顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验
试剂、试剂盒ATEN 缓冲液聚乙烯乙二醇T5E5 缓冲液Dpn I蛋白酶 KRNA 酶 A5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物仪器、耗材磁铁链霉抗生物素蛋白珠子实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂1X ATEN 缓冲液(见第 1 步)10X ATEN 缓冲液(见方案 1 的配方)聚乙烯乙二醇 (30%PEG,1.5mol/L 氯化钠)T5E5 缓冲液(见方案 1 的配方)2. 酶和酶缓冲液Dpn I蛋白酶 KRNA 酶 A3. 核酸和寡核苷酸5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物4. 专用设备磁铁链霉抗生物素蛋白珠子(强烈推荐使用 Genoviskm 公司的产品)二、方法1. 用 5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物扩增目标片段。PCR 后,按方案 1 所......阅读全文
顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验
试剂、试剂盒ATEN 缓冲液聚乙烯乙二醇T5E5 缓冲液Dpn I蛋白酶 KRNA 酶 A5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物仪器、耗材磁铁链霉抗生物素蛋白珠子实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂1X ATEN 缓冲液(见第 1
顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验
试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液 聚乙烯乙二醇 T5E5 缓冲液 Dpn I 蛋白酶 K RNA 酶 A 5'端为生物
顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验
试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液聚乙烯乙二醇T5E5 缓冲液Dpn I蛋白酶 KRNA 酶 A5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物仪器、耗材 磁铁链霉抗生物素蛋白珠子实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂1X ATEN 缓冲液(见第
生物素链霉抗生物素蛋白系统的方法介绍
中文名称生物素-链霉抗生物素蛋白系统英文名称biotin streptavidin system定 义利用生物素与链霉抗生物素蛋白有很高亲和结合能力设计的检测分析系统。与生物素-抗生物素蛋白系统相似,但链霉抗生物素蛋白表面所带正电荷少,且不含糖基,在实验中非特异性结合远低于抗生物素蛋白。应用学科生
链霉抗生物素蛋白的特性和应用
中文名称链霉抗生物素蛋白英文名称streptavidin定 义一种链霉菌产生的抗生物素蛋白,为四聚体,亚基分子质量约14.5 kDa,在酶联免疫吸附检测中广泛使用,因其不含糖链,比蛋清中的抗生物素结合蛋白在某些情况下更适用。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
标记的链霉卵白素生物素法(LSAB)
标记的链霉卵白素-生物素法(LSAB法)是标记的卵白素技术,20世纪80年代开始采用。基本试剂:① 第一抗体;② 生物素化第二抗体;③ 辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素。实验方法:1. 将固定后的标本用PBS漂洗;2. 于室温下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min,用来密封内源性过
亲和免疫组织化学实验——LSAB-法
实验方法原理LSAB 法或称 S-P 法、SABC 法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有 HRP 或 AKP 酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量 60000,不含糖链,等电点 pI 为 6.0~6.5
SABC法亲和素与生物素系统的操作流程
实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含
SABC法亲和素与生物素系统的操作流程
实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含
Biotin标签蛋白纯化工具的应用类型
Biotin 标签与其它标签的球形蛋白不同,生物素(Biotin)要小得多,这使蛋白质间的干扰更小;同时可以多个生物素偶联在单个蛋白质上,利用链霉亲和素,可使检测效果最大化。此外,生物素含有戊酸侧链,很容易与其它基团反应偶联生成相关衍生物,且不影响链霉亲和素与生物素的结合功能,极大拓展了生物素的应用
生物素姊妹篇链霉亲和素及其衍生物的应用(二)
HeLa细胞中α-微管蛋白的免疫荧光染色:将固定和透化的HeLa细胞中的α-tubulin与兔抗tubulin一抗一起孵育,然后与生物素化的山羊抗兔IgG(H&L)(Cat# 16794)进行孵育,然后加入iFluor™647-链霉亲和素偶联物(Cat# 16966),使用D
生物素姊妹篇链霉亲和素及其衍生物的应用(一)
上一期我们给大家介绍了目前在生化实验中被广泛使用的生物素-链霉亲和素结合系统,以及其中的第一个成员——生物素及其衍生物以及他们的一些常规的应用,今天给大家带来了该系统中另外一个重要的成员——链霉亲和素及其衍生物,与生物素类似,链霉亲和素分子本身也较小,同时也可以与生物活性大分子(例
生物素链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用(一)
