顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验
试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液 聚乙烯乙二醇 T5E5 缓冲液 Dpn I 蛋白酶 K RNA 酶 A 5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物 蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物 仪器、耗材 磁铁 链霉抗生物素蛋白珠子 实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂1X ATEN 缓冲液（见第 1 步）10X ATEN 缓冲液（见方案 1 的配方......阅读全文
顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验
试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液 聚乙烯乙二醇 T5E5 缓冲液 Dpn I 蛋白酶 K RNA 酶 A 5'端为生物
顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验
试剂、试剂盒ATEN 缓冲液聚乙烯乙二醇T5E5 缓冲液Dpn I蛋白酶 KRNA 酶 A5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物仪器、耗材磁铁链霉抗生物素蛋白珠子实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂1X ATEN 缓冲液（见第 1
顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验
试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液聚乙烯乙二醇T5E5 缓冲液Dpn I蛋白酶 KRNA 酶 A5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物仪器、耗材 磁铁链霉抗生物素蛋白珠子实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂1X ATEN 缓冲液（见第
基因检测：找出“绳子”上坏掉的“珠子”
几天前，来自贵州山区的一对夫妇经医院推荐，带着自己的四个孩子来到中关村华康基因研究院进行咨询。四个孩子中，最小的儿子九岁了，只有两岁的智力；几年前，这对夫妇的另外一双儿女，已经分别发病，因不明原因死亡。夫妻俩很恐慌，也很困惑，这会儿还健健康康的其他三个孩子，会不会有一天也突然得病身亡？孩子们究竟
交联染色质免疫共沉淀（XChIP）实验设计
ChIP是一种强大的确定蛋白或者组蛋白修饰在基因组上定位的实验方法。染色质被分离出来后采用抗体与抗原的结合来判定目的蛋白是否结合在特定的DNA序列上或者判定目的蛋白结合位点在全基因组范围的分布（微阵列或DNA序列）。这种方法具有空间性与时效性。该实验设计为如何在细胞中进行ChIP实验提供了详细的步骤
Science子刊：粘性珠子——种新型的避孕药
一种新型的避孕药即将面世：科学家们通过粘性的珠子模仿女性的卵子，竞争性地吸引男性的精子与之结合，从而避免其与真正的卵子相遇。 这种珠子目前在小鼠水平得到了验证，这要归功于一类存在于薄如动物卵细胞表面的蛋白质—ZP2。在受精过程中，精子会与卵细胞表面的ZP2识别并结合，从而促进受精过程的完成。通
核糖克隆实验
这个方案只是用 RNA 酶处理 PCR 产物的一种方法。有很多可选择和有效的途径来纯化 PCR 产物以除去引物，接着用酶处理 PCR 产物，然后再除去酶。值得注意的是用 PCR仪设置温浴程序是很方便的。可以在加热步骤完成后选择加上“冷却”步骤，即在冷模块中放置 5 min 甚至过夜。本实验来源于 P
核糖克隆实验
试剂、试剂盒ATEN 缓冲液DNA 缓冲液（TEN)KLA 缓冲液T5E5Dpn IKlentaq LA蛋白酶 K蛋白酶K储存缓冲液RNA 酶 A设计好的载体已经进行 5'端生物素-TEG 修饰并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修饰过的引物卡那霉素（Sigma)四环素Ticarci
核糖克隆实验
试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液DNA 缓冲液（TEN)KLA 缓冲液T5E5Dpn IKlentaq LA 蛋白酶 K蛋白酶K储存缓冲液 RNA 酶 A设计好的载体已经进行 5'端生物素-TEG 修饰并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修饰过的引物卡那霉素（Sigma)四
技术和方案18－染色质免疫沉淀
试剂、试剂盒甲醛甘氨酸TBS蛋白酶抑制剂裂解缓冲液免疫共沉淀洗脱液TESTE仪器、耗材超声波粉碎仪实验步骤1.培养要分析的细胞。每一个样品，需要在三角瓶中培养 50~100ml 细胞至 OD600 大约为 1。2.甲醛处理细胞交联蛋白质和 DNA。加甲醛到细胞中至终浓度为 1%(37% 的甲醛按 1
核糖克隆实验
—、材料1. 缓冲液、溶液和试剂.10XATEN 缓冲液0.5mol/LTris-HCl,pH7.92.5mol/L 氯化钠0.25mol/L Na4EDTA,pH7.9甜菜碱（SigmaB-2629)蓝色葡聚糖（bluedextran)(SigmaD
FDA关于粗品肝素钠来源检测的方法（三）
3. 实时荧光定量PCR扩增设计该操作流程/步骤是为使用Cepheid的SmartCycler分析猪源肝素样品中反刍动物DNA的存在。在其他操作平台上使用该步骤需要适当的加以调整以验证这部分是否符合（相对应平台的）标准程序。 3.1. 准备实时检测a. 从冰箱中取出装有样品制备珠管的可重复用密封袋。
