度的傅里叶变换离子回

科学仪器学科与技术进展的研究报告(九)

  C)Nanopore sequencing (纳米孔测序方法)  采用完全不同的方法来鉴别DNA分子上的单个碱基,被称为纳米测序。以4种碱基间的物理性质差别为基础,将这种差别转变成为可以检测的信号,从而进行测序。此方法测序的是单个DNA分子,并不需要DNA的扩增。此方法目前还处于理论阶

液相色谱柱的使用与维护

☆ 液相色谱柱的安装  液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。1、液相色谱柱的结构:a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。  柱接头采用低死体积结构,柱接头

藻蓝蛋白的提取、纯化及紫外可见光谱仪检测藻蓝蛋白...-1

一、实验目的 学习并掌握提取、纯化藻蓝蛋白及紫外可见光谱仪检测蛋白纯度的方法 二、实验材料 螺旋藻藻粉 三、实验设备 天平,量筒,塑料杯,药匙,小烧杯(5个),铁架台,铁夹,玻棒(若干),胶头滴管(若干),滤纸,收集器,树脂柱,梯度洗脱器,蠕动,磁力搅拌器,高速离心机

简单易懂:一个国家级实验室的安全注意事项汇总

  实验室区域行为规范  1.不得在实验室饮食、储存食品、饮料等个人生活物品;不得做与实验、研究无关的事情。  2.整个实验室区域禁止吸烟(包括室内、走廊、电梯间等)。  3.未经实验室管理部门允许不得将外人带进实验室。  4.熟悉紧急情况下的逃离路线和紧急应对措施,清楚急救箱、灭火器材、紧急洗眼装

国家级实验室的安全注意事项有哪些?

  实验室区域行为规范   1.不得在实验室饮食、储存食品、饮料等个人生活物品;不得做与实验、研究无关的事情。   2.整个实验室区域禁止吸烟(包括室内、走廊、电梯间等)。   3.未经实验室管理部门允许不得将外人带进实验室。   4.熟悉紧急情况下的逃离路线和紧急应对措施

实验室安全说明书

  与实验室安全相关的话题永远不过时,  实验室区域行为规范有哪些?  化学品要如何储藏与保管?  有机溶剂如何使用?  这些问题备受关注。  今天为你详细阐述实验室安全的相关注意事项,仔细阅读,会带来不一样的收获呦…  实验室区域行为规范  1.不得在实验室饮食、储存食品、饮料等个人生活物品;不得

实验室必备玻璃仪器的使用、维护与清洁标准操作规程

1.目的 建立一个玻璃仪器的使用、清洁标准操作程序,使操作过程标准化。 2.职责 质量部负责本文件的起草,质量部及各部门检验人员负责本标准的实施。 3.范围 本标准适用于玻璃仪器的使用、清洁。 4. 内容 4.1量器类 4.1.1玻璃量器不能加热和受热,不能贮存浓酸或

表达谱芯片的介绍与应用

  基因表达谱芯片可使是科研工作者实现在MRNA水平上同时平行研究成百上千乃至上万条基因的表达关系。 它与传统的研究基因表达的方法(如差异cDNA文库筛选、Northern blot和PCR)相比较,可为使用者节省大量的研究经费和时间并获得范围更广、更具有关联性的研究结果。它的主要用途是用于大规模分

质谱和蛋白质组学:击中目标

Nature Methods - 5, 741 - 747 (2008)   作者:Nathan Blow   分析测试百科  译     近年来,质谱仪大幅提高了动态范围和灵敏度,使研究者们在疾病生物标志物的发现和验

空间蛋白质组学:一种强大的细胞生物学发现工具

真核细胞高度区室化,生物过程被分隔在不同的区室进行。蛋白质功能与亚细胞定位密切相关,不同的区室提供不同的化学环境(例如pH和氧化还原条件)、不同的潜在作用配体或底物。因此,对蛋白质亚细胞定位的严格控制是细胞生理学的重要调控内容。大多数细胞生物学过程涉及蛋白质亚细胞定位的变化,例如转录因子在细胞核-胞

Science深度:癌症靶向治疗新思路“降解垃圾蛋白”

  在目前的癌症靶向药物里,占主导地位的是针对致癌蛋白的小分子或单抗抑制剂。不过,随着时间的推移,许多癌细胞会对这类药物产生抗药性,比如说产生新的突变,或者激活其它致癌蛋白。过去15年来,一些研究人员在寻找其它的抗癌途径时,将目标瞄准了细胞内的“清洁工”——泛素-蛋白酶体系统。泛素-蛋白酶体系统负责