生物素-链霉亲和素结合系统的广泛采用主要是由于两个因素。第一个是生物素和链霉亲和素分子本身相对较小,它可以与生物活性大分子(例如抗体)广泛结合,而不会对其功能(即抗体的结合位点)产生抗性。第二个是生物素和链霉亲和素彼此结合的特异性,以及后续键的强度,可实现强大的流线型生物测定应用。
生物素链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用(二)
注意: Ext. Coeff. = 在其最大吸收波长处的摩尔消光系数(单位= cm -1 M -1)。 FQY = 在水性缓冲液(pH 7.2)中的荧光量子产率。 2.生物素化二抗 我们提供生物素化的二抗,可与基于链霉亲和素的扩增技术
抗链霉亲和素IgG抗体干扰抗环瓜氨酸肽(CCP)IgG
血液中抗环瓜氨酸肽(抗CCP)IgG抗体的检测主要用于类风湿性关节炎的诊断。在实验室中,研究人员怀疑由于抗链霉抗生物素蛋白IgG抗体导致的抗CCP抗体IgG抗体错误升高。在本研究中,我们以标准化方法评估了初级保健机构中抗链霉抗生物素蛋白IgG抗体的流行情况以及抗链霉抗生物素蛋白IgG抗体对来自三个不
核糖克隆实验
这个方案只是用 RNA 酶处理 PCR 产物的一种方法。有很多可选择和有效的途径来纯化 PCR 产物以除去引物,接着用酶处理 PCR 产物,然后再除去酶。值得注意的是用 PCR仪设置温浴程序是很方便的。可以在加热步骤完成后选择加上“冷却”步骤,即在冷模块中放置 5 min 甚至过夜。本实验来源于 P
核糖克隆实验
试剂、试剂盒ATEN 缓冲液DNA 缓冲液(TEN)KLA 缓冲液T5E5Dpn IKlentaq LA蛋白酶 K蛋白酶K储存缓冲液RNA 酶 A设计好的载体已经进行 5'端生物素-TEG 修饰并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修饰过的引物卡那霉素(Sigma)四环素Ticarci
核糖克隆实验
试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液DNA 缓冲液(TEN)KLA 缓冲液T5E5Dpn IKlentaq LA 蛋白酶 K蛋白酶K储存缓冲液 RNA 酶 A设计好的载体已经进行 5'端生物素-TEG 修饰并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修饰过的引物卡那霉素(Sigma)四
粗糙链孢霉的杂交
实验概要通过对链孢霉杂交所产生的子囊孢子的观察,了解分离和交换现象,并进行统计,计算交换值。实验原理粗糙链孢霉(Neurospore crassa )属于真菌类,子囊菌纲,球壳目,脉孢菌属,又称为红色面包霉。 粗糙面包霉的营养体是由单倍性(n=7)的多核菌丝组成的。生殖方式有无性生殖和有性生
膜蛋白的纯化实验
实验步骤 一、膜的制备 从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。 大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能
膜蛋白的纯化实验
实验步骤一、膜的制备从细胞或组织中分离质膜是纯化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分离去污剂增溶的膜蛋白的生化方法,因此在质膜成分纯化上投人一些时间会对后续步骤的结果有利。大多数膜蛋白的含量较低, 因此选择易于大量获取并能高表达目的膜蛋白的组织或细胞系就很重要。最近,人们对于将细胞表面蛋白质作为鉴定不同
海狸生物携新品亮相上海慕尼黑
分析测试百科网讯 2020年11月16日-18日,慕尼黑上海分析生化展在上海新国际博览中心隆重召开。苏州海狸生物医学工程有限公司携新品亮相展会,海狸生物拥有四大核心技术平台:磁珠、仪器设备、样本处理以及生物耗材,本次参展他们带来了标记免疫与捕获磁珠IVD“芯片”级原材料、核酸提取磁珠与试剂盒以及
核糖体失活展示系统实验
实验材料 RTA 基因试剂、试剂盒 结合(或漂洗)缓冲液生物素琼脂糖洗脱缓冲液仪器、耗材 RNeasy™mini 试剂盒实验步骤 这里介绍的方法概括了表达载体的构建以及筛选功能蛋白的 RIDS 循环系统的构建。3.1 RIDS 表达载体的构建首先,需要准备含编码 T7 启动子、蛋白质文库、连接子
核糖体失活展示系统实验
核糖体失活展示系统 实验材料 RTA 基因 试剂、试剂盒
核糖体失活展示系统实验
实验材料RTA 基因试剂、试剂盒结合(或漂洗)缓冲液生物素琼脂糖洗脱缓冲液仪器、耗材RNeasy™mini 试剂盒实验步骤这里介绍的方法概括了表达载体的构建以及筛选功能蛋白的 RIDS 循环系统的构建。3.1 RIDS 表达载体的构建首先,需要准备含编码 T7 启动子、蛋白质文库、连接子、RTA 和
生物素化寡聚脱氧胸苷链亲和素磁珠纯化带-Poly(A)+RNA
试剂、试剂盒 GTC 抽提缓冲液 稀释缓冲液 β-巯基乙醇 无 RNase 水 20XSSC 0.5XSSC 1XPBS。仪器、耗材 亲和素-磁珠 (SA-PMP)生物素标记的 oligo(dT) 探针 磁架 75℃ 水浴50 ml 无菌 Corex 离心管 15 ml 螺旋盖锥形离心管 Tissu
生物素化寡聚脱氧胸苷链亲和素磁珠纯化带-Poly(A)+RNA
用磁性微球代转纤维索作为介质,这种方法比较常用且已商品化。试剂、试剂盒GTC 抽提缓冲液稀释缓冲液 β-巯基乙醇无 RNase 水20XSSC0.5XSSC1XPBS。仪器、耗材亲和素-磁珠 (SA-PMP)生物素标记的 oligo(dT) 探针磁架75℃ 水浴50 ml 无菌 Corex 离心管1
生物素化寡聚脱氧胸苷链亲和素磁珠纯化带-Poly(A)+RNA
生物素化寡聚脱氧胸苷-链亲和素磁珠纯化带 Poly(A)+RNA 试剂、试剂盒 GTC 抽提缓冲液 稀释
选择合适的二抗,不再纠结
当你徘徊在如何选择二抗,或不知怎样选择最合适的二抗时,你的眼神告诉我,你纠结了,但是这不是你的错。而当看完以下内容,你将不会再纠结,否则,那将是我的错。1. 弄清一抗的宿主物种是什么二抗指向一抗的物种。如果使用来源于兔的一抗,则需要来源于除兔以外的其它物种的抗兔二抗。例如山羊多克隆抗兔IgG 二抗可
蛋白质的纯化实验
胶体过滤法 实验材料 Sephacryl S-300胶体 试剂、试剂盒