核糖体失活展示系统实验
实验材料RTA 基因试剂、试剂盒结合（或漂洗）缓冲液生物素琼脂糖洗脱缓冲液仪器、耗材RNeasy™mini 试剂盒实验步骤这里介绍的方法概括了表达载体的构建以及筛选功能蛋白的 RIDS 循环系统的构建。3.1 RIDS 表达载体的构建首先，需要准备含编码 T7 启动子、蛋白质文库、连接子、RTA 和
核糖体失活展示系统实验
实验材料 RTA 基因试剂、试剂盒 结合（或漂洗）缓冲液生物素琼脂糖洗脱缓冲液仪器、耗材 RNeasy™mini 试剂盒实验步骤 这里介绍的方法概括了表达载体的构建以及筛选功能蛋白的 RIDS 循环系统的构建。3.1 RIDS 表达载体的构建首先，需要准备含编码 T7 启动子、蛋白质文库、连接子
核糖体失活展示系统实验
核糖体失活展示系统 实验材料 RTA 基因 试剂、试剂盒
对基于微管的运动蛋白进行性质鉴定实验1
通过乳胶珠沿微管的移动来观察基于微管的运动蛋白活性实验材料微管试剂、试剂盒聚赖氨酸溶液仪器、耗材盖玻片实验步骤1. 准备该显微检测所需的盖玻片：(1) 盖玻片在 200 μg/ml 聚赖氨酸溶液中室温过夜。(2) 玻片在盛有 15 ml 蒸馏水的培养皿中翻转洗涤 4 次，每次 10 分钟。(3) 洗
对基于微管的运动蛋白进行性质鉴定实验
实验材料 微管试剂、试剂盒 聚赖氨酸溶液仪器、耗材 盖玻片实验步骤 1. 准备该显微检测所需的盖玻片：(1) 盖玻片在 200 μg/ml 聚赖氨酸溶液中室温过夜。(2) 玻片在盛有 15 ml 蒸馏水的培养皿中翻转洗涤 4 次，每次 10 分钟。(3) 洗过的盖玻片风干并存放在无灰尘的容器中直到使
一文看懂生物磁珠、分离纯化应用
磁珠可轻松有效地分离生物分子。本文比较不同的表面化学修饰磁珠，希望对大家的日常工作能有所帮助，在需要之余能够找到适合您应用的类型。什么是磁珠？磁珠由微小的氧化铁颗粒（20至30 nm）组成，例如磁铁矿（Fe3O4），它们具有超顺磁性。超顺磁珠与常见的铁磁体不同，因为它们仅在存在外部磁场的情况下才会表
对基于微管的运动蛋白进行性质鉴定实验
通过乳胶珠沿微管的移动来观察基于微管的运动蛋白活性通过微管滑行来观察基于微管的运动蛋白活性实验材料微管 试剂、试剂盒聚赖氨酸溶液
对基于微管的运动蛋白进行性质鉴定实验
通过乳胶珠沿微管的移动来观察基于微管的运动蛋白活性 通过微管滑行来观察基于微管的运动蛋白活性 实验材料 微管
免疫沉淀（IP）常见问题分析与解决办法
免疫沉淀（IP）常见问题分析 问题 可能原因 解决办法 高背景 吸取了不溶于去污剂中的蛋白（沉淀） 离心后立刻吸取上清，如果发生了重悬，则需要再次离心
荧光RNA随机引物触发的聚合酶链反应实验（二）
##六、从组织或培养细胞提取 RNARNA可以从各种来源的样本包括培养的细胞（例如神经元细胞、肝细胞等）和组织中分离得到（见 注 释 1) 。 mRNA 的 纯 化 对 FRAP-PCR 方法来说并不需要，因为mRNA 仅占细胞总 R N A 的 3 % 〜5 % (13)。因而在本章所描述
随机RNA文库的SELEX筛选实验
实验方法原理 SELEX 技术是一种利用随机寡核苷酸（DNA 或 RNA）文库筛选靶分子的特异性配基的组合化学技术。最常用的是随机 RNA 文库，因为 RNA 分子中除 G-C、A-U 碱基对以外，还有 G-U 等变偶碱基对的存在，可以形成发夹、假结、凸环、G-四聚体等多种空间结 构，它
免疫沉淀－(IP)
实验概要免疫沉淀是一种纯化蛋白质的方法。将我们感兴趣的一种蛋白质的抗体与细胞提取液孵育，以使抗体和蛋白质在溶液中结合。然后用protein A/G 耦合的琼脂糖凝胶，从样品中将抗体/抗原复合物提取出来。这种物理方法可将所需蛋白质从样品中分离。然后样品可以通过SDS-PAGE 进行分离并做 Wes
免疫沉淀－(IP)
实验概要免疫沉淀是一种纯化蛋白质的方法。将我们感兴趣的一种蛋白质的抗体与细胞提取液孵育，以使抗体和蛋白质在溶液中结合。然后用protein A/G 耦合的琼脂糖凝胶，从样品中将抗体/抗原复合物提取出来。这种物理方法可将所需蛋白质从样品中分离。然后样品可以通过SDS-PAGE 进行分离并做 Wes
多重PCR（Multiplex－PCR）
一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR)，又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多
PCR简介/PCR仪
PCR的要素基本的PCR须具备PCR仪图册1.要被复制的DNA模板 Template2.界定复制范围两端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq. Polymearse4.合成的原料（四种脱氧核苷酸）及水。 PCR仪工作原理利用升温使DNA变性，在聚合酶的作用下使单链复制成双链，进而达到基因复制
Troubleshooting－for－PCR－and－multiplex－PCR
Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles.COMPONENTVOLUMEFINALCONCE
多重PCR（Multiplex－PCR）
一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR)，又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多
重叠PCR—overlap－PCR
1、简介 重叠PCR也是基本的PCR原理：变性-退火-延伸。不同的是在重叠PCR过程是两个或者几个片段重叠延伸之后，再进行指数扩增的PCR过程。 2、基本原理*步：PCR产生两个或者几个片段，这几个片段之间必须有重叠区。 第二步：以两个片段为例，见上图，*步产生的两个片段，A D链之间有互补，B